მონოკლონური ანტისხეულების შემუშავების სერვისი

ალფა ლაიფტექი ინკ.შეუძლია უზრუნველყოს ეპიტოპის პროგნოზირება, პეპტიდების სინთეზი, ცილის ექსპრესია, პოლიკლონური ან მონოკლონური ანტისხეულების წარმოება, ასევე ანტისხეულების გაწმენდა უჯრედული კულტურიდან, ასციტის სითხიდან ან მთლიანი შრატიდან.

ალფა ლაიფტექი ინკ.გამოცდილება აქვს მომხმარებლებისთვის სტაბილური უჯრედული ხაზების სხვადასხვა სერვისის მიწოდებაში, მათ შორის ჰიბრიდომის უჯრედების, გენომის რედაქტირების უჯრედული ხაზების, ნოკდაუნის უჯრედული ხაზების და ზედმეტად ექსპრესიული უჯრედული ხაზების. ჩვენ ვცდილობთ, ყველა კლიენტს შევთავაზოთ მოწინავე, ინდივიდუალური უჯრედული ხაზების სერვისები და ჩვენი მომსახურება დადასტურებული და სანდოა.

ანტისხეულების განვითარების სტრატეგია

1. ანტიგენის დიზაინი და მომზადება
ეს ანტიგენები შეიძლება იყოს ცილები, პეპტიდები ან სხვა მოლეკულები. იმუნოგენების შემუშავება მოითხოვს ყოვლისმომცველ მიდგომას, რომელიც აერთიანებს ანტიგენის სტრუქტურის, იმუნოლოგიისა და მიწოდების სისტემების ცოდნას. Alpha Lifetech-ს აქვს ანტიგენის დიზაინის ტექნოლოგია, რომელსაც შეუძლია იმუნოგენების შემუშავება საჭიროების მქონე მომხმარებლებისთვის.
„ალფა ლაიფტეკი“ მომხმარებლებს სთავაზობს რეკომბინანტული ცილოვანი პროდუქტებიდან არჩევანის გაკეთებას. კვლევისთვის საჭირო რეკომბინანტული ცილების წარმოებისთვის ჩვენ გვაქვს ცილის ექსპრესიის სხვადასხვა სისტემა, როგორიცაა E. coli-ს ექსპრესიის სისტემა, საფუარის ექსპრესიის სისტემა, ბაკულოვირუს-მწერის ექსპრესიის სისტემა, ძუძუმწოვრების ექსპრესიის სისტემა და ა.შ.

2. ცხოველთა იმუნიზაცია
Alpha Lifetech-ს შეუძლია მომხმარებლებისთვის იმუნოგენების მიწოდება, ხოლო თქვენთვის ხელმისაწვდომია იმუნური ცხოველები, როგორიცაა თაგვები, კურდღლები, ცხვრები, ალპაკები, ზღვის გოჭები, ზაზუნები და ა.შ.

3. მონოკლონური ანტისხეულების წარმოების მეთოდები

●Mabs-ის წარმოება ჰიბრიდომის ტექნოლოგიით
ჰიბრიდომა არის ჰიბრიდული უჯრედი, რომელიც წარმოიქმნება ორი სახის უჯრედების, კერძოდ, თაგვის მიელომის უჯრედული ხაზისა და პლაზმური უჯრედების (ლიმფოციტი B) შერწყმით, რომელშიც ჰეტეროზიგოტურ უჯრედს შეუძლია უწყვეტი ანტისხეულების წარმოება ჩვენთვის საინტერესო ანტიგენის წინააღმდეგ in vitro. ჰიბრიდომის უჯრედული ხაზის წარმოება სამი ნაწილისგან შედგება: ანტიგენის დიზაინი (ჰაპტენები, მცირე მოლეკულები და პეპტიდები), ცხოველთა იმუნიზაცია, უჯრედების შერწყმა და დადებითი კლონის სკრინინგი. უნიკალური იმუნიზაციის მეთოდოლოგიების გამოყენებით, ჩვენ ვიღებთ განსაკუთრებით მაღალ უჯრედულ შერწყმის ეფექტურობას (1-10 ჰიბრიდომა ათას B უჯრედზე) და მაღალ ანტისხეულების ტიტრებს, რაც მაქსიმალურად ზრდის ჩვენი წარმატების მაჩვენებელს შემდგომ ანალიტიკურ ტესტებში, რომლებიც მოიცავს ბიოქიმიურ სკრინინგს, in vitro უჯრედებზე დაფუძნებულ ანალიზებს და ცხოველებზე კვლევებს.

