1960 жылы биспецификалық антиденелер тұжырымдамасы ұсынылды. Биспецификалық антиденелер, сондай-ақ биспецификалық моноклоналды антиденелер деп аталады, гендік инженерия технологиясын қолдана отырып жасанды түрде синтезделген антиденелер. Инженерлік жасанды антидене ретінде биспецификалық антиденелер әдетте IgG қосалқы класына жатады және CD3 суббірлігіне бағытталған антигенді байланыстыратын фрагментті қамтиды. Биспецификалық антиденелердің екі түрлі антигенді байланыстыру орны бар, олар бір мезгілде екі түрлі антигенді немесе антигеннің екі түрлі эпитопын байланыстыра және тани алады. Моноклоналды антиденелермен салыстырғанда, биспецификалық антиденелердің қосымша нақты антигенді байланыстыру орны бар, сондықтан ісік жасушаларын дәлірек нысанаға алып, нысанадан тыс уыттылықты азайта алатын күштірек ерекшелігі мен нысаналау қабілеті бар. Биспецификалық антиденелер бір мезгілде бірнеше биологиялық функцияларды орындай алады, мысалы, иммундық жасушаларды тарту, сигнал беру жолдарын бұғаттау және ісік жасушаларын тікелей өлтіру. Ертедегі биспецификалық антиденелер негізінен химиялық конъюгация немесе жасуша бірігуі арқылы дайындалды, бірақ бұл әдіс кездейсоқ комбинацияға және нысана комбинациясын бөліп алу қиындықтарына байланысты баяу дамыды. Гендік инженерия технологиясының үздіксіз дамуымен көптеген жаңа технологиялық платформалар, мысалы, тесіктердегі түйіндер (KIH), CrossMab, DVD Ig және т.б. жасалды. Бұл платформалар ауыр және жеңіл тізбектердің сәйкес келмеуі сияқты мәселелерді тиімді шешеді және биспецификалық антиденелердің біркелкілігі мен өнімділігін жақсартады.

Биспецификалық антиденелерді өндірудің негізгі әдістеріне химиялық байланыс, төрт көзді гибридома және гендік инженерия антиденелерін дайындау жатады. Олардың ішінде химиялық байланыс әдісі екі бүтін IgG немесе екі F (ab')2 антидене фрагменттерін фталимид және дитиоацилбензой қышқылы сияқты химиялық байланыс агенттерін пайдаланып биспецификалық антиденелерге біріктіреді. Бұл әдіс қарапайым және пайдалану оңай, бірақ ол антигенді байланыстыру орнын зақымдауы, антидене белсенділігін төмендетуі мүмкін, ал байланыстырушы агенттің өзі де белгілі бір дәрежеде канцерогенділікке ие. Төрт көзді гибридома әдісі екі түрлі гибридома жасуша желілерінен соматикалық жасушалардың сәйкес тышқан IgG экспрессиясын шығару үшін бірігуіне негізделген. Гендік инженерия технологиясы арқылы антиденелерді биспецификалық антиденелерді қалыптастыру үшін генетикалық түрде өзгертуге болады. Екі түрлі моноклоналды антидене жасалды, ал екі антидененің Fab фрагменттері немесе ауыр тізбекті және жеңіл тізбекті айнымалы аймақтары бөлек бөлінді. Айқас байланыс реакциясы немесе тізбекті рекомбинация технологиясы арқылы екі фрагмент биспецификалық антидене қалыптастыру үшін біріктірілді. Гендік инженерия технологиясының күрделілігі салыстырмалы түрде жоғары болғанымен, қазіргі уақытта антиденелердің құрылымы мен қызметін реттеу үшін биспецификалық антиденелерді өндірудің ең көп қолданылатын әдісі болып табылады. Биспецификалық антиденелерді жобалау кезінде антиденелердің айқаспалы реактивтілігі принципі қолданылуы мүмкін, бірақ антиденелердің айқаспалы реактивтілігі спецификалық емес реакцияларды тудыруы мүмкін, сондықтан биспецификалық антиденелерді жобалауды практикалық қолдануда, мысалы, биспецификалық антиденелерді қолдануда ол мұқият қарастырылады.

Биспецификалық антиденелерді тазарту - жоғары тазалықтағы нысана антиденелерді бөліп алу және тазарту процесі. Кейбір еритін қоспаларды кетіру үшін екі әдіс, центрифугалау және терең сүзу қолданылады. Нысана биспецификалық антидене бастапқыда аффиндік хроматография арқылы алынады. IgG тәрізді биспецификалық антиденелер үшін ақуыз А аффиндік хроматографиясы қолданылады, ал IgG тәрізді емес биспецификалық антиденелер үшін жеңіл тізбекке негізделген аффиндік хроматографияны қолдануға болады. Содан кейін антидене белгілі бір уақыт ішінде төмен рН жағдайында инкубацияланады, бұл вирус қабығының бетіндегі ақуыз құрылымының бұзылуына әкеледі, осылайша жасушаларды жұқтыру қабілетін жоғалтады. Қожайын жасуша ақуыздары (HCP) сияқты қоспаларды одан әрі кетіру үшін аралық терең сүзу орындалады. Антиденелердің тазалығы ион алмасу хроматографиясы сияқты әдістер арқылы жақсарады, ал кез келген қалдық вирустар нанофильтрация немесе ультрафильтрация әдістері арқылы жойылады. Соңында, үлгі концентрленеді және тиісті формула буферімен ауыстырылады.