Þjónusta við uppgötvun mótefna gegn scFv

Alpha Lifetech Inc.er stolt af því að bjóða upp á alhliða þjónustu við gerð bókasafna hjá SCFV til að mæta fjölbreyttum þörfum vísindamanna um allan heim. Markmið okkar er að skilja og mæta kröfum ólíkra viðskiptavina og aðstoða við öll væntanleg og upprennandi vandamál í rannsóknarvinnu.

Hvað er scFv - mótefni með breytilegu broti (e. Single Chain Variable Fragment Antibody)?

Einkeðju mótefni samanstendur af léttum (VL) og þungum (VH) mótefnisbrotum sem tengjast saman með sveigjanlegum peptíðtengi, sem auðvelt er að tjá á virku formi á yfirborði faga og er því almennt þekkt sem einkeðju breytilegt brot (scFv). scFv brotið er minnsta eining immúnóglóbúlínsameindar (að undanskildum nanóefnum) sem hefur hlutverk í mótefnavakabindingarstarfsemi og gerir próteinverkfræði kleift að bæta eiginleika scFv (einkeðjubrots breytilegt) svo sem aukningu á sækni og breytingu á sértækni. Hjá Alpha Lifetech Inc. hafa scFv mótefni aðallega verið smíðuð úr blendingsfrumum, miltafrumum úr ónæmum músum og B eitilfrumum úr mönnum. Heildar RNA eða mRNA er fyrst einangrað úr blendingsfrumum, milta, eitlum og beinmergsfrumum og síðan umritað í cDNA til að þjóna sem sniðmát fyrir mótefnagensamþættingu (PCR).

Tækni til að sýna fasa fyrir þróun mótefna scFv

Fjölbreytileiki bókasafns er ákvarðaður af fjölda sjálfstæðra klóna. Til að framleiða stórt scFv mótefnasafn munu vísindamenn okkar nota okkar sérhannaða tveggja þrepa aðferð til að búa til bókasafn. Í fyrsta skrefi þess ferlis sem lýst er eru frumbirgðir útbúnar úr PCR afurðum sem kóða fyrir VH, Vκ og Vλ lénunum, sem gefur dæmigerð meðalstór bókasöfn (1 - 100 milljónir klóna). Í öðru skrefi eru VH (eða VL) brot einangruð með meltingu plasmíð DNA sem hreinsað er úr frumbirgðunum og klónuð í viðtakanda fagemíð vektor sem inniheldur VL (eða VH) birgðirnar. Þessi nýjung eykur stærð bókasafnanna verulega (1010-1012 klónar).

Stórfelld og afkastamikil skimun á scFv mótefnum

Fyrir stórfellda framleiðslu á scFv er ljóst að val á tjáningarhýsli mun hafa veruleg áhrif á hönnun ferlisins, vinnsluaðferðir og kostnað ferlisins. Val á framleiðsluleið mun ráðast af mikilvægi eftirþýðingarbreytinga og tímalínu fyrir klíníska þróun og hagfræði, sem einnig er í raun háð „hýsilkerfinu“. Það er ekkert alhliða tjáningarkerfi sem tryggir hátt tjáningarstig vörunnar fyrir fjölbreytt úrval mismunandi mótefna eða jafnvel próteina.