Piattaforma per librerie di peptidi con visualizzazione di fagi

Basandosi sulla tecnologia del phage display, Alpha Lifetech è in grado di fornire ai clienti servizi di costruzione e screening di librerie di peptidi di alta qualità, tra cui librerie di peptidi lineari a 7, 9, 10, 15 e 12 peptidi, librerie di peptidi ciclici a 7 e altre librerie di peptidi. La diversità delle librerie, il tasso di inserzione e il tasso di positività possono raggiungere oltre il 90%, per soddisfare le diverse esigenze dei vari clienti in materia di librerie di peptidi a phage display.

Le librerie di fagi sono ampiamente utilizzate nella ricerca e nelle applicazioni biomediche. Ad esempio, nell'ingegneria e nello sviluppo di anticorpi, le librerie di fagi possono essere utilizzate per selezionare e migliorare le varianti anticorpali; nello screening di farmaci e nella scoperta di bersagli farmacologici, le librerie di fagi possono essere utilizzate per ricercare proteine o peptidi con potenziale farmacologico. Nella ricerca sui vaccini, le librerie di fagi possono essere utilizzate per la selezione e lo sviluppo di antigeni vaccinali. Inoltre, le librerie di fagi trovano impiego in molti campi, come la ricerca sulle interazioni proteiche, la diagnosi e il trattamento del cancro.

Tecnologia di visualizzazione dei fagi

La tecnologia del phage display è una tecnica che fonde il gene della proteina bersaglio con il gene della proteina di superficie del fago, rendendo la proteina bersaglio presente sulla superficie del fago sotto forma di proteina di fusione tramite espressione genica. Queste proteine esposte sulla superficie del fago mantengono la loro struttura spaziale e attività biologica e possono essere analizzate, rilevate e riconosciute interagendo con anticorpi specifici o altre molecole. Gli oggetti di visualizzazione della tecnologia del phage display includono anticorpi, frammenti di anticorpi, segmenti peptidici, cDNA, ecc.

Il sistema di tecnologia del phage display comprende principalmente il sistema di visualizzazione del fago M13 (come il sistema di visualizzazione PⅢ, il sistema di visualizzazione PⅧ, ecc.), il sistema di visualizzazione del fago λ, il sistema di visualizzazione del fago T4, il sistema di visualizzazione del fago T7, ecc. Ciascuno di questi sistemi ha le proprie caratteristiche ed è adatto a diverse esigenze di ricerca. Il fago M13, grazie alle sue proprietà lisogeniche, non lisa la cellula ospite dopo l'infezione, il che gli consente di replicarsi continuamente ed esprimere frammenti estranei all'interno della cellula ospite, risultando adatto per lo screening a lungo termine e l'espressione stabile. Grazie al suo breve ciclo vitale e all'elevata efficienza di replicazione, il fago T7 può produrre rapidamente un gran numero di fagi progenie, risultando adatto per lo screening ad alto rendimento e l'espressione rapida.

	Fago M13	Fago T7
1. Struttura morfologica	fago filamentoso	Fago poliedrico
2. Materiale genetico	Molecola di DNA circolare a singolo filamento	DNA lineare, a doppio filamento, terminale superfluo
3. Replicazione e infezione	I fagi lisogenici, assemblati nel periplasma, possono essere secreti dalle membrane batteriche senza lisare le cellule ospiti.	I fagi virulenti, progenie di fagi assemblati nel citoplasma batterico, vengono rilasciati tramite la lisi della membrana cellulare.
4. Sistema di visualizzazione	È stato realizzato un sistema di visualizzazione utilizzando le proteine del capside pIII e PVIII, adatto a esporre peptidi/proteine estranee di diverse dimensioni.	Il sistema di visualizzazione è costruito con la proteina capsidica 10B, che non richiede un processo di secrezione ed è adatta per visualizzare peptidi/proteine che hanno un effetto inibitorio sul processo di secrezione.
5. Vantaggio dell'applicazione	È adatto per la visualizzazione e lo screening a lungo termine di peptidi a piccole molecole.	Presenta vantaggi nell'espressione rapida e nello screening ad alta produttività di proteine macromolecolari.

