Servizio di costruzione di biblioteche espositive di lievito

Alpha Lifetech è specializzata nella costruzione di librerie di lievito e nello screening di librerie di anticorpi, offrendo la possibilità di generare diverse forme di librerie di lievito e di sottoporle a screening per anticorpi specifici e ad alta affinità per clienti in tutto il mondo. Grazie a un team di ricercatori esperti, tecnologie e attrezzature all'avanguardia, siamo in grado di costruire librerie di lievito mirate a un'ampia gamma di proteine correlate a patologie.

Sfondo del sistema di visualizzazione del lievito

Il sistema di visualizzazione in lievito è una tecnologia di espressione proteica eucariotica che sfrutta il meccanismo di traslocazione proteica intracellulare (ancora GPI) del sistema di visualizzazione in superficie del lievito per immobilizzare ed esporre anticorpi esogeni o geni proteici sulla superficie del lievito. Il sistema di visualizzazione in superficie del lievito presenta un meccanismo completo di modificazione post-traduzionale e secrezione proteica, più adatto al ripiegamento, alla modifica e al trasporto di proteine umanizzate. Pertanto, gli anticorpi prodotti dal sistema di visualizzazione in lievito sono più simili agli anticorpi nativi umani sia in termini di conformazione che di funzione e offrono un potenziale promettente per applicazioni terapeutiche.

Il sistema di "lievito display" consente la produzione di anticorpi specifici per proteine, peptidi, piccole molecole e recettori delle cellule T. Questi anticorpi presentano i vantaggi di versatilità, quantificazione ed efficacia terapeutica. L'applicazione della tecnologia di "lievito display" è ancora più ampia, e può essere utilizzata non solo per la scoperta di anticorpi specifici per "lievito display", ma anche per lo screening di librerie proteiche, l'evoluzione proteica diretta, la costruzione di librerie antigeniche, l'ordinamento di anticorpi ad alta affinità, la maturazione dell'affinità degli anticorpi, la produzione di vaccini, l'immunobiocatalisi e i biosensori, ecc., con ampie prospettive nei campi della diagnosi, del trattamento delle malattie e della ricerca medica. Inoltre, le proteine preparate mediante "lievito display" antigenico sono più vicine alla loro conformazione naturale, il che le rende ideali per test sierologici come l'ELISA. esposizione di lievito - Alpha Lifetech

Fig 1: Principio di visualizzazione del lievito

Processo di costruzione della libreria di visualizzazione del lievito

Le nostre librerie di lievito hanno un'ampia capacità e un'elevata diversità, che forniscono una solida base per lo screening efficace di sequenze anticorpali specifiche. Possiamo costruire diverse forme di librerie di anticorpi di lievito (IgG, scFv, VHH, librerie di anticorpi Fab), librerie proteiche, librerie peptidiche, librerie di cDNA, ecc. in base alle vostre esigenze. Inoltre, possiamo anche sviluppare librerie di anticorpi con diverse proprietà, tra cui librerie immunitarie, librerie naturali, librerie sintetiche, librerie semisintetiche e librerie di anticorpi per malattie. pYD è il nostro vettore di visualizzazione della superficie del lievito più comunemente utilizzato.

Siamo in grado di costruire librerie di lievito con una capacità fino a 10^9, con un tasso di inserimento e una diversità del 100%. Prima di consegnare la libreria di lievito, convalidiamo rigorosamente per garantire la diversità, l'integrità e la funzionalità dei geni anticorpali. Per garantire che gli anticorpi selezionati abbiano un'affinità e una specificità molto elevate, utilizziamo una valutazione quantitativa in tempo reale della libreria di anticorpi. Il sorting cellulare attivato da fluorescenza (FACS) esegue uno screening quantitativo per rilevare i cambiamenti nell'espressione e nell'attività degli anticorpi, utilizzando marcatori distinti sia sull'anticorpo che sull'antigene per determinare la forza di legame e l'espressione anticorpale sulla superficie delle cellule di lievito. Utilizziamo saggi di legame FACS per lo screening quantitativo di anticorpi con elevata affinità di legame e selettività. L'efficienza di visualizzazione della nostra libreria di nanobody di lievito tramite FACS è superiore al 95%. In genere, lo screening del lievito prevede 3-5 cicli di screening e arricchimento, consentendoci di ottenere anticorpi ad alta affinità anticorpale in tempi brevi.

Il sistema di visualizzazione del lievito è diventato uno strumento potente nell'evoluzione proteica diretta. Alpha Lifetech offre servizi di espressione proteica, purificazione e analisi cinetica di espressione per la preparazione di anticorpi specifici in vitro. Siamo in grado di preparare proteine su larga scala e migliorare efficacemente la purezza delle proteine ricombinanti. Forniamo un servizio completo, dalla sintesi genica all'espressione e alla purificazione delle proteine ricombinanti. Utilizzando il nostro avanzato sistema di visualizzazione del lievito, abbiamo preparato con successo anticorpi con la più elevata affinità picomolare (pM), che rappresenta un'importante svolta nella tecnologia di preparazione di anticorpi ricombinanti in vitro.