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Piattaforma di screening degli aptameri

Alpha Lifetech ha creato un sistema completo di screening degli aptameri di acidi nucleici, in grado di offrire ai clienti servizi di screening di aptameri di acidi nucleici (inclusi aptameri di RNA e aptameri di DNA) di alta qualità.

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Piattaforma di screening degli aptameri

Tecnologia di screening degli aptameri

Gli aptameri sono sequenze di DNA o RNA a singolo filamento, capaci di ripiegarsi in strutture tridimensionali. Ogni sequenza presenta una regione randomizzata di 20-60 nucleotidi affiancata da regioni di primer fissi 5' e 3', e il blocco di sequenza random contiene 1015 sequenze uniche. Sono in grado di combinarsi con elevata affinità e specificità per le loro molecole bersaglio, in modo simile agli anticorpi. Attualmente, hanno mostrato un ampio potenziale applicativo in molti campi, come la terapia, la diagnosi di malattie e i biosensori, ecc.
Alpha Lifetech vanta una vasta esperienza nella tecnologia di screening dei ligandi, basata sulla tecnica SELEX (Exponential Enrichment Ligand System Evolution) per la selezione in vitro dei ligandi. Dopo anni di sviluppo, Alpha Lifetech ha sviluppato un sistema completo di screening degli aptameri di acidi nucleici, in grado di fornire ai clienti servizi di screening di aptameri di acidi nucleici (inclusi aptameri di RNA e aptameri di DNA) di alta qualità. Sono disponibili molteplici target di screening, come proteine, peptidi, amminoacidi, composti a piccole molecole, nonché vari metodi di screening degli aptameri (come SELEX a biglie magnetiche, SELEX cellulare, SELEX di cattura, ecc.). Il metodo di screening più comunemente utilizzato è lo screening a biglie magnetiche.

Processo tecnico dello screening Aptamer Selex

Il processo di screening degli aptameri con la tecnica SELEX inizia con la creazione di librerie di oligonucleotidi costituite da DNA o RNA. Cicli iterativi di selezione e amplificazione si ottengono incubando la libreria di oligonucleotidi con la molecola target, rimuovendo gli oligonucleotidi non coniugati, eluendo gli aptameri legati e amplificandoli tramite PCR per generare una libreria secondaria per il successivo ciclo di screening. Si ripetono le fasi di legame, partizionamento, recupero e riamplificazione. Le sequenze specifiche arricchite attraverso questo processo emergono come aptameri dominanti all'interno della libreria.

Screening SELEX-Alpha Lifetech
Fig.1 Processo tecnico di screening SELEX

vantaggi dell'aptamero di acido nucleico

Vantaggi Dettagli
Diretto Evitando il tradizionale processo di esperimenti sugli animali e selezionando direttamente dalle librerie in vitro; screening selex per aptameri di molecole target che sono non immunogeniche, poco immunogeniche o addirittura tossiche.
Ampia gamma di applicazioni Le molecole bersaglio possono essere coloranti organici, amminoacidi, proteine, antibiotici, peptidi, vitamine, farmaci, persino cellule, agenti patogeni, virus, tessuti, ecc.
Forte affinità Gli aptameri mostrano elevata specificità e affinità per lo screening in vitro delle molecole target.
Stabilità Gli aptameri sono di piccole dimensioni, facili da ottenere, riproducibili in sintesi e la loro stabilità può essere migliorata mediante sintesi e modifica chimica. Gli aptameri sono chimicamente stabili, hanno una lunga conservabilità e possono essere trasportati a temperatura ambiente.

Applicazione dell'Aptamer

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Analisi della vita

Utilizzare gli aptameri come sonde o elementi biosensori per condurre ricerche sul riconoscimento di molecole biologiche, sull'imaging cellulare e altre analisi della vita.
198-caso-3

Diagnosi della malattia

Sviluppare metodi di diagnosi delle malattie altamente sensibili basati sul legame specifico tra aptameri e molecole bersaglio.
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Ricerca in medicina

e sviluppo

Utilizzare gli aptameri selezionati come molecole medicinali o vettori di medicinali per sviluppare nuovi medicinali mirati.

caso screening di aptameri a piccole molecole

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal primo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il prodotto di recupero ePCR del secondo round di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal secondo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il terzo round di eluizione del prodotto di recupero ePCR

gel di acido nucleico al 3%

Allineamento delle sequenze adattatrici

Sequenza ad alta affinità

Prodotto di arricchimento della biblioteca Prodotto di recupero ePCR

gel di acido nucleico al 3%

Prodotto di recupero ePCR del prodotto di eluizione del 1° round

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal primo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il prodotto di recupero ePCR del secondo round di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal secondo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal primo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il prodotto di recupero ePCR del secondo round di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal secondo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il terzo round di eluizione del prodotto di recupero ePCR

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Allineamento delle sequenze adattatrici

Sequenza ad alta affinità

Prodotto di arricchimento della biblioteca Prodotto di recupero ePCR

gel di acido nucleico al 3%

Prodotto di recupero ePCR del prodotto di eluizione del 1° round

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal primo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il prodotto di recupero ePCR del secondo round di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal secondo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il terzo round di eluizione del prodotto di recupero ePCR

gel di acido nucleico al 3%

Allineamento delle sequenze adattatrici

Sequenza ad alta affinità

Prodotto di arricchimento della biblioteca Prodotto di recupero ePCR

gel di acido nucleico al 3%

Prodotto di recupero ePCR del prodotto di eluizione del 1° round

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal primo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il prodotto di recupero ePCR del secondo round di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal secondo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal primo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il prodotto di recupero ePCR del secondo round di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal secondo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il terzo round di eluizione del prodotto di recupero ePCR

gel di acido nucleico al 3%

Allineamento delle sequenze adattatrici

Sequenza ad alta affinità

Prodotto di arricchimento della biblioteca Prodotto di recupero ePCR

gel di acido nucleico al 3%

Prodotto di recupero ePCR del prodotto di eluizione del 1° round

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal primo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Il prodotto di recupero ePCR del secondo round di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

Recupero ePCR ripetuto dei prodotti dal secondo ciclo di eluizione

gel di acido nucleico al 3%

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