scFv抗体ライブラリー構築サービス
scFv抗体ライブラリー構築サービスのご紹介
scFvは、約25 kDaの短い柔軟なペプチドでつながれた重鎖(VH)と軽鎖(VL)からなる小さな抗体フラグメントであり、最も一般的に使用されているタイプの組み換え抗体です。scFvはサイズが小さく、特異性が高く、原核生物発現システムで大規模に生産でき、完全な抗原結合部位を持っているため、病気の診断と治療に広く使用されています。サイズが小さいため、病気の治療で腫瘍に素早く浸透しやすいです。さらに、scFvは非標的組織での滞留時間が短く、血清クリアランスが速いなどの利点があり、腫瘍イメージングに応用される可能性が高くなっています。一般的なscFv抗体ライブラリはファージディスプレイライブラリですが、リボソームディスプレイ、酵母細胞ディスプレイ、哺乳類細胞ディスプレイ、細菌ディスプレイ技術もscFvライブラリの構築に使用できます。
アルファライフテックが提供できるもの
Alpha Lifetechは、確立されたscFv抗体ライブラリー構築システムを有しており、免疫動物の脾臓細胞およびヒト由来Bリンパ球上でscFv抗体ライブラリーを調製することができます。さらに、scFv抗体配列情報をあらゆる側面から分析し、EC50アッセイ、親和性分析、フロースルーブロッキング検証など、さまざまなアッセイを使用して検証します。M13、T4、T7、λファージなど、さまざまなファージプラットフォームを備えており、顧客のさまざまなニーズを満たし、パーソナライズされたscFvライブラリー構築サービスを提供できます。当社の研究者はライブラリー構築において長年の経験を持ち、免疫ライブラリー、天然ライブラリー、半合成ライブラリー、合成ライブラリーなど、さまざまなタイプのscFvファージディスプレイライブラリーの構築を得意としています。当社が構築したscFv抗体ライブラリーは、大規模なライブラリー容量と豊富な多様性を備えており、高親和性のscFv抗体を生産することができます。当社は、国内外の多くの機関に細菌、ウイルス、毒素、受容体、腫瘍抗原、ペプチドなどに対するscFv抗体ライブラリー構築サービスを提供してきました。ファージ抗体ディスプレイ技術は操作が簡単で、実験期間が短く、哺乳類発現システムによって目的のscFvを大量に発現できます。ファージディスプレイシステムを使用して調製したscFv組み換え抗体技術は、ハイブリドーマ細胞を調製する必要がなく、scFv遺伝子を目的のファージベクターに直接クローニングできます。
| さまざまな種類の抗体ライブラリ | ファージベクター | 宿主細菌 | 種 | 組織または細胞 | 最大ライブラリ容量 |
| scFv免疫ライブラリー | pMECS、pComb3X、pCANTAB 5E など。 | TG1 E. coli、XL1-Blue、ER2738など | 人、ネズミ、ウサギ、羊、牛など。 | 動物の脾臓、PBMC、ハイブリドーマ細胞 | 1×10^9 |
| scFvナイーブライブラリ | |||||
| scFv半合成ライブラリ | |||||
| scFv合成ライブラリ |
scFv抗体ライブラリー構築サービスプロセス
当社は、VHとVLをフレキシブルなペプチドで連結し、お客様が求めるscFvを構築することに長けています。pMECS、pComb3X、pCANTAB 5Eなど、幅広いファージベクターをご提供できます。TG1 E. coli、XL1-Blue、ER2738などの株も保有しており、これらは増殖培養後にファージ感染に使用できます。当社は、最大10^9の大容量、優れた多様性、高い断片挿入率を備えた抗体ライブラリーを構築しており、高い親和性と特異性を持つscFv抗体をスクリーニングし、お客様にご満足いただけます。また、お客様のニーズに合わせて、スクリーニングされたscFvを発現・精製することも可能です。原核生物発現系に加え、哺乳類細胞、酵母細胞、植物細胞、昆虫細胞発現系など、抗体タンパク質の様々な真核生物発現系も保有しており、お客様に高品質なscFv抗体をお届けしています。 Alpha Lifetech は、世界中の科学者のさまざまなニーズを満たす包括的な scFv ライブラリ構築サービスを提供します。
scFv抗体ライブラリー構築サービスワークフロー
| 手順 | 仕様 | タイムライン |
|---|---|---|
| ステップ1:RNA抽出と逆転写 | マウスの脾臓、ハイブリドーマ、ヒトおよびウサギのBPMCを採取し、RNAを抽出して逆転写した。 | 1日 |
| ステップ2:VH遺伝子とVL遺伝子の増幅と回収 | cDNAを鋳型として用いたVHおよびVL遺伝子の増幅 | 2日間 |
| ステップ3: scFv遺伝子のスプライシングと増幅 | SOE-PCRにより、VH遺伝子とVL遺伝子をリンカーで連結してscFv遺伝子断片を取得し、ゲル回収を行った。 | 2日間 |
| ステップ4:酵素消化とライゲーション | scFv遺伝子はプラスミドで消化され、T4 DNAリガーゼで連結された。 | 2日間 |
| ステップ5:組み換えプラスミドの形質転換 | 一次抗体ライブラリーは電気化学的または化学的変換によって得られる | 3日間 |
| ステップ6: scFvライブラリ容量の決定 | ライブラリを滴定し、ライブラリサイズを計算する | 2日間 |
| ステップ7: 挿入率と多様性の決定 | ライブラリを滴定し、ライブラリサイズを計算する | 2日間 |
複数の発現システム
原核生物、哺乳類、酵母、植物、昆虫などの複数の scFv 発現システムが利用可能であり、大腸菌によって大規模に発現できます。
複数の種
ヒト、マウス、ウサギ、ヒツジ、ウシなど、さまざまな種の scFv 抗体ライブラリの構築。
複数の種類のライブラリ
複数の種類の scFv 抗体ライブラリ: 免疫化、天然、半合成、合成ライブラリ。
複数のファージ
幅広いファージから選択可能:scFv ディスプレイ用の M13、T4、T7、λ ファージ。
パーソナライズされたカスタマイズ
詳細な個別カスタマイズプログラム(配列解析、プライマー設計、実験設計、遺伝子合成などを含む)
プロフェッショナルで信頼できる
専門の研究室スタッフによる操作により、ライブラリ構築サイクルが短縮され、高品質の scFv ライブラリが作成されます。
追加サービス
短い免疫期間と高い血清抗体の有効性を備えた動物の免疫サービスを提供
結果の配信
構築された scFv 抗体ライブラリは大規模かつ多様であり、断片挿入率も高くなります。



2018年7月16日 

