מבוא לספריות נוגדנים מסונתזים

ספריית נוגדנים מסונתזים, הידועה גם בשם ספריית De novo, היא שיטה סינתטית המשתמשת בטכניקות כגון סינתזת DNA או הצגת פאג כדי לעצב ולסנתז אזורים משתנים של נוגדנים, כולל אזורי מסגרת ו-CDR, מבלי להסתמך על ספריות נוגדנים נאיביות.

ספריית נוגדנים חצי סינתטית נוצרת על ידי שילוב ספריות נוגדנים המופיעות באופן טבעי עם מגוון סינתטי. זה בדרך כלל כולל סינתזה של אוליגונוקלאוטידים של DNA כדי לייצר קבוצה של אזורי קביעה משלימים שונים (CDRs), אשר משולבים לאחר מכן עם מסגרת נוגדנים קבועה שמקורה במקורות טבעיים כגון תאי B אנושיים או בעלי חיים. ה-CDR המסונתז מכניס גיוון לספרייה, וכתוצאה מכך נוגדנים המכוונים למגוון רחב של אפיטופים. ספריית הנוגדנים הסינטטית למחצה מספקת פשרה בין המגוון הטבעי של מערכת החיסון לבין המגוון המבוקר המושג בשיטות סינתטיות.

ההבחנה בין ספריות נוגדנים נאיביות לסינטטיות תלויה במקור הגנים של אימונוגלובולינים. בינתיים, ההבדל בין ספריית נוגדנים מסונתזת למחצה וספריית נוגדנים מסונתזת נעוץ בכך שהראשונה מורכבת מחלק ממקטעי נוגדנים נאיביים, כגון שרשרת קלה או שרשרת כבדה, ורק אחד מהם מסונתז במבחנה; בעוד שהמסונתז נגזר לחלוטין מסינתזה מלאכותית על ידי PCR במבחנה.

Alpha Lifetech יכולה לספק

Alpha Lifetech Inc.יכול להציע ספריית נוגדנים מסונתזים למחצה/מסונתזים מבעלי חיים ובני אדם בהתבסס על פלטפורמת גילוי הנוגדנים המקצועית שלנו. עם שנים של ניסיון בשינוי גנטי ובניית ספריות, ניתן לבנות ספריות מסונתזות המסוגלות לייצר נוגדנים סינתטיים בעלי זיקה וסגוליות מעבר ליכולת של נוגדנים טבעיים.של אלפא לייףטקמומחים גאים להכריז שאנו יכולים להבטיח שיעור הצלחה גבוה בבניית ספריית נוגדנים המכילה 10^8 - 10^10 שיבוטים עצמאיים.

Alpha Lifetech Inc.גאה להציע שירותי בניית ספריית נוגדנים מקיפים כדי לענות על הצרכים המגוונים של חוקרים גלובליים, כולל scFv, Fab, נוגדנים VHH וספריות מותאמות אישית. המטרה שלנו היא להבין ולעמוד בדרישות של לקוחות שונים ולסייע בכל בעיה צפויה ומתעוררת בעבודת מחקר.

תהליך שירות בניית ספריות נוגדנים מסונתזים

לְעַצֵב
שלב התכנון כולל בחירת מסגרות נוגדנים ואזורים הקובעים משלימות (CDRs) בהתבסס על רצפי נוגדנים קיימים או נתונים מבניים. נוגדני CDR סינתטיים יכולים להיות מתוכננים גם כדי להציג פונקציות ספציפיות או לשפר את תכונות הקישור.

סִינתֶזָה
DNA סינתטי המקודד לרצפי הנוגדנים המעוצבים, כולל אזורי מסגרת ו-CDR, מסונתז באמצעות שיטות כימיות או אנזימטיות.

הַרכָּבָה
שברי ה-DNA המסונתז מורכבים לוקטורי ביטוי נוגדנים באמצעות טכניקות כגון PCR, קשירה או הרכבה של גיבסון. לאחר מכן ניתן להחדיר וקטורים אלה למערכות ביטוי כגון תאי חיידקים, שמרים או יונקים לייצור נוגדנים.

הקרנה ומיון
ספריות הנוגדנים שנבנו נבדקות ונבחרות לנוגדנים בעלי תכונות רצויות באמצעות שיטות סקר בתפוקה גבוהה. זה עשוי להיות כרוך בטכניקות כגון תצוגת פאגים, תצוגת שמרים או תצוגת ריבוזומים, בהתאם לפורמט הספרייה וליישום.

שירות בניית ספריות נוגדנים מסונתזים

Alpha Lifetech Inc.מספק ללקוחות עיצוב נקודתי ושירות מסונתז של ספריות נוגדנים על ידי קשירת רפרטואר גן ה-V של השרשרת הכבדה והקלה לתוך וקטור פאג' באמצעות מערכת הרקומבינציה הספציפית לאתר Cre-lox ליצירת רפרטואר של Fabs המוצג על פאג' הכולל 6.5 × 10^10 שיבוטים. הספרייה הניבה Abs נגד אנטיגנים רבים, חלקם בעלי זיקה ננומולרית. היצירה של ספריית הנוגדנים האנושית מבוססת על טכנולוגיית תצוגת פאג M13 (מוצג באיור למטה).