Layanan Analisis Karakterisasi Aptamer

Alpha Lifetech wis pirang-pirang taun nyedhiyakake layanan sing ana gandhengane karo aptamer, lan saiki bisa nyedhiyakake skema pangembangan aptamer sing komprehensif kayata sintesis aptamer, skrining SELEX, sekuensing throughput dhuwur, lan optimasi lan karakterisasi aptamer. Adhedhasar kaluwihan metode SELEX kanggo skrining aptamer, Alpha Lifetech wis ngembangake luwih akeh metode kanggo skrining aptamer.

Pambuka kanggo Analisis Karakterisasi Aptamer

Verifikasi afinitas

Afinitas aptamer sing dioptimalake wis diverifikasi nganggo teknik sing relevan saka uji pengikatan aptamer. Tuladhane kalebu Isothermal Titration Calorimetry (ITC), Flow Cytometry (FCM), lan Surface Plasmon Resonance (SPR), Microfluidic, lan liya-liyane. Afinitas aptamer biasane diekspresikan dening konstanta disosiasi (KD), kuantitas fisik sing digunakake kanggo ngukur derajat disosiasi molekuler ing reaksi sing bisa dibalikke. Sing luwih cilik nilai KD, sing luwih stabil komplekse, yaiku, sing luwih kuwat afinitase; Kosok baline, sing luwih gedhe nilai KD, sing luwih ora stabil komplekse lan sing luwih ringkih afinitase. Langkah iki minangka kunci kanggo ngenali kinerja aptamer, njamin pematangan afinitas aptamer lan bisa kaiket karo molekul target kanthi afinitas lan selektivitas sing dhuwur ing aplikasi praktis.

Gambar 1 Proses pematangan afinitas aptamer. Sumber referensi:Kinghorn AB, Fraser LA, 2017.

Verifikasi fungsi

Saliyané verifikasi afinitas, fungsi aptamer uga kudu diverifikasi. Iki kalebu verifikasi stabilitas, spesifisitas, lan interaksi aptamer karo molekul liyané ing lingkungan tartamtu. Asil verifikasi fungsional bakal langsung mengaruhi ajiné aptamer ing riset ilmiah lan aplikasi industri.

Verifikasi Khusus

Eksperimen kompetitif: Kemampuan aptamer kanggo kaiket karo target tartamtu dievaluasi nalika ana target liyane sing padha. Yen aptamer bisa kaiket khusus karo molekul target tanpa gangguan saka molekul liyane, iki nuduhake yen aptamer duwe spesifisitas sing dhuwur.

Eksperimen reaksi silang: Aptamer kaiket karo serangkaian target sing gegandhengan utawa ora ana gandhengane kanggo ndeleng apa mung kaiket karo target tartamtu, supaya bisa verifikasi spesifisitase.

Verifikasi stabilitas

Eksperimen degradasi nuklease: Aptamer kasebut kapapar konsentrasi nuklease sing beda-beda lan degradasi kasebut diamati. Kanthi mbandhingake tingkat degradasi ing titik wektu sing beda-beda, kemampuan degradasi anti-nuklease aptamer bisa dievaluasi.

Eksperimen stabilitas suhu lan wektu: Aptamer diselehake ing macem-macem kondisi suhu lan wektu kanggo mirsani stabilitas struktural lan fungsional. Iki mbantu nemtokake kondisi panyimpenan lan panggunaan sing optimal kanggo aptamer.

Identifikasi aktivitas biologis

Cara sing cocog biasane dipilih miturut tujuan aplikasi khusus saka aptamer asam nukleat.

(1) Uji tingkat molekuler: Nggunakake teknik biologi molekuler, kayata elektroforesis gel, Western blot, lan liya-liyane, kanggo ndeteksi kompleks sing kawangun sawise aptamer gabung karo molekul target, utawa ndeteksi owah-owahan ing tingkat ekspresi molekul target sing disebabake dening aptamer.

(2) Tes tingkat sel: Kanthi nggunakake teknologi kultur sel, aptamer diinkubasi karo sel target kanggo mirsani owah-owahan biologis kayata morfologi sel, proliferasi lan apoptosis, lan ngevaluasi aktivitas biologis aptamer.

(3) Uji coba model kewan: Ing model kewan sing cocog, aptamer asam nukleat diwenehake kanthi injeksi utawa administrasi obat, lan indikator fisiologis lan owah-owahan patologis kewan diamati kanggo ngevaluasi aktivitas biologis lan keamanan aptamer in vivo.