VHH mótefni er náttúrulegt mótefni gegn léttri keðju (VL) sem finnst í sermi úlfalda. Uppbygging VHH mótefnisins er einföld og samanstendur af aðeins tveimur þungum keðjum (VH). Nanobodies samanstanda af breytilegu svæði þunga keðjunnar (VHH) með mólþunga upp á um 15 kDa. VHH mótefnið hefur eðlilega getu til að þekkja mótefnavaka og sýnir framúrskarandi sækni, framúrskarandi sértækni, framúrskarandi stöðugleika og framúrskarandi gegndræpi. Mótefni gegn uppbyggingunni hafa síðan fundist í öðrum dýrum, svo sem alpökkum og hákarlum. Nanobodies, sem innihalda aðeins eitt breytilegt svæði þunga keðjunnar og tvö hefðbundin CH2 og CH3 svæði, þrátt fyrir að hafa ekkert VL lén, eru mjög stöðugt mótefni með einu léni og minnsta þekkta bindieiningin með mótefnavirkni. Alpha Lifetech getur veitt viðskiptavinum sínum, þar á meðal undirbúning nanólíkama, smíði og skimun nanólíkamabókasafns, VHH nanólíkamatjáningu og fjölbreytt úrval þjónustu. Í gegnum nanólíkamamyndun og þróunarvettvang fyrir fagasýningu getur það á skilvirkan hátt smíðað og skimað, þar á meðal fjölbreytt úrval af mismunandi gerðum af fagamótefnabókasafni, og veitt viðskiptavinum okkar sértækar og mjög sértækar mótefnalausnir. Við getum einnig þróað faglegar aðferðir til að gera mótefni manngerðar fyrir viðskiptavini okkar, sem hægt er að manngera fyrir nanólíka, og fyrirtæki okkar jafngildir næstum því mannlegum mótefnum.

Í fyrsta lagi gerir alpakka, án nokkurrar sjúkdóms, ónæmisvaka kleift að örva ónæmiskerfi sitt til að framleiða ónæmissvörun og þessi dýr geta framleitt mótefni í einu léni. Síðan einangruðum við stakar B-frumur úr PBMC alpakka og RNA úr B-frumum var dregið út og umritað í cDNA. Að lokum var það notað sem sniðmát og mark VHH röðin okkar skimuð með rafdrætti. Næst framkvæmdum við raðgreiningu á skimuðu VHH mótefnaröðinni, sem getur bætt stöðugleika og sækni VHH mótefnisins. Á sama tíma getum við einnig framkvæmt staðbundna stökkbreytingu og stöðugleikaskimun á VHH mótefnum. Við getum náð meiri stöðugleika VHH mótefnastökkbreytinga með því að innleiða sérstakar aðferðir eins og ákveðnar sértækar stökkbreytingar fyrir skimun. Verkfræðingurinn setti síðan VHH röðina sem myndaðist inn í viðeigandi tjáningarvektor (eins og plasmíð, veirur o.s.frv.) fyrir VHH mótefnatjáningu. Að lokum, með fagasýningartækni eða gersýningartækni, eru VHH mótefni tjáð á yfirborði hýsilsins og síðan eru nanómótefni sem geta bundist markmótefnavakanum sérstaklega valin með því að nota húðaða mótefnavaka og ELISA. Alpha Lifetech raðgreindi og staðfesti einnig valda nanólíkama til að tryggja réttleika og virkni nanólíkamaraðanna sem afhentar voru viðskiptavinum.

VHH tækni nýtir sér ýmsar framfarir í erfðatækni, þannig að markgenið er endursplittað og endurraðað saman við eðlilegar aðstæður, sem getur veitt mjög bindandi tól fyrir aðra tækni, sem getur innihaldið ýmis merki, og mótefnin sem framleidd eru með VHH tækni eru þægileg til hreinsunar. Með því að nota háafköst skimunartækni getur Alpha Lifetech skimað VHH mótefni með sértækum aðgerðum sem viðskiptavinir þurfa úr fjölda mótefna á stuttum tíma. Á sama tíma er hægt að framleiða VHH mótefni endalaust og hagkvæmt þegar VHH mótefni eru útsett fyrir háum hita og öðrum leysum. Hægt er að erfðabreyta VHH mótefni til að skapa aðrar notkunarmöguleika, svo sem að verða stoðir, merkingar og breytingar á tilteknum amínósýrum. VHH mótefni henta fyrir hvaða algengan vettvang sem er sem notar hefðbundin mótefni, svo sem örtítrunarplötur, rafefnafræðilega lífefnaskynjara og hliðarflæðistæki. Vegna minni stærðar VHH mótefna geta þau haft meiri þéttleika í bindingarsvæðinu, þannig að VHH mótefni hafa framúrskarandi kost í auknu merki og þar af leiðandi meiri næmni. Á sama tíma hefur VHH mótefni mjög víðtæka notkun í æxlisgreiningu og meðferð, bólgugreiningu, meðferð sjúkdóma í miðtaugakerfi og á öðrum sviðum. VHH mótefni eru sérstaklega gagnleg til að fylgjast með sveppaeiturefnum í matvælum og fóðri þar sem þau eru auðveldlega erfðabreytanleg og hafa framúrskarandi stöðugleika.

