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アプタマースクリーニングプラットフォーム

Alpha Lifetechは、包括的な核酸アプタマースクリーニングシステムを構築しており、顧客に高品質な核酸アプタマー(RNAアプタマーおよびDNAアプタマーを含む)スクリーニングサービスを提供することができます。

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アプタマースクリーニングプラットフォーム

アプタマースクリーニング技術

アプタマーは、三次元構造に折り畳むことができる一本鎖DNAまたはRNA配列です。各配列は、5'および3'固定プライマー領域に挟まれた20~60ヌクレオチドのランダム化領域を持ち、ランダム配列ブロックには1015種類のユニークな配列が含まれています。アプタマーは、抗体と同様に、標的分子に対して高い親和性と特異性で結合することができます。現在、治療、疾患診断、バイオセンサーなど、多くの分野で幅広い応用可能性を示しています。
Alpha Lifetechは、in vitroリガンド選択のための指数関数的濃縮リガンドシステム進化(SELEX)技術に基づいたリガンドスクリーニング技術において豊富な経験を有しています。長年の開発を経て、Alpha Lifetechは包括的な核酸アプタマースクリーニングシステムを確立し、お客様に高品質な核酸アプタマー(RNAアプタマーおよびDNAアプタマーを含む)スクリーニングサービスを提供できるようになりました。タンパク質、ペプチド、アミノ酸、低分子化合物などの複数のスクリーニング対象に加え、磁気ビーズSELEX、細胞SELEX、キャプチャーSELEXなど、様々なアプタマースクリーニング方法が利用可能です。最も一般的に使用されているスクリーニング方法は磁気ビーズスクリーニングです。

アプタマーセレックススクリーニングの技術プロセス

アプタマースクリーニングのためのSELEX法は、DNAまたはRNAからなるオリゴヌクレオチドライブラリーの構築から始まります。オリゴヌクレオチドライブラリーを標的分子とインキュベートし、未結合のオリゴヌクレオチドを洗い流し、結合したアプタマーを溶出し、結合したアプタマーをPCRで増幅して次のスクリーニングラウンド用の二次ライブラリーを生成するという選択と増幅の反復サイクルが行われます。結合、分離、回収、再増幅のステップが繰り返されます。このプロセスによって濃縮された特定の配列が、ライブラリー内で優勢なアプタマーとして出現します。

SELEXスクリーニング - アルファライフテック
図1 SELEXスクリーニングの技術プロセス

核酸アプタマーの利点

利点 詳細
直接 従来の動物実験という手法を避け、試験管内ライブラリーから直接選択する。非免疫原性、低免疫原性、あるいは毒性のある標的分子のアプタマーをセレックススクリーニングによって探索する。
幅広い用途 標的分子としては、有機色素、アミノ酸、タンパク質、抗生物質、ペプチド、ビタミン、医薬品、さらには細胞、病原体、ウイルス、組織などが挙げられる。
強い親和性 アプタマーは、標的分子のin vitroスクリーニングにおいて高い特異性と親和性を示す。
安定性 アプタマーはサイズが小さく、入手が容易で、合成の再現性が高く、化学合成や修飾によって安定性を向上させることができます。アプタマーは化学的に安定しており、長期保存が可能で、室温で輸送できます。

アプタマーの応用

198-ケース-1

ライフアナリシス

アプタマーをプローブまたはバイオセンサー素子として使用し、生体分子の認識、細胞イメージング、その他の生命分析研究を行う。
198-ケース-3

疾患診断

アプタマーと標的分子の特異的な結合に基づいた、高感度な疾患診断法を開発する。
198-ケース-6

医学研究

開発

選択されたアプタマーを医薬品分子または医薬品キャリアとして利用し、新たな標的医薬品を開発する。

場合 小分子アプタマースクリーニング

最初の溶出ラウンドからの産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第2ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

2回目の溶出から得られた産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第3ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

アダプター配列のアライメント

高親和性配列

ライブラリー濃縮製品、ePCR回収製品

3%核酸ゲル

第1ラウンド溶出産物 ePCR回収産物

3%核酸ゲル

最初の溶出ラウンドからの産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第2ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

2回目の溶出から得られた産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

最初の溶出ラウンドからの産物のePCRによる反復回収

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第2ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

2回目の溶出から得られた産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第3ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

アダプター配列のアライメント

高親和性配列

ライブラリー濃縮製品、ePCR回収製品

3%核酸ゲル

第1ラウンド溶出産物 ePCR回収産物

3%核酸ゲル

最初の溶出ラウンドからの産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第2ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

2回目の溶出から得られた産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第3ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

アダプター配列のアライメント

高親和性配列

ライブラリー濃縮製品、ePCR回収製品

3%核酸ゲル

第1ラウンド溶出産物 ePCR回収産物

3%核酸ゲル

最初の溶出ラウンドからの産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第2ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

2回目の溶出から得られた産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

最初の溶出ラウンドからの産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第2ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

2回目の溶出から得られた産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第3ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

アダプター配列のアライメント

高親和性配列

ライブラリー濃縮製品、ePCR回収製品

3%核酸ゲル

第1ラウンド溶出産物 ePCR回収産物

3%核酸ゲル

最初の溶出ラウンドからの産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

第2ラウンド溶出産物ePCR回収産物

3%核酸ゲル

2回目の溶出から得られた産物のePCRによる反復回収

3%核酸ゲル

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