酵母ディスプレイライブラリー構築サービス

Alpha Lifetechは、酵母ディスプレイライブラリーの構築と抗体ライブラリーのスクリーニングを専門としており、世界中のお客様に対し、様々な形態の酵母ライブラリーを作製し、高親和性かつ特異性の高い抗体をスクリーニングするサービスを提供しています。専門の研究者チーム、高度な技術、設備を駆使し、幅広い疾患関連タンパク質を標的とした酵母ライブラリーを構築できます。

酵母ディスプレイシステムの背景

酵母ディスプレイは、酵母表面ディスプレイシステムの細胞内タンパク質輸送機構（GPIアンカー）を活用し、外来性抗体またはタンパク質遺伝子を酵母表面に固定化・提示する真核生物タンパク質発現技術です。酵母表面ディスプレイシステムは、タンパク質の翻訳後修飾および分泌機構を完備しており、ヒト化タンパク質のフォールディング、修飾、輸送に適しています。そのため、酵母ディスプレイシステムで産生される抗体は、構造と機能の両面においてヒト由来の抗体に近いため、疾患治療への応用が期待されます。

酵母ディスプレイシステムは、タンパク質、ペプチド、低分子、T細胞受容体に特異的な抗体の産生を可能にします。これらの抗体は、汎用性、定量性、治療効果といった利点を有します。酵母ディスプレイ技術の応用範囲はさらに広く、酵母ディスプレイ抗体の探索だけでなく、タンパク質ライブラリーのスクリーニング、タンパク質指向性進化、抗原ライブラリーの構築、高親和性抗体の選別、抗体親和性成熟、ワクチン製造、免疫生体触媒、バイオセンサーなどにも応用でき、診断、疾患治療、医学研究の分野において幅広い可能性を秘めています。さらに、抗原酵母表面ディスプレイによって調製されたタンパク質は、天然の立体構造に近いため、ELISAなどの血清学的アッセイに最適です。酵母ディスプレイ-Alpha Lifetech

図1：酵母ディスプレイ原理

酵母ディスプレイライブラリー構築プロセス

当社の酵母ライブラリは大容量かつ多様性に富んでおり、特定の抗体配列を効果的にスクリーニングするための優れた基盤を提供します。お客様のニーズに合わせて、様々な形態の酵母抗体ライブラリ（IgG、scFv、VHH、Fab抗体ライブラリ）、タンパク質ライブラリ、ペプチドライブラリ、cDNAライブラリなどを構築できます。さらに、免疫ライブラリ、天然ライブラリ、合成ライブラリ、半合成ライブラリ、疾患抗体ライブラリなど、様々な特性を持つ抗体ライブラリの開発も可能です。pYDは、当社が広く使用している酵母表面ディスプレイベクターです。

当社は、最大10^9のライブラリー容量、100%の挿入率と多様性を備えた酵母ライブラリーを構築できます。酵母ライブラリーを納品する前に、抗体遺伝子の多様性、完全性、機能性を厳密に検証しています。選別された抗体が非常に高い親和性と特異性を持つことを保証するために、抗体ライブラリーのリアルタイム定量評価を利用しています。蛍光活性化セルソーティング（FACS）は、抗体の発現と活性の変化を定量的にスクリーニングします。これは、抗体と抗原の両方に異なるマーカーを使用して、酵母細胞表面における結合強度と抗体発現を測定するものです。当社では、FACS結合アッセイを用いて、高い結合親和性と選択性を持つ抗体を定量的にスクリーニングしています。当社の酵母ディスプレイナノボディライブラリーのFACSによるディスプレイ効率は95%以上です。通常、酵母スクリーニングでは、3～5回のスクリーニングと濃縮が行われ、短期間で高い抗体親和性を持つ抗体を得ることができます。

酵母ディスプレイシステムは、タンパク質の指向性進化における強力なツールとなっています。Alpha Lifetechは、in vitro特異的抗体調製のためのタンパク質発現、精製、および発現速度論解析サービスを提供しています。大規模なタンパク質調製能力を有し、組換えタンパク質の純度を効果的に向上させることができます。遺伝子合成から組換えタンパク質の発現・精製まで、ワンストップサービスを提供しています。当社の高度な酵母ディスプレイシステムを用いることで、最高ピコモル（pM）の親和性を有する抗体の調製に成功しました。これは、in vitro組換え抗体調製技術における大きな進歩です。