Introduzione alle librerie di anticorpi sintetizzati

La libreria di anticorpi sintetizzata, nota anche come libreria de novo, è un metodo di sintesi che utilizza tecniche come la sintesi del DNA o il phage display per progettare e sintetizzare regioni variabili complete degli anticorpi, comprese le regioni framework e CDR, senza fare affidamento su librerie di anticorpi naive.

Le librerie di anticorpi semisintetiche vengono create combinando librerie di anticorpi naturali con diversità sintetica. Generalmente, il processo prevede la sintesi di oligonucleotidi di DNA per produrre una serie di diverse regioni determinanti la complementarietà (CDR), che vengono poi combinate con una struttura anticorpale costante derivata da fonti naturali come cellule B umane o animali. Le CDR sintetizzate introducono diversità nella libreria, consentendo di ottenere anticorpi in grado di colpire un'ampia gamma di epitopi. Le librerie di anticorpi semisintetiche rappresentano un compromesso tra la diversità naturale del sistema immunitario e la diversità controllata ottenuta tramite metodi di sintesi.

La distinzione tra librerie di anticorpi naive e sintetiche dipende dalla fonte dei geni delle immunoglobuline. La differenza tra una libreria di anticorpi semisintetizzata e una sintetizzata risiede invece nel fatto che la prima è composta da segmenti di anticorpi naive, come la catena leggera o la catena pesante, di cui solo uno è sintetizzato in vitro; mentre la libreria sintetizzata deriva interamente da una sintesi artificiale tramite PCR in vitro.

Alpha Lifetech può fornire

Alpha Lifetech Inc.Siamo in grado di offrire librerie di anticorpi semisintetizzati/sintetizzati da animali e umani, basate sulla nostra piattaforma professionale per la scoperta di anticorpi. Grazie ad anni di esperienza nella modificazione genetica e nella costruzione di librerie, possiamo realizzare librerie sintetiche capaci di produrre anticorpi sintetici con affinità e specificità superiori a quelle degli anticorpi naturali.Alpha LifetechGli esperti sono orgogliosi di annunciare che possiamo garantire un'elevata percentuale di successo nella costruzione di una libreria di anticorpi contenente da 10^8 a 10^10 cloni indipendenti.

Alpha Lifetech Inc.è orgogliosa di offrire servizi completi per la costruzione di librerie di anticorpi, in grado di soddisfare le diverse esigenze dei ricercatori di tutto il mondo, tra cui librerie di anticorpi scFv, Fab, VHH e librerie personalizzate. Il nostro obiettivo è comprendere e soddisfare le richieste dei diversi clienti e fornire assistenza per qualsiasi problema, presente o futuro, nel lavoro di ricerca.

Processo di servizio per la costruzione di librerie di anticorpi sintetizzati

Progetto
La fase di progettazione prevede la selezione di strutture anticorpali e regioni determinanti la complementarità (CDR) sulla base di sequenze anticorpali o dati strutturali preesistenti. Gli anticorpi CDR sintetici possono anche essere progettati per introdurre funzionalità specifiche o migliorare le proprietà di legame.

Sintesi
Il DNA sintetico che codifica le sequenze anticorpali progettate, comprese sia le regioni di struttura che le regioni CDR, viene sintetizzato utilizzando metodi chimici o enzimatici.

Assemblea
I frammenti di DNA sintetizzati vengono assemblati in vettori di espressione anticorpale utilizzando tecniche come la PCR, la ligazione o l'assemblaggio di Gibson. Questi vettori possono quindi essere introdotti in sistemi di espressione come cellule batteriche, di lievito o di mammifero per la produzione di anticorpi.

Screening e selezione
Le librerie di anticorpi create vengono sottoposte a screening e selezionate per individuare gli anticorpi con le proprietà desiderate utilizzando metodi di screening ad alto rendimento. Ciò può includere tecniche come il phage display, il yeast display o il ribosome display, a seconda del formato della libreria e dell'applicazione.

Servizio di costruzione di librerie di anticorpi sintetizzati

Alpha Lifetech Inc.L'azienda offre ai clienti un servizio completo di progettazione e sintesi di librerie di anticorpi, mediante la ligazione dei repertori di geni V delle catene pesanti e leggere in un vettore fagico utilizzando il sistema di ricombinazione sito-specifica Cre-lox, per creare un repertorio di frammenti Fab visualizzati su fagi, comprendente 6,5 × 10^10 cloni. La libreria ha prodotto anticorpi contro numerosi antigeni, alcuni con affinità nanomolari. La generazione della libreria di anticorpi umani si basa sulla tecnologia di visualizzazione su fagi M13 (illustrata nella figura sottostante).