Pallur fyrir peptíðasafn fyrir fagasýningu

Með því að nota fagasýningartækni getur Alpha Lifetech veitt viðskiptavinum sínum hágæða þjónustu við smíði og skimun á fagasýningarpeptíðabókasöfnum, þar á meðal línuleg 7 peptíðabókasöfn, línuleg 9 peptíðabókasöfn, línuleg 10 peptíðabókasöfn, línuleg 15 peptíðabókasöfn, línuleg 12 peptíðabókasöfn, hringlaga 7 peptíðabókasöfn og önnur peptíðabókasöfn. Fjölbreytni bókasafna, innsetningarhlutfall og jákvætt hlutfall getur náð meira en 90% til að mæta mismunandi þörfum viðskiptavina fyrir fagasýningarpeptíðabókasöfn.

Fögasýningarsöfn eru mikið notuð í lífeðlisfræðilegum rannsóknum og forritum. Til dæmis, í mótefnaverkfræði og mótefnaþróun, er hægt að nota fögasýningarsöfn til að skima og bæta mótefnaafbrigði; í lyfjaskimun og uppgötvun lyfjamarkmiða er hægt að nota fögasýningarsöfn til að leita að próteinum eða peptíðum sem hafa lyfjamöguleika. Í bóluefnarannsóknum er hægt að nota fögasýningarsöfn til að velja mótefnavaka í bóluefnum og þróa bóluefni. Að auki er einnig hægt að nota fögasýningarsöfn á mörgum sviðum eins og rannsóknum á próteinvíxlverkunum, krabbameinsgreiningu og meðferð.

Tækni til að sýna faga

Fögasýningartækni er tækni sem sameinar markpróteingenið við yfirborðspróteingenið á föganum og gerir markpróteinið til staðar á yfirborði fögans í formi samrunapróteina með genatjáningu. Þessi prótein sem birtast á yfirborði fögans geta viðhaldið hlutfallslegri rúmfræðilegri uppbyggingu og líffræðilegri virkni og er hægt að skima, greina og þekkja með því að hafa samskipti við sértæk mótefni eða aðrar sameindir. Sýningarhlutir fögasýningartækninnar eru meðal annars mótefni, mótefnabrot, peptíðbrot, cDNA o.s.frv.

Fögasýningarkerfið felur aðallega í sér M13 fagasýningarkerfi (eins og PⅢ sýningarkerfi, PⅧ sýningarkerfi, o.s.frv.), λ fagasýningarkerfi, T4 fagasýningarkerfi, T7 fagasýningarkerfi, o.s.frv. Hvert þessara kerfa hefur sína eigin eiginleika og hentar fyrir mismunandi rannsóknarþarfir. Vegna lýsogenískra eiginleika sinna leysir M13 faginn ekki hýsilfrumuna eftir að hafa smitast, sem gerir honum kleift að afrita sig stöðugt og tjá erlenda brot innan hýsilfrumunnar, sem hentar fyrir langtíma skimun og stöðuga tjáningu. Vegna stutts lífsferils og mikillar afritunargetu getur T7 faginn hratt framleitt fjölda afkvæma faga, sem hentar fyrir háafkösta skimun og hraða tjáningu.

	M13 fagi	T7 fagi
1. Formfræðileg uppbygging	Þráðlaga fagi	Fjölhyrningslaga fagi
2. Erfðaefni	Hringlaga einþátta DNA sameind	Línulegt, tvíþátta, endanlega óþarft DNA
3. Fjölgun og sýking	Lýsógenískir fagar, sem eru saman komnir í periplasma, geta seyttst úr bakteríuhimnum án þess að leysa upp hýsilfrumur.	Eiturvirkir fagar, afkvæmi faga sem safnast saman í umfrymi bakteríunnar, losna við frumuhimnulýsu.
4. Skjákerfi	Sýningarkerfi var smíðað með því að nota pIII og PVIII kapsíðprótein, sem hentar til að sýna framandi peptíð/prótein af mismunandi stærðum.	Sýningarkerfið er smíðað með 10B kapsíðpróteini, sem krefst ekki seytingarferlis og hentar til að sýna peptíð/prótein sem hafa hamlandi áhrif á seytingarferlið.
5. Kostir notkunar	Það er hentugt til að sýna og langtíma skima smásameindapeptíð.	Það hefur kosti í hraðri tjáningu og mikilli afköstum í skimun á stórsameindapróteinum.