Í ónæmisferlinu notum við fjölbreytt ónæmisvaka. Samkvæmt eiginleikum ónæmisvakanna getum við skipt þeim í náttúruleg mótefnavaka, endurröðuð mótefnavaka, tilbúin mótefnavaka og smásameinda mótefnavaka. Náttúrulegir mótefnavakar eru meðal annars veiruónæmisvakar. Hreinsunarferlið fyrir náttúruleg ónæmisvaka er flóknara en hjá öðrum ónæmisvaka og hreinsunarkostnaðurinn er einnig hærri. Veiruónæmisvakinn skiptist í heilveiruóvirkt bóluefni, undireiningabóluefni, veiruvektorbóluefni og mRNA bóluefni. Heilveiruóvirkt bóluefni getur örvað líkamann til að framleiða ónæmissvörun, en veiran þarf að vera alveg óvirk og undirbúningsferlið er flóknara. Fyrir undireiningabóluefnið notuðum við aðeins yfirborðsprótein veirunnar sem mótefnavaka, þannig að öryggi þessa ónæmisvaka er mikið, en bæta þarf við hjálparefni til að auka ónæmisáhrifin. Eftir erfðabreytingu eru adenóveirur og lentiveirar notaðar sem vektorar til að örva ónæmissvörun með veiruafritun og tjáningu. Ónæmisáhrifin eru skilvirk og varanleg, en undirbúningsferlið er flókið, þannig að við þurfum að hafa strangt eftirlit með líffræðilegu öryggi. Þó að mRNA geti verið flutt beint inn í frumur, þannig að frumur geti tjáð mótefnavaka og örvað ónæmissvörun, er þetta ferli erfiðara, sem krefst þess að við tryggjum stöðugleika og skilvirkni mRNA. Þó að endurröðuð mótefnavaka séu ólík náttúrulegum mótefnavaka að lögun, geta þeir farið í mikla iðnaðarframleiðslu. Smásameindaprótein eða fjölpeptíðmótefnavaka er hægt að framleiða með in vitro myndunaraðferðum. Uppbygging þeirra er stjórnanleg, en hún getur verið flókin í hönnun. Smásameindamótefnavakar eru að mestu leyti smásameindasambönd eins og peptíð og núkleótíð, þar sem þau eru ekki ónæmisvakandi sjálf, þannig að þau er aðeins hægt að nota sem ónæmisvaka eftir tengingu við stórsameindaflutningsprótein.

Mólmassi nanómótefna er mjög lítill, venjulega um 12-15 kDa, aðeins einn tíundi hluti af hefðbundnu IgG mótefni. Kristallabyggingin er eins og rúgbýbolti, um 2,5 nm í þvermál og um 4,2 nm að lengd. Einstök sameindabygging gerir kleift að komast vel í gegnum blóð-heilaþröskuldinn, hafa styttri helmingunartíma og meiri úthreinsun úr nýrum. Nanómótefnin samanstanda af viðbótarákvörðunarsvæðum og hryggjarsvæðunum. Viðbótarákvörðunarsvæði eru meðal annars CDR 1, CDR 2 og CDR 3. Lengd CDR 3 svæðisins, sem er á bilinu 3 til 28 amínósýrur, tryggir geymslurými nanómótefnasafnsins. Í samanburði við hefðbundið CDR 3 mótefnasvæði með aðeins 8 til 15 amínósýrur, hjálpuðu sum CDR 3 svæðin með lengri CDR 3 okkur að bera kennsl á falda mótefnavaka á yfirborði mótefnavakans. Hryggjarsvæði nanólíkamanna inniheldur FR 1, FR 2, FR 3 og FR 4, með fjórum vatnssæknum amínósýrustökkbreytingum á FR 2, og þessi stökkbreyting eykur vatnsleysni mótefnisins. Sérstakt tvísúlfíðtengi milli CDR 1 og CDR 3 eykur stöðugleika mótefna við háan þrýsting, hátt hitastig, denatúrandi aðstæður og aðrar aðstæður, sem stuðlar að framleiðslu og varðveislu nanólíkamanna og skapar einnig möguleika á nýjum lyfjagjafaraðferðum.