ანტისხეულების ჰუმანიზაციის განვითარების პლატფორმა

ჩვენ შეგვიძლია სხვადასხვა სახეობის ანტისხეულების ჰუმანიზაცია, მათ შორის თაგვების, კურდღლების, აქლემების (ალპაკა, აქლემი) და ა.შ.

დაგვიკავშირდით

ანტისხეულების ჰუმანიზაციის განვითარების პლატფორმა

ჰუმანიზებული ანტისხეულები ადამიანის იმუნური სისტემის მინიმალურ ან საერთოდ არ იწვევს რეაქციას. კოგნიტური ბაზრის კვლევის თანახმად, ანტისხეულების ჰუმანიზაციის გლობალური ბაზარი 2024 წელს 92.5 მილიონ აშშ დოლარს შეადგენს და 2024 წლიდან 2031 წლამდე 13.00%-იანი წლიური ზრდის ტემპით (CAGR) გაიზრდება. Alpha Lifetech-ს აქვს ანტისხეულების ჰუმანიზაციის მომწიფებული პლატფორმა, რომლის წარმატების მაჩვენებელი ჰუმანიზებული ანტისხეულებისთვის 98%-ზე მეტია. ჩვენ გვაქვს ჰუმანიზაციის მრავალი სტრატეგია, მათ შორის CDR გადანერგვა, SDR გადანერგვა, ჯაჭვის შერევა, ფაგის ჩვენება და ა.შ., რომელთა შერჩევა შესაძლებელია თქვენი ექსპერიმენტული საჭიროებების შესაბამისად. ჩვენ შეგვიძლია არა მხოლოდ მრავალი სახეობის ანტისხეულების ჰუმანიზაცია, როგორიცაა თაგვები, კურდღლები, ალპაკები, აქლემები და ა.შ., არამედ ანტისხეულების ჰუმანიზაცია სხვადასხვა ფორმით, როგორიცაა scFv, Fab და ნანოსხეულები. ჩვენ გვყავს პროფესიონალი ტექნიკური პერსონალი ანტისხეულების წარმოების, გაწმენდისა და ვალიდაციის სერვისების უზრუნველსაყოფად, მათ შორის თაგვის მონოკლონური ანტისხეულების წარმოება, ქიმერული ანტისხეულების წარმოება, ჰუმანიზებული ანტისხეულების ექსპრესიისა და გაწმენდის, ასევე ჰუმანიზებული ანტისხეულების დახასიათებისა და ანალიზის. მაღალი წარმატების მაჩვენებლით, მაღალი სისუფთავითა და დაბალი იმუნოგენურობით, ჩვენ გარანტიას ვაძლევთ ჰუმანიზებული ანტისხეულების წარმოებას.

ანტისხეულების ჰუმანიზაციის შესავალი

მონოკლონური ანტისხეულებით თერაპია შეიძლება გამოყენებულ იქნას აუტოიმუნური დაავადებების, კიბოს და სხვა დაავადებების სამკურნალოდ. მონოკლონური ანტისხეულები წარმოიქმნება თაგვების ან სხვა ცხოველების იმუნიზაციით. მონოკლონური ანტისხეულების წარმოების გვიან სტადიაზე დაავადებების სამკურნალოდ გამოყენებისას, არაადამიანური ანტისხეულების იმუნოგენურობის იგნორირება არ შეიძლება. ჰუმანიზაციის მთავარი პრინციპია არაადამიანური ჩარჩო ნარჩენების, როგორიცაა ჰიპერვარიაბელური კომპლემენტარობის განმსაზღვრელი რეგიონები (CDR), ინტეგრირება ადამიანის ჩარჩოში, რაც წარმოქმნის თანმიმდევრობებს, რომლებიც ინარჩუნებენ ანტისხეულების თავდაპირველ მახასიათებლებს და ამავდროულად ხელს უშლიან იმუნოგენურობას. თაგვის იმუნიზაცია და შემდგომი თაგვის თანმიმდევრობის ჰუმანიზაცია თერაპიული ანტისხეულების აღმოჩენის ორ მთავარ გზად რჩება, რომლებიც ძირითადად რამდენიმე ეტაპს გადის: თაგვის ანტისხეულების წარმოება, მონოკლონური ანტისხეულების ქიმერიზაცია, ქიმერული თაგვის ადამიანის მონოკლონური ანტისხეული და სრულად ჰუმანიზებული მონოკლონური ანტისხეულის განვითარების პროცესი. ამჟამად, კვლევა ძირითადად მოიცავს ტრანსგენურ თაგვებს (ადამიანის B უჯრედების გენების თაგვებში გადატანას), მაღალი გამტარუნარიანობის სკრინინგს საფუარის ან ფაგის დისპლეის ტექნოლოგიის გამოყენებით, CDR გადანერგვას (მშობლის CDR-ების ადამიანის თანმიმდევრობებში ჩასმას), ტრანსპლანტატ-სპეციფიკური განსაზღვრის ნარჩენებს (SDR), ჩარჩოს შერევას და სხვა მეთოდებს.

ანტისხეულების ჰუმანიზაცია - Alpha Lifetech

სურ. 1: ანტისხეულების ჰუმანიზაციის სქემატური მიმოხილვა თაგვის ანტისხეულებიდან (მწვანე დომენები) სრულად ადამიანის ანტისხეულებამდე.

