酵母ディスプレイライブラリー構築サービス
Alpha Lifetechは、酵母ディスプレイライブラリーの構築と抗体ライブラリーのスクリーニングを専門としており、世界中の顧客向けに、様々な形態の酵母ライブラリーを生成し、高親和性かつ特異性の高い抗体をスクリーニングする能力を提供しています。専門の研究者チーム、高度な技術、そして設備を駆使し、幅広い疾患関連タンパク質を標的とした酵母ライブラリーを構築することが可能です。
酵母ディスプレイシステムの背景
酵母ディスプレイは、酵母表面ディスプレイシステムの細胞内タンパク質転座機構(GPIアンカー)を利用して、外来抗体やタンパク質遺伝子を酵母表面に固定・表示させる真核生物タンパク質発現技術です。酵母表面ディスプレイシステムは、タンパク質の翻訳後修飾と分泌機構を完全に備えており、ヒト化タンパク質の折り畳み、修飾、輸送に最適です。そのため、酵母ディスプレイシステムで産生された抗体は、立体構造と機能の両面でヒトの天然抗体により近く、疾患治療への応用において有望な可能性を秘めています。
酵母ディスプレイシステムを用いることで、タンパク質、ペプチド、低分子、T細胞受容体に特異的な抗体を生産することが可能です。これらの抗体は、汎用性、定量性、治療効果といった利点を有しています。酵母ディスプレイ技術の応用範囲はさらに広く、酵母ディスプレイ抗体の発見だけでなく、タンパク質ライブラリーのスクリーニング、タンパク質の指向性進化、抗原ライブラリーの構築、高親和性抗体の選別、抗体親和性成熟、ワクチン製造、免疫バイオ触媒、バイオセンサーなどにも利用でき、診断、疾患治療、医学研究の分野で大きな可能性を秘めています。さらに、抗原性酵母表面ディスプレイによって作製されたタンパク質は、天然の立体構造に近いため、ELISAなどの血清学的検査に最適です。

図1:酵母ディスプレイの原理
酵母ディスプレイライブラリー構築プロセス
当社の酵母ライブラリーは、大容量かつ多様性に富んでおり、特定の抗体配列を効果的にスクリーニングするための強固な基盤を提供します。お客様のご要望に応じて、様々な形態の酵母抗体ライブラリー(IgG、scFv、VHH、Fab抗体ライブラリー)、タンパク質ライブラリー、ペプチドライブラリー、cDNAライブラリーなどを構築できます。さらに、免疫ライブラリー、天然ライブラリー、合成ライブラリー、半合成ライブラリー、疾患抗体ライブラリーなど、多様な特性を持つ抗体ライブラリーの開発も可能です。pYDは、当社が一般的に使用する酵母表面提示ベクターです。
当社は、100%の挿入率と多様性で、最大10^9のライブラリー容量を持つ酵母ライブラリーを構築できます。酵母ライブラリーを納品する前に、抗体遺伝子の多様性、完全性、機能性を厳密に検証します。スクリーニングされた抗体が非常に高い親和性と特異性を持つことを保証するために、抗体ライブラリーのリアルタイム定量評価を利用します。蛍光活性化セルソーティング(FACS)は、抗体発現と活性の変化を定量的にスクリーニングするもので、抗体と抗原の両方に異なるマーカーを使用して、酵母細胞表面での結合強度と抗体発現を決定します。当社は、FACS結合アッセイを使用して、高い結合親和性と選択性を持つ抗体を定量的にスクリーニングします。FACSによる当社の酵母ディスプレイナノボディライブラリーの表示効率は95%以上です。通常、酵母スクリーニングは3~5回のスクリーニングと濃縮からなり、短期間で高い抗体親和性を持つ抗体を得ることができます。
酵母ディスプレイシステムは、指向性タンパク質進化において強力なツールとなっています。Alpha Lifetechは、in vitroでの特異的抗体調製のためのタンパク質発現、精製、および発現速度解析サービスを提供しています。当社は、大規模なタンパク質調製と組換えタンパク質の純度向上に効果的に対応できます。遺伝子合成から組換えタンパク質の発現・精製まで、ワンストップサービスを提供しています。当社独自の高度な酵母ディスプレイシステムを用いることで、ピコモル(pM)レベルの最高親和性を持つ抗体の調製に成功しました。これは、in vitro組換え抗体調製技術における大きなブレークスルーです。

図2 酵母ディスプレイライブラリーの構築プロセス
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2018年7月16日 

