ファージディスプレイペプチドライブラリープラットフォーム
Alpha Lifetech は、ファージディスプレイ技術に基づいて、線形 7 ペプチドライブラリ、線形 9 ペプチドライブラリ、線形 10 ペプチドライブラリ、線形 15 ペプチドライブラリ、線形 12 ペプチドライブラリ、環状 7 ペプチドライブラリ、およびその他のペプチドライブラリを含む、高品質のファージディスプレイペプチドライブラリ構築およびスクリーニング サービスを顧客に提供できます。ライブラリの多様性、挿入率、陽性率は 90% 以上に達し、さまざまな顧客のファージディスプレイペプチドライブラリに対するさまざまなニーズに対応します。
ファージディスプレイライブラリは、生物医学研究および応用において広く利用されています。例えば、抗体工学および抗体開発においては、ファージディスプレイライブラリを用いて抗体変異体のスクリーニングと改良を行うことができます。また、薬物スクリーニングおよび薬物標的の探索においては、ファージディスプレイライブラリを用いて薬物候補タンパク質やペプチドを探索することができます。ワクチン研究においては、ファージディスプレイライブラリを用いてワクチン抗原の選択および開発を行うことができます。さらに、ファージディスプレイライブラリは、タンパク質相互作用研究、癌の診断および治療など、多くの分野で利用されています。
ファージディスプレイ技術
ファージディスプレイ技術は、標的タンパク質遺伝子をファージ表面タンパク質遺伝子と融合させ、遺伝子発現によって標的タンパク質を融合タンパク質の形でファージ表面に提示させる技術です。ファージ表面に提示されたこれらのタンパク質は、相対的な空間構造と生物学的活性を維持し、特異的な抗体または他の分子との相互作用によってスクリーニング、検出、認識することができます。ファージディスプレイ技術の提示対象には、抗体、抗体断片、ペプチド断片、cDNAなどがあります。
ファージディスプレイ技術のシステムには、主にM13ファージディスプレイシステム(PⅢディスプレイシステム、PⅧディスプレイシステムなど)、λファージディスプレイシステム、T4ファージディスプレイシステム、T7ファージディスプレイシステムなどがあり、それぞれ独自の特徴を持ち、さまざまな研究ニーズに適しています。M13ファージは溶原性があるため、感染後も宿主細胞を溶解せず、宿主細胞内で継続的に複製・発現することができ、長期スクリーニングや安定した発現に適しています。T7ファージはライフサイクルが短く複製効率が高いため、大量の子孫ファージを迅速に生成することができ、ハイスループットスクリーニングや迅速な発現に適しています。
| M13ファージ | T7ファージ | |
|---|---|---|
| 1. 形態学的構造 | 糸状ファージ | 多面体ファージ |
| 2. 遺伝物質 | 環状の一本鎖DNA分子 | 線状、二本鎖、末端に余分なDNA |
| 3. 複製と感染 | 溶原性ファージはペリプラズム内で組み立てられ、宿主細胞を溶解することなく細菌膜から分泌されます。 | 細菌の細胞質内で組み立てられたファージの子孫である毒性ファージは、細胞膜の溶解によって放出されます。 |
| 4. 表示システム | 異なるサイズの外来ペプチド/タンパク質を表示するのに適した、pIII および PVIII カプシド タンパク質を使用した表示システムが構築されました。 | このディスプレイシステムは、分泌プロセスを必要とせず、分泌プロセスに阻害効果を持つペプチド/タンパク質を表示するのに適した 10B カプシドタンパク質で構築されています。 |
| 5. アプリケーションの利点 | 小分子ペプチドの表示および長期スクリーニングに適しています。 | 高分子タンパク質の迅速な発現とハイスループットスクリーニングに利点があります。 |
ファージディスプレイペプチドライブラリの種類
Alpha Lifetechは、ファージディスプレイペプチドライブラリの構築とスクリーニングにおいて豊富な経験を有し、多様なペプチドライブラリタイプからお選びいただけます。ペプチドの長さに応じて、7ペプチドライブラリ、9ペプチドライブラリ、10ペプチドライブラリ、12ペプチドライブラリ、15ペプチドライブラリに分類できます。ポリペプチドの空間的構造に応じて、直鎖状ファージペプチドライブラリと環状ファージペプチドライブラリに分類できます。
線状ファージペプチドライブラリ
ペプチド遺伝子は、ファージゲノムのコートタンパク質コード領域(通常はpIIIまたはPVIII)に挿入され、直鎖状に表示されます。直鎖状のペプチドは生体内で容易に分解され、結合能と安定性が影響を受ける可能性があります。
環状ファージペプチドライブラリ
修飾された環状ペプチドは、ジスルフィド結合またはその他の結合の作用により固定された立体配座を形成し、代謝安定性および生物学的利用能が大幅に向上するだけでなく、受容体-リガンド(抗体-抗原)立体配座の結合要件をより適切に満たします。
ファージディスプレイペプチドライブラリプロセス
ファージの選択
キャリアとしては通常、M13 型ファージまたは T7 型ファージが選択されます。
ファージディスプレイペプチドライブラリの構築
外来タンパク質またはポリペプチドのコード配列を含むファージベクターを構築する。このベクターには通常、プロモーター、選択マーカー、および適切な制御エレメントが含まれる。外来タンパク質またはペプチドのコード配列をファージキャリアに挿入すること。これは通常、制限酵素による切断とライゲーション法によって行われる。構築されたファージベクターを宿主細胞に形質転換すると、ファージは細胞内で複製し、外来タンパク質またはペプチドを発現する。複数の異なる外来タンパク質またはペプチドを含むファージライブラリは、広範な形質転換と増幅によって作成される。
ファージディスプレイペプチドライブラリスクリーニング
標的分子(タンパク質、受容体、抗体など)を固相担体に固定します。構築したファージディスプレイペプチドライブラリを固定標的分子とインキュベートし、ファージ上のペプチドを標的分子に結合させます。この過程で、標的分子に結合していないバクテリオファージは洗浄により除去されますが、標的分子に結合するバクテリオファージは保持され、高親和性で結合したバクテリオファージが溶出されます。回収されたバクテリオファージは大腸菌に感染させて増幅され、次のスクリーニングにかけられます。高い結合効率を持つペプチドを得るには通常3~5回のスクリーニングが必要です。
ペプチドの設計と合成
スクリーニング部位に基づいてペプチドを合成します。

図1 ファージディスプレイペプチドライブラリーの構築とスクリーニングプロセス
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2018年7月16日 

