モノクローナル抗体開発サービス

アルファライフテック株式会社エピトープ予測、ペプチド合成、タンパク質発現、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体の産生、ならびに細胞培養、腹水、または全血清からの抗体精製を提供できます。

アルファライフテック株式会社当社は、ハイブリドーマ細胞、ゲノム編集細胞株、ノックダウン細胞株、過剰発現細胞株など、様々な安定細胞株サービスをお客様に提供してきた実績があります。すべてのお客様に高度なカスタム細胞株サービスを提供できるよう努めており、当社のサービスは実績と信頼を得ています。

抗体開発戦略

1.抗原の設計と調製
これらの抗原は、タンパク質、ペプチド、またはその他の分子である可能性があります。免疫原の設計には、抗原構造、免疫学、および送達システムに関する知識を統合した包括的なアプローチが必要です。Alpha Lifetechは、お客様のニーズに合わせて免疫原を設計できる抗原設計技術を有しています。
Alpha Lifetechは、お客様が選択できる組換えタンパク質製品を提供しています。当社は、大腸菌発現系、酵母発現系、バキュロウイルス・昆虫細胞発現系、哺乳類細胞発現系など、研究に必要な組換えタンパク質を生産するための様々なタンパク質発現系を取り揃えています。

2. 動物の予防接種
Alpha Lifetechは、お客様に免疫原を提供することができ、マウス、ウサギ、ヒツジ、アルパカ、モルモット、ハムスターなどの免疫動物もご用意しております。

3. モノクローナル抗体の生産方法

●ハイブリドーマ技術によるモノクローナル抗体の生産
ハイブリドーマは、マウス骨髄腫細胞株と形質細胞（Bリンパ球）という2種類の細胞を融合させて作製されるハイブリッド細胞であり、ヘテロ接合細胞は試験管内で目的の抗原に対する抗体を継続的に産生することができます。ハイブリドーマ細胞株の作製は、抗原設計（ハプテン、低分子化合物、ペプチド）、動物免疫、細胞融合、陽性クローン選別という3つの段階から構成されます。当社独自の免疫方法を用いることで、非常に高い細胞融合効率（B細胞1,000個あたり1～10個のハイブリドーマ）と高い抗体価を実現し、生化学的スクリーニング、試験管内細胞アッセイ、動物実験などのその後の分析試験における成功率を最大限に高めています。

●ファージディスプレイ技術によるモノクローナル抗体の生産
ファージディスプレイは、モノクローナル抗体を生成する別の方法を提供する。動物の血液からBリンパ球を分離し、そのmRNAを抽出する。PCRにより、このmRNAはcDNAに変換され、すべてのVHおよびVLセグメントが増幅される。これらのセグメントは、通常、バクテリオファージのPIIIタンパク質とともに、単鎖可変断片（scFv）としてベクターにクローニングされる。続いて、この構築物を使用して大腸菌に感染させ、ヘルパーファージを接種することにより、約10^10個の細胞を含むライブラリーを作成する。大腸菌は、VHおよびVLセグメントを内包するバクテリオファージを外被の一部として分泌することができる。その後、目的の抗原を標的とする特定のVHおよびVLセグメントを選択し、バクテリオファージを用いて大腸菌に再接種する。プラスミドを含む細胞を分離し、配列を決定する。

4.融合スクリーニング

●細胞融合と選択
採取したB細胞は、培養下で無限に増殖する癌細胞である骨髄腫細胞と融合される。この融合は通常、ポリエチレングリコール（PEG）融合などの技術を用いて行われる。
融合後、ハイブリドーマ細胞は、ハイブリドーマのみが生存できる選択培地で培養される。この培地には通常、融合していない骨髄腫細胞の増殖を阻害するアミノプテリンが含まれている。

●スクリーニングとクロンギング
得られたハイブリドーマ細胞は、標的抗原に特異的な抗体を産生するかどうかについてスクリーニングされる。これは通常、酵素結合免疫吸着法（ELISA）、ウェスタンブロット法、免疫沈降法、フローサイトメトリーなどの手法を用いて行われる。

抗体を産生するハイブリドーマ細胞が特定されると、それらをクローン化して同一の細胞集団を生成する。これにより、各ハイブリドーマ細胞によって産生される抗体が同一であることが保証される。

5.抗体機能検証
Alpha Lifetech社は、モノクローナル抗体の特性を明らかにし、抗体の特異性、親和性、機能性を確認するために、ウェスタンブロッティング、免疫組織化学、機能アッセイなどの抗体機能検証サービスを提供しています。

6.抗体の最適化
プロテインAやプロテインGアフィニティークロマトグラフィーなどの技術を用いて培養上清から抗体を精製する方法、およびAlpha Lifetech社は抗体の親和性を向上させるための抗体修飾法も提供できる。

7. 抗体産生
Alpha Lifetech社は、ハイスループットスクリーニング用途および大規模生産向けに、候補抗体を評価することができます。