●ფაგური დისპლეის ტექნოლოგიით მაბების წარმოება
ფაგის დისპლეი მონოკლონური ანტისხეულების გენერირების კიდევ ერთ მეთოდს გვთავაზობს. B-ლიმფოციტები იზოლირებულია ცხოველის სისხლიდან და მათი mRNA ექსტრაგირებულია. PCR-ის საშუალებით, ეს mRNA გარდაიქმნება cDNA-დ, რომელიც ამრავლებს ყველა VH და VL სეგმენტს. ეს სეგმენტები შემდეგ კლონირდება ვექტორად, როგორც წესი, ერთჯაჭვიანი ცვლადი ფრაგმენტების (scFv) სახით, ბაქტერიოფაგის PIII ცილასთან ერთად. შემდგომში, ეს კონსტრუქტი გამოიყენება E. coli-ს ინფიცირებისთვის, რაც იწვევს დაახლოებით 10^10 უჯრედისგან შემდგარი ბიბლიოთეკის შექმნას დამხმარე ფაგით ინოკულაციის გზით. შემდეგ E. coli-ს შეუძლია გამოყოს ბაქტერიოფაგი, რომელიც შეიცავს VH და VL სეგმენტებს, როგორც მისი გარსის ნაწილს. ამის შემდეგ, შესაძლებელია საინტერესო ანტიგენზე ორიენტირებული სპეციფიკური VH და VL სეგმენტების შერჩევა და გამოყენება E. coli-ს ბაქტერიოფაგით რეინოკულაციისთვის. შემდეგ ხდება პლაზმიდის შემცველი უჯრედების იზოლირება და სეკვენირება.

4. შერწყმის სკრინინგი

●უჯრედების შერწყმა და შერჩევა
შეგროვებული B უჯრედები შემდეგ შერწყმულია მიელომის უჯრედებთან, რომლებიც წარმოადგენენ სიმსივნურ უჯრედებს, რომლებსაც შეუძლიათ განუსაზღვრელი ვადით გამრავლება კულტურაში. შერწყმა, როგორც წესი, მიიღწევა ისეთი ტექნიკის გამოყენებით, როგორიცაა პოლიეთილენგლიკოლის (PEG) შერწყმა.
შერწყმის შემდეგ, ჰიბრიდომის უჯრედები კულტივირდება სელექციურ გარემოში, რომელიც მხოლოდ ჰიბრიდომებს აძლევს გადარჩენის საშუალებას. გარემო, როგორც წესი, შეიცავს ამინოპტერინს, რომელიც ხელს უშლის შეურწყავი მიელომის უჯრედების ზრდას.

●სკრინინგი და შეკუმშვა
შედეგად მიღებული ჰიბრიდომური უჯრედები სკრინინგით კონტროლდება სამიზნე ანტიგენის მიმართ სპეციფიკური ანტისხეულების წარმოქმნაზე. ეს, როგორც წესი, ხორციელდება ისეთი ტექნიკის გამოყენებით, როგორიცაა ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი (ELISA), Western blot, იმუნოპრეციპიტაცია და ნაკადური ციტომეტრია.

ანტისხეულის წარმომქმნელი ჰიბრიდომული უჯრედების იდენტიფიცირების შემდეგ, ისინი კლონირდება იდენტური უჯრედების პოპულაციის გენერირებისთვის. ეს უზრუნველყოფს, რომ თითოეული ჰიბრიდომული უჯრედის მიერ წარმოებული ანტისხეული იდენტურია.

5. ანტისხეულების ფუნქციური ვერიფიკაცია
Alpha Lifetech უზრუნველყოფს ანტისხეულების ფუნქციურ ვალიდაციას, როგორიცაა Western blotting, იმუნოჰისტოქიმია ან ფუნქციური ანალიზები, მონოკლონური ანტისხეულების დასახასიათებლად და ანტისხეულების სპეციფიკურობის, აფინურობისა და ფუნქციონალურობის დასადასტურებლად.

6. ანტისხეულების ოპტიმიზაცია
კულტურის სუპერნატანტიდან ანტისხეულების გაწმენდა ისეთი ტექნიკის გამოყენებით, როგორიცაა ცილა A ან ცილა G აფინური ქრომატოგრაფია, და Alpha Lifetech-ს ასევე შეუძლია უზრუნველყოს ანტისხეულების მოდიფიკაციის მეთოდები ანტისხეულების აფინურობის გასაუმჯობესებლად.

7. ანტისხეულების წარმოება
Alpha Lifetech-ს შეუძლია შეაფასოს კანდიდატი ანტისხეულები მაღალი გამტარუნარიანობის სკრინინგის აპლიკაციებისა და ფართომასშტაბიანი წარმოებისთვის.