Синтезделген антиденелер кітапханаларына кіріспе

Синтезделген антиденелер кітапханасы, сондай-ақ De novo кітапханасы деп те аталады, бұл наив антиденелер кітапханаларына сүйенбей, толық антидене айнымалы аймақтарын, соның ішінде рамалық аймақтар мен CDR-ді жобалау және синтездеу үшін ДНҚ синтезі немесе фаг дисплейі сияқты әдістерді қолданатын синтетикалық әдіс.

Жартылай синтетикалық антиденелер кітапханасы табиғи түрде пайда болатын антиденелер кітапханаларын синтетикалық әртүрлілікпен біріктіру арқылы жасалады. Әдетте, ол ДНҚ олигонуклеотидтерін синтездеп, әртүрлі комплементарлы анықтаушы аймақтар (CDR) жиынтығын алуды қамтиды, олар кейін адам немесе жануар В жасушалары сияқты табиғи көздерден алынған тұрақты антиденелер құрылымымен біріктіріледі. Синтезделген CDR кітапханаға әртүрлілікті енгізеді, нәтижесінде эпитоптардың кең ауқымын нысанаға алатын антиденелер пайда болады. Жартылай синтетикалық антиденелер кітапханасы иммундық жүйенің табиғи әртүрлілігі мен синтетикалық әдістер арқылы қол жеткізілетін бақыланатын әртүрлілік арасындағы ымыраға келуді қамтамасыз етеді.

Наив және синтетикалық антидене кітапханаларының арасындағы айырмашылық иммуноглобулин гендерінің көзіне байланысты. Сонымен қатар, жартылай синтезделген және синтезделген антидене кітапханасының айырмашылығы біріншісі жеңіл тізбек немесе ауыр тізбек сияқты наив антидене сегменттерінің бір бөлігінен тұратындығында және олардың тек біреуі in vitro синтезделетіндігінде; ал синтезделгені толығымен in vitro ПТР арқылы жасанды синтезден алынады.

Alpha Lifetech қамтамасыз ете алады

Alpha Lifetech Inc.кәсіби антиденелерді анықтау платформасына негізделген жануарлар мен адамдардан алынған жартылай синтезделген/синтезделген антиденелер кітапханасын ұсына алады. Генетикалық модификация және кітапхана құру саласындағы көпжылдық тәжірибесімен табиғи антиденелердің мүмкіндігінен тыс аффинділік пен ерекшелікпен синтетикалық антиденелерді шығара алатын синтезделген кітапханаларды құруға болады.Alpha Lifetech компаниясыныңСарапшылар 10^8 – 10^10 тәуелсіз клондардан тұратын антиденелер кітапханасын құруда жоғары табыс деңгейіне кепілдік бере алатынымызды мақтанышпен хабарлайды.

Alpha Lifetech Inc.scFv, Fab, VHH антиденелері және арнайы кітапханаларды қоса алғанда, әлемдік зерттеушілердің әртүрлі қажеттіліктерін қанағаттандыру үшін кешенді антидене кітапханасын құру қызметтерін ұсынуға мақтанады. Біздің мақсатымыз - әртүрлі тұтынушылардың сұраныстарын түсіну және қанағаттандыру, сондай-ақ зерттеу жұмысындағы кез келген алдағы және туындайтын мәселелерге көмектесу.

Синтезделген антиденелер кітапханаларын құру қызметі процесі

Дизайн
Жобалау кезеңі бар антидене тізбектеріне немесе құрылымдық деректерге негізделген антидене құрылымдарын және комплементарлықты анықтайтын аймақтарды (CDR) таңдауды қамтиды. Синтетикалық CDR антиденелерін белгілі бір функцияларды енгізу немесе байланыстыру қасиеттерін жақсарту үшін де жасауға болады.

Синтез
Құрылымдық аймақтарды және CDR-ді қоса алғанда, жасалған антидене тізбектерін кодтайтын синтетикалық ДНҚ химиялық немесе ферментативті әдістерді қолдану арқылы синтезделеді.

Ассамблея
Синтезделген ДНҚ фрагменттері ПТР, лигатура немесе Гибсон құрастыруы сияқты әдістерді қолдана отырып, антидене экспрессиясының векторларына жиналады. Содан кейін бұл векторларды антидене өндіру үшін бактериялық, ашытқы немесе сүтқоректілер жасушалары сияқты экспрессия жүйелеріне енгізуге болады.

Іріктеу және іріктеу
Құрылған антидене кітапханалары жоғары өнімді скрининг әдістерін қолдана отырып, қажетті қасиеттері бар антиденелерді тексеріп, таңдайды. Бұл кітапхана форматы мен қолданылуына байланысты фаг дисплейі, ашытқы дисплейі немесе рибосома дисплейі сияқты әдістерді қамтуы мүмкін.

Синтезделген антиденелер кітапханаларын құру қызметі

Alpha Lifetech Inc.тұтынушыларға ауыр және жеңіл тізбекті V-ген репертуарларын Cre-lox сайтына тән рекомбинация жүйесін пайдаланып фаг векторына біріктіру арқылы антиденелер кітапханаларының бір терезелі дизайны мен синтезделген қызметін ұсынады, бұл 6,5 × 10^10 клоннан тұратын фагта көрсетілетін Fabs репертуарын жасайды. Кітапхана көптеген антигендерге, кейбіреулеріне наномолярлық аффинділікке қарсы Abs берді. Адам антиденелер кітапханасын генерациялау M13 фаг дисплей технологиясына негізделген (төмендегі суретте көрсетілген).