Þjónusta við þróun einstofna mótefna

Alpha Lifetech Inc.getur veitt spá um epitóp, peptíðmyndun, próteintjáningu, framleiðslu fjölstofna eða einstofna mótefna sem og hreinsun mótefna úr frumurækt, kviðarholsvökva eða heilu sermi.

Alpha Lifetech Inc.hefur reynslu af því að veita viðskiptavinum ýmsar stöðugar frumulínuþjónustur, þar á meðal blendingsfrumur, erfðabreytingarfrumulínur, niðurfelldar frumulínur og ofurtjáningarfrumulínur. Við reynum að bjóða upp á háþróaða sérsniðna frumulínuþjónustu fyrir alla viðskiptavini og þjónusta okkar er viðurkennd og traust.

Stefna um mótefnaþróun

1. Hönnun og undirbúningur mótefnavaka
Þessir mótefnavakar geta verið prótein, peptíð eða aðrar sameindir. Hönnun ónæmisvaka krefst heildstæðrar nálgunar sem samþættir þekkingu á uppbyggingu mótefnavaka, ónæmisfræði og afhendingarkerfum. Alpha Lifetech býr yfir hönnunartækni fyrir mótefnavaka sem getur hannað ónæmisvaka fyrir viðskiptavini sem þurfa á því að halda.
Alpha Lifetech býður upp á endurmyndaðar próteinvörur fyrir viðskiptavini að velja úr. Við höfum fjölbreytt próteintjáningarkerfi, svo sem E. coli tjáningarkerfi, gersjáningarkerfi, bakulóveiru-skordýratjáningarkerfi, spendýratjáningarkerfi o.s.frv., til að framleiða þau endurmynduðu prótein sem þú þarft fyrir rannsóknir.

2. Ónæmisaðgerðir gegn dýrum
Alpha Lifetech getur útvegað viðskiptavinum ónæmisvaka og þú getur valið úr ónæmum dýrum eins og mýs, kanínum, kindum, alpakka, naggrísum, hamstrum o.s.frv.

3. Aðferðir til að framleiða einstofna mótefni

●Framleiðsla á Mabs með Hybridoma tækni
Blendingsfruma er blendingsfruma sem myndast við samruna tveggja gerða frumna, þ.e. mergæxlisfrumulínu músa og plasmafrumna (eitilfrumna B), þar sem arfblendna fruman getur framleitt samfelld mótefni gegn viðkomandi mótefnavaka in vitro. Framleiðsla á blendingsfrumulínu samanstendur af þremur hlutum: mótefnavakahönnun (hapten, smásameindir og peptíð), ónæmingu dýra, frumusamruni og jákvæðri klónaskimun. Með því að nota einstakar ónæmisaðferðir náum við einstaklega mikilli skilvirkni frumusamruna (1-10 blendingsfrumur á hverjar þúsund B frumur) og háum mótefnatítrum, sem hámarkar árangur okkar í síðari greiningarprófum sem fela í sér lífefnafræðilega skimun, in vitro frumutengdar prófanir og dýrarannsóknir.

●Framleiðsla á Mabs með fagasýningartækni
Fögasýning býður upp á aðra aðferð til að mynda einstofna mótefni. B-eitilfrumur eru einangraðar úr dýrablóði og mRNA þeirra er dregið út. Með PCR er þetta mRNA breytt í cDNA, sem magnar alla VH og VL hluta. Þessir hlutar eru síðan klónaðir í vektor, venjulega sem einkeðju breytileg brot (scFv), ásamt PIII próteini bakteríufága. Í kjölfarið er þessi smygildi notuð til að smita E. coli, sem leiðir til þess að bókasafn sem inniheldur um það bil 10^10 frumur er búið til með ígræðslu með hjálparfága. E. coli getur þá seytt bakteríufáganum sem hýsir VH og VL hlutana sem hluta af hjúp sínum. Að því loknu er hægt að velja tiltekna VH og VL hluta sem miða á mótefnavakann sem um ræðir og nota til að endursýkja E. coli með bakteríufáganum. Frumur sem innihalda plasmíðið eru síðan einangraðar og raðgreindar.

4. Samrunaskimun

●Frumusamruni og val
Uppskornu B-frumurnar eru síðan samrunnar við mergæxlisfrumur, sem eru krabbameinsfrumur sem geta fjölgað sér endalaust í ræktun. Samruninn er venjulega náð með aðferð eins og pólýetýlen glýkól (PEG) samruna.
Eftir samruna eru blendingsfrumurnar ræktaðar í sértækum ræktunarvökva sem gerir aðeins blendingsfrumunum kleift að lifa af. Vökvinn inniheldur venjulega amínópterín, sem kemur í veg fyrir vöxt ósamruna mergæxlisfrumna.

●Skimun og lokun
Frumurnar sem myndast eru skimaðar fyrir framleiðslu mótefna sem eru sértæk fyrir markmótefnavakann. Þetta er venjulega gert með aðferðum eins og ensímtengdri ónæmisbælandi greiningu (ELISA), Western blot, ónæmisútfellingu og flæðifrumusjá.

Þegar blendingsfrumur sem framleiða mótefnið hafa verið greindar eru þær klónaðar til að mynda þýði af eins frumum. Þetta tryggir að mótefnið sem framleitt er af hverri blendingsfrumu sé eins.

5. Staðfesting á virkni mótefna
Alpha Lifetech býður upp á staðfestingu á virkni mótefna, svo sem Western blotting, ónæmisvefjaefnafræði eða virkniprófanir, til að greina einstofna mótefni og staðfesta sértækni, sækni og virkni mótefna.

6. Hagnýting mótefna
Hreinsun mótefna úr ræktunaryfirborði með aðferðum eins og sækniskiljun próteins A eða próteins G, og Alpha Lifetech getur einnig boðið upp á aðferðir til að breyta mótefnum til að bæta sækni mótefna.

7. Framleiðsla mótefna
Alpha Lifetech getur metið mótefni fyrir skimun með mikilli afköstum og stórfellda framleiðslu.