უჯრედ-სპეციფიკური აპტამერის სკრინინგი (Cell-SELEX)

„ალფა ლაიფტეკს“ აპტამერების სკრინინგის დიდი გამოცდილება აქვს, განსაკუთრებით SELEX მეთოდით ჩატარებულ აპტამერების სკრინინგში.

დაგვიკავშირდით

უჯრედ-სპეციფიკური აპტამერის სკრინინგი (Cell-SELEX)

„ალფა ლაიფტეკს“ აპტამერების სკრინინგის დიდი გამოცდილება აქვს, განსაკუთრებით SELEX მეთოდზე დაფუძნებულ აპტამერების სკრინინგში, რომელიც ამჟამად ინ ვიტრო აპტამერების სკრინინგის გავრცელებული ტექნიკაა, თუმცა ის ასევე შესაფერისია ცოცხალ ცხოველებში ინ ვივო აპტამერების სკრინინგისთვის. SELEX სკრინინგის ტექნოლოგია არის მეთოდი, რომელიც გამოიყენება სამიზნე მოლეკულებთან სპეციფიკურად შეკავშირებული ნუკლეინის მჟავების თანმიმდევრობების სკრინინგისა და იდენტიფიცირებისთვის და წარმოადგენს „ალფა ლაიფტეკის“ მიერ შემოთავაზებული აპტამერების სკრინინგის სერვისების ძირითად ნაწილს.

SELEX მეთოდის აპტამერების სკრინინგი ძირითადად წარმოადგენს ტექნიკას, რომელიც გულისხმობს აპტამერების იდენტიფიცირებას და გამდიდრებას, რომლებსაც შეუძლიათ სპეციფიკურად დაუკავშირდნენ სამიზნე მოლეკულებს შემთხვევითი ნუკლეინის მჟავების თანმიმდევრობის დიდი რაოდენობით ბიბლიოთეკებიდან სკრინინგისა და ამპლიფიკაციის მრავალი რაუნდის მეშვეობით. ეს ტექნიკა იყენებს ნუკლეინის მჟავასა და სამიზნე ნივთიერებას შორის ურთიერთქმედებას და საბოლოოდ, შეუკავშირებელი თანმიმდევრობის თანდათანობითი გაუქმებით და შეკავშირებული თანმიმდევრობის ამპლიფიკაციით, სამიზნე მოლეკულასთან მაღალი აფინურობითა და სპეციფიკურობით ნუკლეინის მჟავას თანმიმდევრობას იღებს. მოკლედ, SELEX სკრინინგი არის ეფექტური აპტამერების აღმოჩენის მეთოდი, რომელიც ფართოდ გამოიყენება ბიოსამედიცინო კვლევებსა და კლინიკურ გამოყენებაში.

აპტამერის უჯრედი-SELEX

SELEX მეთოდის ოპტიმიზაციისა და განვითარების წყალობით, სკრინინგისთვის შესაძლებელია სამიზნეების ფართო სპექტრის პირდაპირ გამოყენება, მათ შორის მცირე მოლეკულების, ცილების, ვირუსების, ბაქტერიების, ცოცხალი უჯრედების და ქსოვილების ჩათვლით. თუმცა, საკმაოდ რთულია საკმარისად მაღალი სისუფთავის რეკომბინანტული ადამიანის ცილების მიღება ბუნებრივი კონფორმაციით სხვადასხვა in vitro ექსპრესიის სისტემებიდან, განსაკუთრებით ტრანსმემბრანული ცილებიდან და უჯრედშიდა ცილებიდან.

SELEX ტექნოლოგიის ბოლოდროინდელმა მიღწევებმა აპტამერების შერჩევა შედარებით მარტივი გაწმენდილი ცილოვანი ნარევებიდან მთელ ცოცხალ უჯრედებამდე გააფართოვა. 1998 წელს მორისმა და იენსენმა პირველად გამოიყენეს ადამიანის ერითროციტების მემბრანა, როგორც კომპლექსური ჰიბრიდული სამიზნე, Cell-SELEX მეთოდით აპტამერების შესარჩევად, რაც უზრუნველყოფს in vitro პროტოკოლს კომპლექსური პოტენციური აპტამერის იზოლაციისთვის. სხვა SELEX მეთოდებისგან განსხვავებით, აპტამერები Cell-SELEX შერჩევას ახდენენ მთელი უჯრედისთვის, ამიტომ უჯრედის ზედაპირზე მოლეკულური სამიზნე თავის ბუნებრივ მდგომარეობაშია, რაც წარმოადგენს მის ბუნებრივ დაკეცილ სტრუქტურას.

Cell-SELEX-ს შეუძლია გამოყოს აპტამერები, რომლებიც უკავშირდება სპეციფიკურ სამიზნე უჯრედებს. Cell-SELEX-ს შეუძლია არა მხოლოდ აპტამერების გენერირება სპეციფიკური უჯრედების იზოლაციის, აღმოჩენის, იდენტიფიკაციისა და მკურნალობისთვის, არამედ ბიომარკერების აღმოჩენაც. Cell-SELEX აერთიანებს ნანოტექნოლოგიას, მიკროჩიპებს, მიკროფლუიდურ მოწყობილობებს, RNAi-ს და სხვა მოწინავე ტექნოლოგიებს, რათა უზრუნველყოს ულტრამგრძნობიარე და მაღალსპეციფიკური ინსტრუმენტები კლინიკური მედიცინისთვის.

