ファージディスプレイシステム
Alpha Lifetechは長年にわたり、ファージディスプレイ技術に深く携わってきました。Alpha Lifetechは、科学研究やプロジェクト研究の時間を節約し、その後の生産を容易にする、完璧で安定したファージディスプレイ技術プラットフォームを構築しました。M13ファージ、T7ファージ、T4ファージ、λファージディスプレイシステムなど、お客様が選択できる複数のファージディスプレイシステムをご用意しています。実験ニーズに応じて、適切なファージディスプレイシステムをお選びいただけます。Alpha Lifetechは、vhh抗体生産、scfv抗体生産、Fab抗体生産などのサービスも提供しています。
ファージディスプレイ入門
ファージディスプレイ技術は、ファージ(細菌に感染するウイルス)を用いて特定のタンパク質やペプチドの機能的結合分子を探索する技術です。ファージ抗体ライブラリー構築技術には、Fab抗体ライブラリー構築、scFv抗体ライブラリー構築、vhh抗体ライブラリー構築などがあります。バクテリオファージの種類によって、m13バクテリオファージ、T7バクテリオファージ、T4バクテリオファージ、λバクテリオファージ、その他のバクテリオファージに分類できます。ライブラリーの種類によって、ランダムペプチドライブラリー、cDNAライブラリー、抗体ライブラリー、タンパク質ライブラリーに分類できます。ファージディスプレイ技術は、Fabファージディスプレイ、scFvファージディスプレイ、vhhファージディスプレイなどがあり、操作が簡単で安価に利用できます。ただし、この技術は、あまり長い配列を発現できないため、ライブラリー内の分子遺伝学の多様性が制限されます。
ファージディスプレイ技術は、表示する分子と、その分子をコードするDNA配列との間に物理的な結合を形成することができ、ファージゲノム中の目的の断片のDNA配列を決定することで、特定の複合体のアミノ酸配列を瞬時に決定することができる。
現在、ファージディスプレイ技術は広く利用されている。中でも、新規ワクチンの研究開発(低コストで効率的な合成ワクチン)、抗体医薬品の開発(酵素阻害剤のスクリーニング)、細胞シグナル伝達(模擬エピトープのスクリーニング)、抗原エピトープの研究(モノクローナル抗体の作製)において、顕著な成果が上げられている。
ファージディスプレイの原理
ファージディスプレイは、ファージDNAの遺伝子改変に基づく分子技術であり、標的断片をファージ外被タンパク質に結合させ、ファージ表面に発現させる。外来DNA配列は、ファージ外被タンパク質をコードするファージゲノムのヌクレオチド配列内の特定の位置に導入される(図1)。
ファージ感染が起こると、ファージ遺伝子が細菌宿主内で発現し始め、挿入された標的断片は、外被タンパク質をコードする関連遺伝子とクローン化された配列の組み合わせとしてファージ表面に提示される。

図1 バクテリオファージM13のビリオン構造とファージディスプレイ技術の原理。(参照元: ファージディスプレイおよびその他のペプチドディスプレイ技術|FEMS Microbiology Reviews|Oxford Academic (oup.com))
ファージディスプレイシステム
糸状ファージは最も一般的に使用されているファージディスプレイシステムであり、他のファージを用いてファージディスプレイシステムを構築することも可能です。このようなシステムは、糸状ファージを用いたシステムよりも、比較的大きなペプチドを表示したり、cDNAライブラリーをより効率的にスクリーニングしたりすることができます。

図2 ファージディスプレイで使用されるバクテリオファージの種類。(参照元: ファージディスプレイおよびその他のペプチドディスプレイ技術|FEMS Microbiology Reviews|Oxford Academic (oup.com))
ファージディスプレイシステムの利点
ファージディスプレイシステムでは、通常、M13、fd、f1などの線状ファージが用いられます。M13ファージと比較して、T7バクテリオファージは二本鎖DNAで構成されており、複製時の安定性が高く、変異が起こりにくいという特徴があります。T7ファージはキャリアとして急速に増殖し、3時間以内にプラークを形成できるため、クローニングやスクリーニングにかかる時間を大幅に短縮できます。
T7ファージライブラリーの構築は、表面および非表面遺伝子発現、ならびにペプチド、cDNA、ゲノムDNA、抗体などのディスプレイライブラリーの構築に利用されてきました。これにより、T7ファージは抗菌剤としてだけでなく、臓器標的スクリーニング(脳、肝臓、肺など)、抗体認識標的スクリーニング、生理学的メカニズム研究などにも利用でき、様々な疾患の診断や治療にも応用可能です。
その他のバクテリオファージ
選択的に感染するファージ
従来のファージディスプレイとは対照的に、選択的感染性ファージ(SIP)は、溶出工程を必要とせずに、生産タンパク質とリガンドの相互作用をファージ感染および増殖に直接結びつける。

図3 選択的感染性ファージ(SIP)。(参照元: ファージディスプレイおよびその他のペプチドディスプレイ技術|FEMS Microbiology Reviews|Oxford Academic (oup.com))
景観ファージ
ランドスケープファージは、管状カプシドの周囲に超密な繰り返しパターンで配置された数千個の外来ペプチドによって形成され、ランドスケープファージ上の多価表示は高親和性選択を促進するため、ペプチドリガンドの高親和性と低親和性を区別することは不可能である。



複数のファージディスプレイシステム
お客様は、M13ファージ、T7ファージ、T4ファージ、λファージのディスプレイシステムから選択できます。


高スループットスクリーニング機能
ファージディスプレイシステムを用いることで、大規模なファージライブラリーを迅速に構築し、ハイスループットスクリーニング実験を実現できる。


カスタマイズされたファージディスプレイサービス
顧客は、高親和性抗体のスクリーニングなど、プロジェクトの要件に応じて包括的なサービスをカスタマイズできます。


幅広い用途
抗体工学、ペプチド・タンパク質工学、創薬・開発、タンパク質相互作用研究などの分野に応用されている。
ご不明な点がございましたら、いつでもお気軽にお問い合わせください。
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2018年7月16日 

