Servizio di scoperta degli anticorpi scFv

Alpha Lifetech Inc.Siamo orgogliosi di offrire servizi completi per la costruzione di biblioteche SCFV, per soddisfare le diverse esigenze degli scienziati di tutto il mondo. Il nostro obiettivo è comprendere e soddisfare le esigenze dei diversi clienti e fornire assistenza per qualsiasi problema emergente e futuro nel campo della ricerca.

Che cosa è l'anticorpo scFv (Single Chain Variable Fragment Antibody)?

Un anticorpo a catena singola è costituito da un frammento anticorpale variabile leggero (VL) e pesante (VH) uniti da un linker peptidico flessibile, che può essere facilmente espresso in forma funzionale sulla superficie del fago ed è quindi comunemente noto come frammento variabile a catena singola (scFv). Il frammento scFv è la più piccola unità di una molecola di immunoglobulina (ad eccezione dei nanobodies) con funzione di legame con l'antigene e consente l'ingegneria proteica per migliorare le proprietà di scFv (frammento variabile a catena singola), come l'aumento dell'affinità e l'alterazione della specificità. In Alpha Lifetech Inc., gli anticorpi scFv sono stati prodotti principalmente da ibridomi, cellule spleniche di topi immunizzati e linfociti B di esseri umani. L'RNA totale o mRNA viene prima isolato da ibridomi, milza, cellule linfatiche e cellule del midollo osseo, quindi retrotrascritto in cDNA per fungere da stampo per l'amplificazione genica dell'anticorpo (PCR).

Sviluppo di anticorpi scFv - Tecnologia Phage Display

La diversità di una libreria è determinata dal numero di cloni indipendenti. Per produrre una libreria di anticorpi scFv di grandi dimensioni, i nostri scienziati utilizzeranno la nostra strategia proprietaria in due fasi per la generazione della libreria. Nella prima fase della procedura descritta, i repertori primari vengono preparati a partire da prodotti di PCR che codificano per i domini VH, Vκ e Vλ, ottenendo librerie di medie dimensioni (da 1 a 100 milioni di cloni). Nella seconda fase, i frammenti VH (o VL) vengono isolati mediante digestione del DNA plasmidico purificato dai repertori primari e clonati nel vettore fagemidico accettore contenente i repertori VL (o VH). Questa innovazione aumenta drasticamente le dimensioni delle librerie (1010-1012 cloni).

Screening su larga scala e ad alta produttività dell'anticorpo scFv

Per la preparazione su larga scala di scFv, è evidente che la scelta dell'ospite di espressione avrà un impatto significativo sulla progettazione del processo, sulle strategie di lavorazione a valle e sui costi di processo. La scelta del percorso produttivo dipenderà dall'importanza della modifica post-traduzionale e dai tempi di sviluppo clinico e dai costi economici, che dipendono essenzialmente dal "sistema ospite". Non esiste un sistema di espressione universale che garantisca elevati livelli di espressione del prodotto per un'ampia gamma di anticorpi o persino proteine ​​diverse.