Piattaforma di costruzione di librerie di peptidi Phage Display

Alpha Lifetech dispone di diverse tecnologie per la costruzione di librerie peptidiche. Forniamo principalmente servizi di costruzione di librerie peptidiche T7 e M13 in base al tipo di fago; forniamo servizi di costruzione di librerie peptidiche a loop lineare 7 e 12 in base alla dimensione della sequenza delle molecole peptidiche, ecc. Offriamo anche servizi di costruzione di librerie peptidiche personalizzate. Forniamo anche servizi di sintesi e costruzione di peptidi personalizzati.

La tecnologia "phage display" è una tecnica per il panning di peptidi esogeni funzionali nel fago sulla superficie del capside, mantenendo l'attività strutturale e funzionale della proteina o del peptide esogeno senza influire sulla capacità del fago ricombinante di infettare la cellula ospite. Ogni particella virale fagica può esporre un solo peptide esogeno casuale sulla sua superficie e l'insieme di tutti i fagi che espongono peptidi diversi costituisce una libreria peptidica "phage display". Le librerie peptidiche "phage display" sono potenti strumenti per l'espressione di molteplici peptidi sintetizzati su misura e per lo screening di peptidi specifici, e sono state ampiamente utilizzate nei campi dell'analisi degli epitopi antigenici, dello screening di farmaci e dello sviluppo di vaccini.

Introduzione alla costruzione della libreria dei peptidi

La costruzione di librerie peptidiche consiste nell'amplificare le librerie peptidiche legando sequenze di DNA peptidico in diversi formati alle corrispondenti sequenze proteiche dell'involucro fagico e utilizzando il riassemblaggio fagico per posizionare il peptide target sulla superficie fagica. La costruzione di librerie peptidiche basata sulla tecnologia "phage display" appartiene alla categoria della biosintesi della sintesi peptidica, e sul mercato sono disponibili metodi di sintesi peptidica in fase liquida e in fase solida. Attualmente, Alpha Lifetech dispone di una varietà di tecnologie per la costruzione di librerie peptidiche, in grado di fornire librerie peptidiche pre-assemblate e librerie peptidiche randomizzate in base alla dimensione della sequenza delle molecole peptidiche, tra cui la costruzione di librerie a 7 peptidi, la costruzione di librerie a 12 peptidi, la costruzione di librerie a 15 peptidi, la costruzione di librerie cicliche a 7 peptidi e la costruzione di librerie cicliche a 12 peptidi, e possono anche essere personalizzate per sintetizzare librerie peptidiche per una varietà di tipologie e applicazioni.

Applicazione della costruzione e dello screening della libreria peptidica

Le librerie peptidiche randomizzate mediante tecnologia "phage display" consentono l'accesso funzionale ai peptidi e forniscono un collegamento fisico tra fenotipo (peptide visualizzato) e genotipo (DNA codificato); queste librerie sono adatte a processi di screening che separano i cloni legati da quelli non legati mediante purificazione per affinità. Le librerie peptidiche "phage-displayed" possono essere utilizzate per (i) la caratterizzazione di epitopi cellulari immunitari, (ii) lo screening di peptidi bioattivi legati a recettori o proteine, peptidi legati a bersagli non proteici, peptidi specifici di cellule o organi, ecc. e (iii) lo sviluppo di sistemi di somministrazione di farmaci mediati da peptidi.

Processo di libreria peptidica Phage Display

Fig.1 Piattaforma di costruzione della libreria di peptidi Phage Display

Flusso di lavoro per la costruzione della libreria di peptidi Phage Display

Processo	Contenuto del servizio	Cronologia
1. Sintesi della sequenza nucleotidica	Sintesi casuale di sequenze nucleotidiche di lunghezza specificata dal cliente	2-3 settimane
2. Polimerizzazione e digestione	Polimerizzazione e digestione della sequenza di DNA sintetizzata	1 giorno
3. Costruzione di librerie di elettroconversione	Sono stati costruiti i batteri ospiti ER2738 e poi l'Escherichia coli è stato trasformato con il plasmide ricombinante ben costruito	1 settimana
4. Rilevamento delle dimensioni e della diversità della libreria peptidica	Rilevamento delle dimensioni della libreria peptidica mediante conteggio delle colonie e della diversità della libreria peptidica mediante sequenziamento	2-3 giorni
5. Costruzione della libreria peptidica Phage Display	Infettando la libreria peptidica di confezionamento del fago	1 settimana