モノクローナル抗体（mAb）は抗体医薬品の先駆けであり、100種類以上のモノクローナル抗体が癌、感染症の治療薬として承認され、独自の医薬品開発市場を形成し、独自の治療価値を示しています。シングルB細胞抗体技術は、新世代の抗体開発技術として、単一B細胞から抗体を効率的かつ迅速に分離することができ、ハイブリドーマやファージディスプレイに続く抗体生産技術のブレークスルーです。シングルB細胞ソーティング技術は、ウサギ、マウス、ラクダ、ヒツジ、ニワトリなど、複数の種に対する抗体生成に使用できます。シングルB細胞技術は、高い特異性、高い活性、高い親和性などの優れた利点があります。シングルB細胞ソーティングプラットフォームに基づいて、Alpha Lifetechはスクリーニング時間と高品質の抗体の取得において優位性を持っています。抗原設計、合成、修飾、動物免疫、シングルB細胞濃縮スクリーニング、シングルセルシーケンス、ハイスループットスクリーニング、発現、精製、機能検証などのワンストップ技術サービスを提供し、顧客の多様なニーズに対応します。

実験動物（マウス、ウサギなど）に対して免疫刺激を与えるための適切な抗原を選択し、それによって動物がその抗原に対する特異的な抗体を産生できるようにする。

動物免疫は抗体産生の初期段階である。動物免疫とは、生物自身の体液性免疫応答機構を利用し、抗原を継続的に刺激することで、動物が強い免疫応答を起こし、特定の抗原に対する特異的な抗体を分泌させる方法である。

免疫動物の末梢血、脾臓、またはリンパ節からB細胞を分離した。これらのB細胞は、特定の抗原に対する抗体を産生するように免疫学的に刺激された。

物理的または化学的方法（密度勾配遠心分離、磁気ビーズ分離など）により、B細胞を濃縮し、不純物細胞を除去し、B細胞の純度と後続の分離効率を向上させる。

蛍光活性化細胞選別法（FACS）、磁気細胞分離法（MACS）、マイクロ流体細胞選別法（MCS）などのハイスループットスクリーニング技術を抗原特異的標識と組み合わせることで、濃縮されたB細胞から個々のB細胞を選別し、標的抗体を産生することができる。

混合B細胞集団から単一のB細胞を分離した場合、その抗体遺伝子を単一細胞シーケンス技術で配列決定し、重鎖可変領域（VH）と軽鎖可変領域（VL）のDNA配列情報を取得するために解析する必要があります。単一細胞シーケンス技術は、主に単一細胞分離、細胞内核酸増幅、およびシーケンス解析の3つのステップから構成されます。単一細胞シーケンスの原理は、分離された単一細胞の微量な全ゲノムDNAまたはRNAを増幅し、ハイスループットシーケンスのために高カバレッジの完全なゲノムまたはトランスクリプトームを取得することです。

ハイスループットスクリーニングにより、数千個のB細胞の抗体遺伝子配列を一度に取得できるため、抗体発見の速度が大幅に向上する。これらの配列情報は、抗体ライブラリーの構築やスクリーニングにさらに活用できる。

図2 単一B細胞の捕捉、ライブラリー構築、ハイスループットスクリーニングおよびシーケンスの概略図。（参照元： 大規模並列シングルセルB細胞受容体シーケンスにより、多様な抗原反応性抗体の迅速な発見が可能になる。（）

（１）組換えタンパク質：2.5 mg以上、タンパク質純度＞85％、タンパク質分子量＞10 kDa、可溶性タンパク質濃度0.5～5 mg/mL。抗原親和性精製が必要な場合は、さらに10 mgの組換えタンパク質が必要です。

（２）ポリペプチドおよび小分子：裸のペプチドは10mg以上、ペプチド純度は90％以上、アミノ酸数は10以上、KLH/BSA/OVAまたはその他のキャリアタンパク質と結合。小分子は事前に構造評価が必要。