Sistema di visualizzazione dei fagi
Alpha Lifetech ha costruito un sistema di visualizzazione dei fagi stabile e perfetto che consente di risparmiare tempo per la ricerca scientifica o la ricerca di progetti e facilita la successiva produzione
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Sistema di visualizzazione dei fagi
Alpha Lifetech è impegnata da molti anni nella tecnologia Phage Display. Alpha Lifetech ha sviluppato una piattaforma tecnologica Phage Display stabile e perfetta che consente di risparmiare tempo nella ricerca scientifica o di progetto e di facilitare la successiva produzione. Offriamo ai clienti diversi sistemi Phage Display, tra cui sistemi per fagi M13, T7, T4 e λ. A seconda delle esigenze sperimentali, è possibile selezionare il sistema Phage Display più adatto. Alpha Lifetech può anche fornire ai clienti servizi come la produzione di anticorpi VHH, SCFV e Fab.
Introduzione al Phage display
La tecnologia "phage display" è una tecnica che utilizza i fagi (un virus che infetta i batteri) per cercare molecole di legame funzionali di proteine o peptidi specifici. Le tecniche di costruzione di librerie di anticorpi fagici includono la costruzione di librerie di anticorpi Fab, la costruzione di librerie di anticorpi scFv, la costruzione di librerie di anticorpi vhh, ecc. A seconda del tipo di batteriofago, questi possono essere suddivisi in batteriofago m13, batteriofago T7, batteriofago T4, batteriofago λ e altri batteriofagi. A seconda del tipo di libreria, questa può essere suddivisa in libreria di peptidi casuali, libreria di cDNA, libreria di anticorpi e libreria di proteine. La tecnologia "phage display" è semplice da utilizzare ed economica e comprende Fab phage display, scfv phage display e vhh phage display. Tuttavia, questa tecnica limita la diversità genetica molecolare nella libreria, che non può esprimere sequenze troppo lunghe.
La tecnologia Phage display è in grado di formare un collegamento fisico tra la molecola visualizzata e la sequenza di DNA che codifica la molecola visualizzata, e la sequenza di amminoacidi di un coniugato specifico può essere determinata istantaneamente tramite il sequenziamento del DNA del frammento desiderato nel genoma del fago.
Attualmente, la tecnologia phage display è ampiamente utilizzata. Tra questi, si annoverano risultati significativi nella ricerca e nello sviluppo di nuovi vaccini (vaccini sintetici a basso costo ed efficienti), nello sviluppo di farmaci anticorpali (screening di inibitori enzimatici), nella trasduzione del segnale cellulare (screening di epitopi simulati) e nella ricerca di epitopi antigenici (preparazione di anticorpi monoclonali).
Principio del fago display
Il "phage display" è una tecnologia molecolare basata sulla modifica genetica del DNA fagico, che lega il frammento bersaglio alla proteina di rivestimento del fago e lo esprime quindi sulla superficie fagica. La sequenza di DNA estranea viene introdotta in una posizione specifica nella sequenza nucleotidica del genoma fagico che codifica per una proteina di rivestimento fagica (Fig. 1).
Quando si verifica un'infezione da fago, il gene del fago inizia a essere espresso all'interno dell'ospite batterico e il frammento bersaglio inserito viene visualizzato sulla superficie del fago come una combinazione del gene correlato che codifica la proteina di rivestimento e della sequenza clonata.
Fig.1 Architettura del virione del batteriofago M13 e principio della tecnologia phage display.(Fonte di riferimento:Phage display e altre tecnologie di visualizzazione dei peptidi | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Sistemi di visualizzazione dei fagi
I fagi filamentosi sono il sistema di "phage display" più comunemente utilizzato, e sistemi di "phage display" possono essere realizzati utilizzando altri fagi. Tali sistemi possono visualizzare peptidi relativamente grandi o analizzare librerie di cDNA in modo più efficiente rispetto ai sistemi basati su fagi filamentosi.
Fig.2 Tipi di batteriofagi utilizzati nel phage display.(Fonte di riferimento:Phage display e altre tecnologie di visualizzazione dei peptidi | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Vantaggio del sistema Phage Display
I sistemi di "phage display" impiegano solitamente fagi filamentosi, tra cui M13, fd e f1. Rispetto ai fagi M13, i fagi batteriofagi T7 sono composti da DNA a doppio filamento, che presenta una maggiore stabilità ed è meno soggetto a mutazioni durante la replicazione. Il fago T7, in quanto carrier, cresce rapidamente e può formare placche entro 3 ore, il che consente un notevole risparmio di tempo per la clonazione e lo screening.
La costruzione di librerie fagiche T7 è stata utilizzata per l'espressione genica di superficie e non di superficie e per la costruzione di librerie di visualizzazione di peptidi, cDNA, DNA genomico e anticorpi. Ciò consente al fago T7 di essere utilizzato non solo come agente antimicrobico, ma anche per lo screening di bersagli farmacologici nello screening di organi bersaglio (come cervello, fegato e polmoni), nello screening di bersagli di riconoscimento di anticorpi, nella ricerca sui meccanismi fisiologici, ecc. Può anche essere utilizzato per la diagnosi e il trattamento di varie malattie.
Altre forme di batteriofagi
Fago selettivamente infettivo
Contrariamente al tradizionale phage display, il fago infettivo selettivo (SIP) collega le interazioni proteina-ligando di produzione direttamente all'infezione e all'espansione del fago, senza la necessità di fasi di eluizione.
Fig.3 Fago selettivamente infettivo (SIP).(Fonte di riferimento:Phage display e altre tecnologie di visualizzazione dei peptidi | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Fagi del paesaggio
I fagi paesaggistici sono causati da migliaia di copie di peptidi estranei disposti attorno ai capsidi tubulari in schemi ripetuti estremamente fitti, e la disposizione polivalente sui fagi paesaggistici stimola una selezione ad alta affinità, per cui è impossibile distinguere tra un'affinità alta e una bassa dei ligandi peptidici.
Fig. 4 L'idea dei fagi del paesaggio. (Fonte di riferimento:Phage display e altre tecnologie di visualizzazione dei peptidi | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Sistemi multipli di visualizzazione dei fagi
Sistema di visualizzazione dei fagi M13, T7, T4 e λ tra cui i clienti possono scegliere.
Capacità di screening ad alta produttività
Possiamo utilizzare sistemi di "phage display" per costruire rapidamente librerie di fagi su larga scala e realizzare esperimenti di screening ad alto rendimento.
Servizio di visualizzazione dei fagi personalizzato
I clienti possono personalizzare servizi completi in base ai requisiti del progetto, come lo screening di anticorpi ad alta affinità, ecc.
Ampia gamma di applicazioni
Applicato in campi quali l'ingegneria degli anticorpi, l'ingegneria dei peptidi e delle proteine, la scoperta e lo sviluppo di farmaci, la ricerca sulle interazioni proteiche, ecc.
Per qualsiasi domanda non esitate a contattarci in qualsiasi momento.
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16/07/2018 
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