Tegundir peptíðasafns fyrir fagasýningu

Alpha Lifetech hefur reynslu af smíði og skimun á föga-peptíðabókasafni og býður upp á fjölbreytt úrval af peptíðabókasafnum til að velja úr. Samkvæmt lengd peptíðans má skipta því í 7 peptíðabókasöfn, 9 peptíðabókasöfn, 10 peptíðabókasöfn, 12 peptíðabókasöfn og 15 peptíðabókasöfn. Samkvæmt rúmfræðilegri lögun fjölpeptíða má skipta því í línulegt föga-peptíðabókasafn og hringlaga föga-peptíðabókasafn.

Línulegt faga peptíðasafn

Peptíðgenið er sett inn í erfðamengi föga sem erfðaefni hjúppróteins, oftast pIII eða PVIII, og birtist sem beinlínuleg keðja. Línuleg peptíð með beinni keðju geta auðveldlega brotnað niður in vivo og bindingargeta þeirra og stöðugleiki getur orðið fyrir áhrifum.

hringlaga faga peptíðasafn

Breytta hringpeptíðið mun mynda fasta lögun undir áhrifum dísúlfíðtengja eða annarra bindandi tengja, sem mun ekki aðeins bæta efnaskiptastöðugleika og aðgengi til muna, heldur einnig uppfylla betur bindingarkröfur viðtaka-ligand (mótefni-mótefnavaka) lögun.

Ferli peptíðasafns fyrir fagasýningu

Val á fögum

M13-gerð fagar eða T7-gerð fagar eru venjulega valdir sem burðarefni.

Smíði á peptíðasafni fagasýningar

Smíða faga-vektor sem getur innihaldið erfðafræðilega röð erlent próteins eða fjölpeptíðs, sem venjulega inniheldur hvata, sértæk merki og viðeigandi stjórnunarþætti. Innsetning erfðafræðilegrar röð erlent próteins eða peptíðs í faga-burðarefni, venjulega með klippingu og límingu takmörkunarensíma. Smíðaði faga-vektorinn er umbreyttur í hýsilfrumuna, sem gerir faganum kleift að afrita sig og tjá erlent prótein eða peptíð innan frumunnar. Föga-söfn sem innihalda mörg mismunandi erlent prótein eða peptíð eru útbúin með mikilli umbreytingu og mögnun.

Skimun á peptíðasafni fagasýningar

Festið marksameindir (eins og prótein, viðtaka eða mótefni) á fastfasa burðarefni. Ræktið smíðaða fagasýningarpeptíðsafnið með föstu marki til að leyfa peptíðunum á faganum að bindast marksameindinni. Í þessu ferli eru óbundnar bakteríufágar fjarlægðar með þvotti á meðan bakteríufágar sem bindast markinu eru eftirhaldnir og bakteríufágar með mikla sækni eru skolaðir út. Endurheimtu bakteríufágarnir eru magnað upp með því að smita Escherichia coli og síðan settir í næstu umferð skimunar. Það tekur venjulega 3-5 umferðir af skimun til að fá peptíð með mikilli bindingarvirkni.

Hönnun og myndun peptíða

Mynda peptíð út frá skimunarstöðum.

Mynd 1. Smíði og skimunarferli fyrir peptíðasafn faga

Tengdur vettvangur

Alpha Lifetech getur veitt viðskiptavinum sínum hágæða þjónustu við smíði og skimun á peptíðbókasafni fyrir faga.

Fögasýningar mótefnasafn - Alpha Lifetech

Smíðapallur fyrir peptíðbókasafn fyrir fagasýningu

Alpha Lifetech býður upp á fjölda tæknilausna fyrir smíði peptíðbókasafna. Við bjóðum aðallega upp á smíði T7 peptíðbókasafna og smíði M13 peptíðbókasafna eftir fögategundum.

LESA MEIRA

Skimun á fögasýnum - Alpha Lifetech Skimun á fögasýnum - Alpha Lifetech

Skimunarpallur fyrir peptíðasafn faga

Alpha Lifetech hefur mikla reynslu af skimun á peptíðfagabókasafni og veitir öflugan tæknilegan stuðning við lyfjaþróun smásameinda, klíníska greiningu, sjúkdómsmeðferð og líffræðilegar rannsóknir.

LESA MEIRA