Tipi di librerie di peptidi con visualizzazione di fagi

Alpha Lifetech vanta una solida esperienza nella costruzione e nello screening di librerie di peptidi tramite phage display e offre una varietà di tipologie di librerie peptidiche tra cui scegliere. In base alla lunghezza del peptide, si possono distinguere librerie da 7, 9, 10, 12 e 15 peptidi. In base alla conformazione spaziale dei polipeptidi, si possono distinguere librerie di peptidi fagici lineari e librerie di peptidi fagici ciclici.

Libreria lineare di peptidi fagici

Il gene del peptide è inserito nella regione codificante della proteina del capside del genoma del fago, solitamente pIII o PVIII, e si presenta come una catena lineare. I peptidi a catena lineare possono degradarsi facilmente in vivo, compromettendo la loro capacità di legame e la loro stabilità.

libreria di peptidi fagici ciclici

Il peptide ad anello modificato assumerà una conformazione fissa sotto l'azione dei legami disolfuro o di altri legami di legame, il che non solo migliorerà notevolmente la stabilità metabolica e la biodisponibilità, ma soddisferà anche meglio i requisiti di legame della conformazione recettore-ligando (anticorpo-antigene).

Processo di visualizzazione di fagi e libreria di peptidi

Selezione dei fagi

Solitamente, come vettori vengono selezionati i fagi di tipo M13 o di tipo T7.

Costruzione di librerie di peptidi con display di fagi

Si costruisce un vettore fagico in grado di contenere una sequenza codificante per una proteina o un polipeptide estraneo, che di solito include un promotore, marcatori di selezione ed elementi regolatori appropriati. L'inserimento della sequenza codificante di una proteina o di un peptide estraneo in un vettore fagico avviene generalmente tramite taglio con enzimi di restrizione e ligazione. Il vettore fagico così costruito viene trasformato nella cellula ospite, consentendo al fago di replicarsi ed esprimere proteine o peptidi estranei all'interno della cellula. Le librerie fagiche contenenti diverse proteine o peptidi estranei vengono preparate attraverso un'ampia trasformazione e amplificazione.

Screening di librerie di peptidi mediante display di fagi

Fissare le molecole bersaglio (come proteine, recettori o anticorpi) su un supporto in fase solida. Incubare la libreria di peptidi a display fagico costruita con un bersaglio fisso per consentire ai peptidi presenti sul fago di legarsi alla molecola bersaglio. Durante questo processo, i batteriofagi non legati vengono rimossi mediante lavaggio, mentre quelli legati al bersaglio vengono trattenuti e i batteriofagi legati ad alta affinità vengono eluiti. I batteriofagi recuperati vengono amplificati infettando Escherichia coli e quindi sottoposti al successivo ciclo di screening. Di solito sono necessari da 3 a 5 cicli di screening per ottenere peptidi con elevata efficienza di legame.

Progettazione e sintesi di peptidi

Sintetizzare peptidi sulla base di siti di screening.

Figura 1. Costruzione e processo di screening di librerie di peptidi mediante visualizzazione su fagi.

Piattaforma correlata

Alpha Lifetech è in grado di fornire ai clienti servizi di alta qualità per la costruzione e lo screening di librerie di peptidi tramite phage display.

Libreria di anticorpi a display fagico - Alpha Lifetech

Piattaforma per la costruzione di librerie di peptidi con visualizzazione di fagi

Alpha Lifetech dispone di diverse tecnologie per la costruzione di librerie di peptidi. Offriamo principalmente servizi di costruzione di librerie di peptidi T7 e M13, a seconda del tipo di fago.

PER SAPERNE DI PIÙ

Screening di fagi display - Alpha Lifetech Screening di fagi display - Alpha Lifetech

Piattaforma di screening di librerie di peptidi con visualizzazione fagica

Alpha Lifetech vanta una solida esperienza nello screening di librerie di fagi peptidici, fornendo un forte supporto tecnico per la scoperta di farmaci a piccole molecole, la diagnosi clinica, il trattamento delle malattie e la ricerca biologica.

PER SAPERNE DI PIÙ

Perché scegliere noi?

Alpha Lifetech è in grado di fornire ai clienti un servizio di alta qualità per la costruzione e lo screening di librerie di peptidi tramite phage display.