ファージディスプレイペプチドライブラリープラットフォーム

Alpha Lifetechは、ファージディスプレイ技術に基づき、高品質なファージディスプレイペプチドライブラリーの構築およびスクリーニングサービスをお客様に提供できます。

ファージディスプレイペプチドライブラリープラットフォーム

Alpha Lifetechは、ファージディスプレイ技術に基づき、線状7ペプチドライブラリー、線状9ペプチドライブラリー、線状10ペプチドライブラリー、線状15ペプチドライブラリー、線状12ペプチドライブラリー、環状7ペプチドライブラリー、その他のペプチドライブラリーを含む、高品質のファージディスプレイペプチドライブラリーの構築およびスクリーニングサービスをお客様に提供できます。ライブラリーの多様性、挿入率、陽性率は90%以上に達し、ファージディスプレイペプチドライブラリーに関する様々なお客様のニーズを満たします。

ファージディスプレイライブラリーは、生物医学研究および応用分野で広く利用されています。例えば、抗体工学や抗体開発においては、ファージディスプレイライブラリーを用いて抗体変異体のスクリーニングや改良を行うことができます。また、薬剤スクリーニングや薬剤標的探索においては、ファージディスプレイライブラリーを用いて薬剤候補となるタンパク質やペプチドを探索することができます。ワクチン研究においては、ファージディスプレイライブラリーを用いてワクチン抗原の選択やワクチン開発を行うことができます。さらに、ファージディスプレイライブラリーは、タンパク質間相互作用研究、がんの診断と治療など、多くの分野で活用されています。

ファージディスプレイ技術

ファージディスプレイ技術は、標的タンパク質遺伝子とファージ表面タンパク質遺伝子を融合させ、遺伝子発現によって融合タンパク質の形で標的タンパク質をファージ表面に発現させる技術です。ファージ表面に発現したこれらのタンパク質は、相対的な立体構造と生物活性を維持することができ、特定の抗体や他の分子との相互作用によってスクリーニング、検出、認識することが可能です。ファージディスプレイ技術の発現対象には、抗体、抗体断片、ペプチド断片、cDNAなどが含まれます。

ファージディスプレイ技術のシステムには、主にM13ファージディスプレイシステム（PⅢディスプレイシステム、PⅧディスプレイシステムなど）、λファージディスプレイシステム、T4ファージディスプレイシステム、T7ファージディスプレイシステムなどがあります。これらのシステムはそれぞれ独自の特性を持ち、さまざまな研究ニーズに適しています。M13ファージは溶原性であるため、感染後も宿主細胞を溶解せず、宿主細胞内で外来断片を継続的に複製・発現できるため、長期スクリーニングや安定発現に適しています。T7ファージはライフサイクルが短く複製効率が高いため、多数の子孫ファージを迅速に生成でき、ハイスループットスクリーニングや迅速な発現に適しています。

	M13ファージ	T7ファージ
1.形態構造	糸状ファージ	多面体ファージ
2. 遺伝物質	環状一本鎖DNA分子	線状二本鎖末端余剰DNA
3. 複製と感染	ペリプラズム内で組み立てられた溶原性ファージは、宿主細胞を溶解することなく細菌膜から分泌されることがある。	細菌の細胞質内で組み立てられたファージの子孫である毒性ファージは、細胞膜の溶解によって放出される。
4. ディスプレイシステム	pIIIおよびPVIIIカプシドタンパク質を用いて、様々なサイズの外来ペプチド／タンパク質を表示するのに適した表示システムを構築した。	この表示システムは10Bカプシドタンパク質で構成されており、分泌プロセスを必要とせず、分泌プロセスを阻害する効果を持つペプチド／タンパク質の表示に適している。
5. アプリケーションの利点	小分子ペプチドの展示および長期スクリーニングに適している。	高分子タンパク質の迅速な発現とハイスループットスクリーニングにおいて利点がある。

ファージディスプレイペプチドライブラリーの種類

Alpha Lifetechは、ファージディスプレイペプチドライブラリーの構築とスクリーニングにおいて豊富な経験を有しており、様々な種類のペプチドライブラリーから選択できます。ペプチドの長さに応じて、7ペプチドライブラリー、9ペプチドライブラリー、10ペプチドライブラリー、12ペプチドライブラリー、15ペプチドライブラリーに分類できます。また、ポリペプチドの立体構造に応じて、線状ファージペプチドライブラリーと環状ファージペプチドライブラリーに分類できます。

線状ファージペプチドライブラリー

ペプチド遺伝子は、ファージゲノムのコートタンパク質コード領域（通常はpIIIまたはPVIII）に挿入され、直線状のペプチド鎖として提示される。直線状のペプチド鎖は生体内では分解されやすく、結合能や安定性に影響が出る可能性がある。

環状ファージペプチドライブラリー

修飾された環状ペプチドは、ジスルフィド結合またはその他の結合結合の作用により固定された立体構造を形成し、代謝安定性と生物学的利用能を大幅に向上させるだけでなく、受容体-リガンド（抗体-抗原）立体構造の結合要件をより良く満たします。

ファージディスプレイペプチドライブラリープロセス

ファージの選択

キャリアーとしては、通常、M13型ファージまたはT7型ファージが選択される。

ファージディスプレイペプチドライブラリーの構築

外来タンパク質またはポリペプチドのコード配列を組み込むことができるファージベクターを構築します。このベクターには通常、プロモーター、選択マーカー、および適切な調節エレメントが含まれます。外来タンパク質またはペプチドのコード配列は、通常、制限酵素による切断と連結法によってファージキャリアに挿入されます。構築されたファージベクターは宿主細胞に導入され、ファージが細胞内で複製して外来タンパク質またはペプチドを発現できるようになります。複数の異なる外来タンパク質またはペプチドを含むファージライブラリーは、広範な形質転換と増幅によって作製されます。

ファージディスプレイペプチドライブラリースクリーニング

標的分子（タンパク質、受容体、抗体など）を固相担体に固定します。構築したファージディスプレイペプチドライブラリーを固定標的分子とインキュベートし、ファージ上のペプチドが標的分子に結合するようにします。この過程で、結合していないバクテリオファージは洗浄によって除去され、標的に結合したバクテリオファージは保持されます。高親和性で結合したバクテリオファージは溶出されます。回収されたバクテリオファージは、大腸菌に感染させて増幅し、次のスクリーニングラウンドにかけます。通常、高結合効率のペプチドを得るには、3～5回のスクリーニングラウンドが必要です。