Piattaforma tecnologica degli ibridomi
Alpha Lifetech fornisce ai clienti prodotti e servizi basati su anticorpi e anticorpi ricombinanti di qualità garantita.
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Piattaforma tecnologica degli ibridomi
Alpha Lifetech vanta una vasta esperienza nel campo dello sviluppo di anticorpi. Nel corso degli anni, Alpha Lifetech ha creato una piattaforma completa per lo sviluppo di anticorpi (che include lo sviluppo di anticorpi monoclonali, policlonali, ricombinanti e altri servizi di preparazione e sviluppo di anticorpi).
Alpha Lifetech fornisce ai clienti prodotti e servizi per anticorpi e anticorpi ricombinanti di qualità garantita, e gli anticorpi preparati presentano un'elevata specificità e una buona stabilità. Diversi strumenti e apparecchiature per la purificazione degli anticorpi possono essere utilizzati per fornire servizi di purificazione di anticorpi da varie fonti, come anticorpi monoclonali di coniglio, pecora, pollo e topo, nonché servizi di purificazione per affinità delle proteine A/G e servizi di separazione degli anticorpi.
Grazie a diverse tecniche di preparazione di anticorpi, come la tecnologia delle cellule ibridomatose, Alpha Lifetech è in grado di fornire servizi personalizzati per anticorpi monoclonali e policlonali di diverse specie. Inoltre, offriamo una gamma di servizi che spaziano dal sequenziamento ad alta produttività, alla preparazione di anticorpi, alla purificazione di anticorpi e alla loro validazione. Sceglieremo il metodo di purificazione in base allo scopo specifico del cliente. Grazie a sistemi di piattaforma completi, come la piattaforma di sviluppo anticorpi e la piattaforma proteica, Alpha Lifetech offre servizi a monte e a valle della produzione di anticorpi, fornendo servizi di purificazione, sequenziamento ad alta produttività, validazione di anticorpi e altri servizi tecnici.
Tecnologia degli ibridomi
La tecnologia degli ibridomi può essere utilizzata per preparare anticorpi monoclonali. Fondendo cellule spleniche di topi immunizzati con cellule di mieloma umane o di topo, si formano cellule di ibridomi che secernono anticorpi specifici. Gli anticorpi monoclonali derivati da topi generati possono essere utilizzati nella ricerca scientifica, ad esempio mediante saggi immunoenzimatici (ELISA), radioimmunoanalisi, immunoistochimica, citometria a flusso, purificazione proteica, ecc. I campioni di anticorpi monoclonali includono asciti, surnatante di ibridomi, ecc. Il campione ottenuto iniettando cellule di ibridomi nella cavità addominale di animali e utilizzando l'ambiente fisiologico della cavità addominale dell'animale per produrre anticorpi è chiamato campione di ascite. Le cellule di ibridomi iniettate nella cavità addominale di animali possono proliferare e secernere anticorpi monoclonali, che possono accumularsi nell'ascite. A causa della possibilità di impurità (proteine animali, ormoni, ecc.) in questi anticorpi, è necessaria la purificazione. A causa della funzione di secrezione dei linfociti B, gli anticorpi monoclonali vengono spesso secreti nel terreno di coltura durante la coltivazione di cellule di ibridoma. Il liquido contenente anticorpi monoclonali nel terreno di coltura è chiamato surnatante di ibridoma. La purezza degli anticorpi monoclonali nel surnatante è relativamente elevata, ma è necessaria un'ulteriore purificazione per la preparazione su larga scala, poiché vengono ottenuti tramite coltura in vitro.
La purificazione degli anticorpi permette di isolare anticorpi ad elevata purezza dai complessi. Attualmente, la purificazione per affinità degli anticorpi e la separazione e purificazione degli anticorpi sono metodi di purificazione degli anticorpi comunemente utilizzati, tra cui principalmente la purificazione delle proteine A/G, la cromatografia a scambio ionico, la filtrazione su gel, la precipitazione e la cromatografia a interazione idrofobica. Tra questi, il servizio di purificazione per affinità delle proteine A/G è ampiamente diffuso in diverse applicazioni di purificazione degli anticorpi. Il processo di preparazione degli anticorpi monoclonali di Alpha Lifetech basato sulla tecnologia degli ibridomi è illustrato nella Figura 1.
Fig.1 Diagramma del processo di preparazione di anticorpi monoclonali basato sulla tecnologia degli ibridomi.
Tecnologia degli anticorpi coniugati e degli ibridomi
Il coniugato anticorpo-farmaco (ADC) è un nuovo agente biologico che lega chimicamente anticorpi e farmaci citotossici. Il coniugato anticorpo-farmaco combina la capacità di riconoscimento specifico degli anticorpi con il potente effetto letale dei farmaci citotossici e rilascia con precisione i farmaci citotossici nelle cellule tumorali attraverso gli anticorpi, ottenendo così un trattamento mirato. La porzione anticorpale nei farmaci ADC viene spesso preparata tramite la tecnologia degli ibridomi o altre tecniche di produzione di anticorpi, come la tecnologia degli anticorpi basata sull'ingegneria genetica. La tecnologia degli ibridomi fornisce materie prime anticorpali di alta qualità per i farmaci ADC. I farmaci ADC e gli anticorpi monoclonali preparati tramite la tecnologia degli ibridomi svolgono un ruolo importante in campi come il trattamento del cancro. Possono essere utilizzati da soli o in combinazione per migliorare l'efficacia terapeutica.
