合成抗体ライブラリーの紹介

合成抗体ライブラリは、De novo ライブラリとも呼ばれ、DNA 合成やファージディスプレイなどの技術を利用して、ナイーブな抗体ライブラリに依存せずに、フレームワーク領域や CDR を含む完全な抗体可変領域を設計および合成する合成方法です。

半合成抗体ライブラリは、天然に存在する抗体ライブラリと合成による多様性を組み合わせることで作製されます。通常、DNAオリゴヌクレオチドを合成して異なる相補性決定領域（CDR）のセットを作成し、これをヒトや動物のB細胞などの天然由来の一定の抗体フレームワークと組み合わせます。合成されたCDRによってライブラリに多様性がもたらされ、幅広いエピトープを標的とする抗体が生成されます。半合成抗体ライブラリは、免疫系の自然な多様性と、合成方法によって達成される制御された多様性の間の妥協点を提供します。

ナイーブ抗体ライブラリーと合成抗体ライブラリーの違いは、免疫グロブリン遺伝子の由来によって異なります。一方、半合成抗体ライブラリーと合成抗体ライブラリーの違いは、前者が軽鎖や重鎖といったナイーブ抗体セグメントの一部で構成され、そのうちの1つのみがin vitroで合成されるのに対し、合成抗体ライブラリーはin vitro PCRによる人工合成のみから得られるという点にあります。

アルファライフテックは

アルファライフテック株式会社弊社の専門的な抗体探索プラットフォームに基づき、動物およびヒト由来の半合成/合成抗体ライブラリーを提供できます。遺伝子改変およびライブラリー構築における長年の経験に基づき、天然抗体を超える親和性と特異性を持つ合成抗体を産生できる合成ライブラリーを構築できます。アルファライフテックの専門家は、10^8～10^10の独立したクローンを含む抗体ライブラリの構築において高い成功率を保証できることを誇りに思っています。

アルファライフテック株式会社世界中の研究者の多様なニーズに応えるため、scFv、Fab、VHH抗体、そしてカスタムライブラリなど、包括的な抗体ライブラリ構築サービスを提供できることを誇りに思います。私たちの目標は、様々なお客様のニーズを理解し、それに応えること、そして研究におけるあらゆる課題の解決を支援することです。

合成抗体ライブラリー構築サービスプロセス

デザイン
設計段階では、既存の抗体配列または構造データに基づいて、抗体フレームワークと相補性決定領域（CDR）を選択します。合成CDR抗体は、特定の機能を導入したり、結合特性を強化したりするために設計することもできます。

合成
フレームワーク領域と CDR の両方を含む、設計された抗体配列をコードする合成 DNA は、化学的方法または酵素的方法を使用して合成されます。

組み立て
合成されたDNA断片は、PCR、ライゲーション、ギブソンアセンブリなどの技術を用いて抗体発現ベクターに組み立てられます。これらのベクターは、細菌、酵母、哺乳類細胞などの発現系に導入され、抗体産生に使用されます。

スクリーニングと選択
構築された抗体ライブラリは、ハイスループットスクリーニング法を用いて、所望の特性を持つ抗体をスクリーニング・選抜されます。ライブラリの形式や用途に応じて、ファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、リボソームディスプレイなどの手法が用いられる場合があります。

合成抗体ライブラリー構築サービス

アルファライフテック株式会社当社は、Cre-lox部位特異的組換えシステムを用いて重鎖および軽鎖V遺伝子レパートリーをファージベクターにライゲーションし、6.5 × 10^10クローンからなるファージ上に提示されたFabレパートリーを作製することにより、抗体ライブラリの設計と合成をワンストップでお客様に提供しています。このライブラリからは、ナノモルレベルの親和性を持つものも含め、多数の抗原に対する抗体が得られました。ヒト抗体ライブラリの作製は、M13ファージディスプレイ技術に基づいています（下図参照）。