ანტისხეულების ჰუმანიზაციის სტრატეგია

CDR გადანერგვა

CDR გადანერგვა მიიღწევა ძუძუმწოვრების ექსპრესიის სისტემის მეშვეობით, რომელიც დაფუძნებულია რეკომბინანტული დნმ ტექნოლოგიაზე და მისი ძირითადი ეტაპებია:

(1) შესაბამისი ანტისხეულების შემუშავება თაგვებში (ან არაადამიანურ წყაროებში), დნმ-ის კოდირების ანტისხეულების იზოლირება და მათი კლონირება ვექტორებად სეკვენირებისთვის (ან პირდაპირ ერთუჯრედიანი სეკვენირების ჩატარება).

(2) ანტისხეულის CDR-ის შესაბამისი დნმ-ის თანმიმდევრობის დადგენა და სამიზნესთან შეკავშირების სპეციფიკურობის დადგენა;

(3) არაადამიანური CDR-ების გადანერგვისა და ახალი ანტისხეულის გენის ასაგებად ადამიანის ჩარჩო რეგიონის (FR) შერჩევა.

(4) არაადამიანურ CDR-ებსა და ადამიანის FR-ებს შორის კონფლიქტების სამგანზომილებიანი ანალიზის ჩატარება, რათა წარმოიქმნას აღდგენის მუტაციები მარყუჟის სტაბილიზაციისა და საბოლოო ჰუმანიზებული ანტისხეულის აფინურობის ან სტრუქტურული მთლიანობის დაკარგვის თავიდან ასაცილებლად.

სურ. 2: კომპლემენტარობის განმსაზღვრელი რეგიონის (CDR) გადანერგვის სქემატური მიმოხილვა.

ჩარჩოს არევა

ჩარჩოს შერევა ეფუძნება ფაგის ჩვენების ტექნოლოგიას და ფაგის ბიბლიოთეკის სკრინინგის ტექნოლოგიას მაღალი აფინურობის ანტისხეულების მისაღებად. ადამიანის ანტისხეულების მძიმე ჯაჭვის ჩარჩოების კოდირების ოლიგონუკლეოტიდები გამოიყენება შაბლონებად, CDR რეგიონები კოდირებულია პრაიმერებად და PCR ამპლიფიკაცია ხორციელდება PCR პროდუქტის დენატურაციისთვის ერთჯაჭვიანი დნმ-ის მისაღებად. სტრეპტავიდინით გაწმენდილი VL და VH გენების ერთჯაჭვიანი დნმ რეკონსტრუქცირდება ვექტორებზე T4 დნმ ლიგაზისა და რესტრიქციული ფერმენტების გამოყენებით, ინკუბირდება ბაქტერიოფაგებთან და ამპლიფიცირდება ბაქტერიოფაგების მიერ, რის შემდეგაც იქმნება ფაგის ჩვენების ბიბლიოთეკა. ტარდება სკრინინგის სამი რაუნდი შესაბამისი ანტიგენებით და დადებითი კლონები საბოლოოდ ვერიფიცირდება ELISA-ს და სხვა მეთოდების გამოყენებით.

სურ. 3: კომპლემენტარობის განმსაზღვრელი რეგიონის (CDR) გადანერგვისა და ჩარჩოს (FR) შერევის ჰუმანიზაციის სტრატეგიების სქემატური ილუსტრაცია. (A) CDR გადანერგვის ძირითადი პროცედურა. (B) FR შერევის ძირითადი პროცესი. (საცნობარო წყარო: ვანგ იონგმეი და სხვ., „ჩარჩოს შერევისა“ და „CDR გადანერგვის“ შედარება PD-1 თაგვის ანტისხეულის ჰუმანიზაციისას.)

ფაგის ჩვენება

ჰუმანიზებული ანტისხეულების წარმოება ეფუძნება ბაქტერიოფაგების ზედაპირზე სპეციფიკური ანტისხეულების გამოვლენის მეთოდს, რომელიც ძირითადად ადამიანის ანტისხეულების ფაგების ბიბლიოთეკების მეშვეობით არის აგებული. ბიბლიოთეკის წყაროა ადამიანის პერიფერიული სისხლიდან იზოლირებული PBMC-ები ფაგების ბიბლიოთეკების შესაქმნელად, საიდანაც ხდება შესაბამისი თანმიმდევრობების სკრინინგი. ამ თანმიმდევრობას აქვს სრული ადამიანის თანმიმდევრობა, მაგრამ წარმოქმნილი ანტისხეულები ანტისხეულების ფრაგმენტებია, როგორიცაა scFv, Fab და ნანონაწილაკი.

ანტისხეულების ჰუმანიზაციის სერვისის სამუშაო პროცესი

მომსახურების ნაბიჯები	ხარისხის კონტროლის სტანდარტი	ქრონოლოგია
ანტისხეულების იზოლაცია	სისუფთავე >95%	1-2 კვირა
თანმიმდევრობის ანალიზი	არაადამიანური თანმიმდევრობების ზუსტი იდენტიფიკაცია	1 კვირა
CDR გადანერგვა და ჩარჩოს გადანერგვა	წარმატებული ინტეგრაცია და გამოხატვა	2-3 კვირა
გამოხატვა და განწმენდა	მაღალი მოსავლიანობა და სისუფთავე	2-3 კვირა
ფუნქციური ვალიდაცია	აფინურობისა და სპეციფიკურობის შეფასება	1 კვირა