Gli anticorpi monoclonali preparati con la tecnologia degli ibridomi presentano un'elevata specificità, possono legare e riconoscere accuratamente antigeni specifici e possono essere prodotti su larga scala. Grazie alla tecnologia di sequenziamento degli ibridomi, i geni anticorpali nelle cellule di ibridomi possono essere estratti e sequenziati per ottenere sequenze corrispondenti, il che è vantaggioso per la successiva espressione anticorpale. Gli anticorpi monoclonali preparati con la tecnologia degli ibridomi possono essere utilizzati per rilevare specifici marcatori di malattia, come marcatori tumorali, antigeni virali, ecc., fornendo un valido supporto per la diagnosi precoce delle malattie. Inoltre, possono essere utilizzati anche in esperimenti come l'immunoblotting e l'immunoistochimica per studiarne l'espressione, la localizzazione, la struttura e la funzione.
Flusso di lavoro del servizio di produzione di anticorpi per la tecnologia degli ibridomi
| Passi | Contenuto del servizio | Cronologia |
|---|---|---|
| Fase 1: Immunizzazione degli animali | (1) Immunizzazione animale 4 volte, immunizzazione di richiamo 1 dose, per un totale di 5 dosi immunizzate. (2) È stato raccolto il siero negativo prima dell'immunizzazione ed è stato eseguito l'ELISA sulla quarta dose per rilevare il titolo sierico. (3) Se il titolo anticorpale sierico della quarta dose soddisfa i requisiti, verrà somministrata un'ulteriore dose di immunizzazione 7 giorni prima del prelievo del sangue. In caso contrario, la vaccinazione di routine proseguirà. (4) Potenza qualificata, le cellule della milza vengono isolate per la fusione cellulare. | 10-12 settimane |
| Fase 2: Fusione e screening | (1) Fusione: dopo l'immunizzazione, le cellule della milza del topo sono state raccolte e fuse con le cellule del mieloma. (2) Proliferazione e screening: le cellule ibridoma ottenute sono state sottoposte a proliferazione e screening ELISA per ottenere cloni altamente efficienti. | 6 settimane |
| Passaggio 3: Sottoclonazione | Subclonazione di 15-25 cellule madri positive utilizzando il metodo di diluizione limitata e infine determinazione di 10-15 cloni positivi | 3-4 settimane |
| Fase 4: Produzione di ascite e purificazione degli anticorpi | (1) Produzione di ascite: per la produzione di ascite nei topi vengono utilizzati 10-15 ceppi di ibridomi (se si ottiene un gran numero di ceppi di ibridomi, questi verranno inviati in forma cellulare) (2) Identificazione dell'ascite: rilevamento ELISA dell'ascite, potenza (proteina/virus>10 ^ 5, piccola molecola/peptide>10 ^ 4) per la purificazione a valle (3) Purificazione della proteina A/G: Purificazione dell'ascite | 3-4 settimane |
| Fase 5: Consegna | (1) Fornire 3-5 ceppi di ibridomi di anticorpi monoclonali. (2) Ogni cellula di ibridoma fornisce 1 mg di anticorpo purificato (purificazione dell'ascite). (3) Rapporto sul processo sperimentale | 1 settimana |
Specie multiple
L'immunità può essere fornita a vari animali, inclusi, ma non limitati a, topi, conigli, pecore, ecc.
Bersaglio multiplo
Grazie alla tecnologia degli ibridomi, sono disponibili servizi di scoperta di anticorpi a bersaglio multiplo: proteine, peptidi, piccole molecole, virus, proteine di membrana, mRNA, ecc.
Registri di tracciabilità
Standard di controllo qualità QC (potenza immunitaria, controllo qualità PBMC, controllo qualità biblioteca e controllo qualità convalida screening), rapporti sperimentali in inglese, registrazioni sperimentali originali
Programma personalizzato
Personalizzazione personalizzata del programma uno a uno per soddisfare le esigenze del progetto di ricerca di vari clienti
Servizio di sviluppo di anticorpi monoclonali
Possiamo fornire servizi di sviluppo di anticorpi monoclonali di alta qualità, elevata purezza e altamente specifici, inclusa la produzione di anticorpi monoclonali di topo e anticorpi monoclonali di coniglio
Piattaforma tecnologica degli ibridomi
Inclusi programmi di immunizzazione, servizi di preparazione di anticorpi, purificazione di anticorpi, sequenziamento ad alto rendimento di anticorpi, convalida di anticorpi, ecc.
Piattaforma di smistamento di singole cellule B
Alpha Lifetech offre vantaggi in termini di tempi di screening e di ottenimento di anticorpi di alta qualità. È in grado di fornire servizi di progettazione, sintesi e modifica di antigeni, immunità animale, screening di arricchimento di singole cellule B e sequenziamento di singole cellule.
Piattaforma di sviluppo di anticorpi Phage Display
Alpha Lifetech è in grado di fornire servizi tecnici per lo sviluppo di anticorpi phage display, dalla preparazione degli anticorpi, alla purificazione degli anticorpi, al sequenziamento degli anticorpi, ecc.
Risorsa tecnologica correlata
Introduzione alla tecnologia degli ibridomiVIDEO
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16/07/2018 
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