ファージディスプレイペプチドライブラリー構築プラットフォーム

Alpha Lifetechは、様々なペプチドライブラリ構築技術を有しています。主にファージの種類に応じたT7ペプチドライブラリ構築サービスとM13ペプチドライブラリ構築サービスを提供しています。また、ペプチド分子の配列サイズなどに応じて、直鎖ループ7ペプチドライブラリ構築サービスや12ペプチドライブラリ構築サービスも提供しています。さらに、カスタマイズしたペプチドライブラリ構築サービスも提供しています。さらに、カスタマイズしたペプチド合成・構築サービスも提供しています。

ファージディスプレイ技術は、ファージ内の機能性外因性ペプチドをカプシド表面にパンニングする技術であり、外因性タンパク質またはペプチドの構造的および機能的活性を維持しながら、組換えファージの宿主細胞への感染能力に影響を与えません。各ファージウイルス粒子は、その表面に1つの外因性ランダムペプチドのみを表示することができ、異なるペプチドを表示するすべてのファージの集合がファージディスプレイペプチドライブラリを構成します。ファージディスプレイペプチドライブラリは、複数のカスタム合成ペプチドの発現と特異的ペプチドスクリーニングのための強力なツールであり、抗原エピトープ解析、薬物スクリーニング、ワクチン開発の分野で広く利用されています。

ペプチドライブラリ構築の紹介

ペプチドライブラリ構築とは、異なる形式のペプチドDNA配列を対応するファージ殻タンパク質配列に連結し、ファージ再構成を利用して標的ペプチドをファージ表面にパンニングすることにより、ペプチドライブラリを増幅することです。ファージディスプレイ技術に基づくペプチドライブラリ構築は、ペプチド合成の生合成カテゴリーに属し、市場には液相ペプチド合成法と固相ペプチド合成法があります。現在、Alpha Lifetechは、7ペプチドライブラリ構築、12ペプチドライブラリ構築、15ペプチドライブラリ構築、環状7ペプチドライブラリ構築、環状12ペプチドライブラリ構築など、ペプチド分子の配列サイズに応じて、既製のペプチドライブラリとランダム化ペプチドライブラリを提供できるさまざまなペプチドライブラリ構築技術を保有しています。また、さまざまなタイプとアプリケーションのペプチドライブラリを合成するようにカスタマイズすることもできます。

ペプチドライブラリ構築とスクリーニングの応用

ファージディスプレイ技術によるランダム化ペプチドライブラリは、ペプチドへの機能的アクセスを可能にし、表現型（ディスプレイされたペプチド）と遺伝子型（コードされたDNA）を物理的に結び付けます。これらのライブラリは、アフィニティー精製によって結合クローンと非結合クローンを分離するスクリーニングプロセスに適しています。ファージディスプレイペプチドライブラリは、(i)免疫細胞エピトープの特性評価、(ii)受容体またはタンパク質結合生理活性ペプチド、非タンパク質標的に結合したペプチド、細胞または臓器特異的ペプチドなどのスクリーニング、(iii)ペプチドを介した薬物送達システムの開発に利用できます。

ファージディスプレイペプチドライブラリプロセス

図1 ファージディスプレイペプチドライブラリー構築プラットフォーム

ファージディスプレイペプチドライブラリ構築ワークフロー

プロセス	サービス内容	タイムライン
1. ヌクレオチド配列合成	顧客が指定した長さのヌクレオチド配列のランダム合成	2～3週間
2. 重合と消化	合成されたDNA配列の重合と消化	1日
3. 電気変換ライブラリの構築	ER2738宿主細菌を構築し、大腸菌を組み換えプラスミドで形質転換した。	1週間
4. ペプチドライブラリのサイズと多様性の検出	コロニーカウントによるペプチドライブラリのサイズとシーケンシングによるペプチドライブラリの多様性の検出	2～3日
5. ファージディスプレイペプチドライブラリの構築	ファージパッケージングペプチドライブラリに感染することで	1週間