Aptamer Cell-SELEX პროცესი

Cell-SELEX სკრინინგის მეთოდის პრინციპი SELEX სკრინინგის მეთოდის მსგავსია, მაგრამ ძირითადი პროცესი შეიძლება ოდნავ განსხვავებული იყოს.

სურ. 1. Cell-SELEX პროცესი

ბიბლიოთეკის მშენებლობა

შექმენით ოლიგონუკლეოტიდური ბიბლიოთეკები, რომლებიც შეიცავს დიდი რაოდენობით შემთხვევითი ssDNA-ს ან RNA-ს

წინასწარი სკრინინგი

ბიბლიოთეკისა და სამიზნე უჯრედის ინკუბაცია: ბიბლიოთეკაში ნუკლეინის მჟავის თანმიმდევრობა ინკუბირებულია სამიზნე უჯრედთან შესაბამის პირობებში, რათა ბიბლიოთეკაში არსებულ თანმიმდევრობას ჰქონდეს შანსი, დაუკავშირდეს სამიზნე უჯრედის ზედაპირზე.

შემაკავშირებელი თანმიმდევრობების გამოყოფა: ნუკლეინის მჟავების თანმიმდევრობები, რომლებიც არ არის დაკავშირებული სამიზნე უჯრედებთან, სისტემიდან ამოღებულია ფიზიკური ან ქიმიური მეთოდებით (მაგალითად, მაგნიტური მძივების გამოყოფა, ცენტრიფუგირება, მემბრანული ფილტრაცია და ა.შ.) და მხოლოდ ის თანმიმდევრობები რჩება, რომლებიც დაკავშირებულია სამიზნე უჯრედებთან.

SELEX უარყოფითი შერჩევა

ბიბლიოთეკის ინკუბაცია არასამიზნე უჯრედებთან: წინასწარი სკრინინგის გარკვეული რაუნდების დროს, ბიბლიოთეკიდან ნუკლეინის მჟავების თანმიმდევრობები ინკუბირდება არასამიზნე უჯრედებთან შესაბამის პირობებში.

შემაკავშირებელი თანმიმდევრობების მოცილება: არასამიზნე უჯრედებთან დაკავშირებული ნუკლეინის მჟავების თანმიმდევრობები ბიბლიოთეკიდან ამოღებულია ფიზიკური ან ქიმიური მეთოდებით, რაც უზრუნველყოფს, რომ დარჩენილი თანმიმდევრობა სპეციფიკურია მხოლოდ სამიზნე უჯრედისთვის.

გააგრძელეთ წინასწარი სკრინინგული შემოწმება

ნეგატიურად სკრინირებული ბიბლიოთეკები შემდგომში წინასწარი სკრინინგის ქვეშ იქნა შეყვანილი, რათა გამდიდრებულიყო აპტამერები სამიზნე უჯრედების მიმართ მაღალი აფინურობითა და სპეციფიკურობით.

PCR ამპლიფიკაცია

გამდიდრებული SELEX აპტამერები ამპლიფიცირებული იქნა PCR-ით.

მაღალი გამტარუნარიანობის სეკვენირება

ნუკლეინის მჟავების აპტამერების თანმიმდევრობა აღმოჩენილი იქნა ბიოინფორმატიკული მეთოდებით, როგორიცაა NGS.

უპირატესობებიაპტამერის სკრინინგის სერვისი

ჩვენ ვალდებულნი ვართ, ჩვენს მომხმარებლებს შევთავაზოთ მაღალი ხარისხის, მაღალი აფინურობის აპტამერების სკრინინგის მომსახურება.

მრავალი სამიზნე

სკრინინგის სამიზნეების ფართო სპექტრი, მათ შორის ცილები, მცირე მოლეკულები, პეპტიდები და ლითონის იონები და ა.შ.
მრავალი მეთოდი

ხელმისაწვდომია სკრინინგის სხვადასხვა მეთოდი, მათ შორის ტრადიციული SELEX, CE-SELEX, Cell-SELEX, GO-SELEX და Capture-SELEX.
ხარისხის უზრუნველყოფა

ჩვენ გვყავს პროფესიონალური გუნდი, რომელსაც აქვს ადაპტერების შემუშავების გამოცდილება, ხოლო ჩვენი ექსპერიმენტული მონაცემები ავთენტური და სანდოა, რაც გადაწყვეტილებებს გვთავაზობს.
ტექნიკური მხარდაჭერა

ჩვენ გვაქვს სრული აღჭურვილობა შემდგომი ოპტიმიზაციისა და ვალიდაციის დასასრულებლად, მაღალი აფინურობისა და მაღალი სპეციფიკურობის აპტამერების წარმოებისთვის, ხელსაყრელ ფასებსა და უფრო მაღალ ხარისხში.