តើវិស្វកម្មអង្គបដិប្រាណជាអ្វី?

ដោយមានជំនួយពីវិស្វកម្មអង្គបដិប្រាណ វាអាចធ្វើទៅបានក្នុងការកែប្រែទំហំម៉ូលេគុល ឱសថសាស្ត្រ ភាពស៊ាំ សមត្ថភាពចង ភាពជាក់លាក់ និងមុខងារប្រសិទ្ធភាពនៃអង្គបដិប្រាណ។ បន្ទាប់ពីសំយោគអង្គបដិប្រាណ ការចងជាក់លាក់នៃអង្គបដិប្រាណធ្វើឱ្យពួកវាមានតម្លៃខ្ពស់ក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ និងការព្យាបាលគ្លីនិក។ តាមរយៈវិស្វកម្មអង្គបដិប្រាណ ពួកវាអាចបំពេញតម្រូវការនៃការអភិវឌ្ឍដំបូងនៃថ្នាំ និងរោគវិនិច្ឆ័យ។

គោលបំណងនៃវិស្វកម្មអង្គបដិប្រាណគឺដើម្បីរចនា និងបង្កើតមុខងារជាក់លាក់ខ្ពស់ និងមានស្ថេរភាព ដែលអង្គបដិប្រាណធម្មជាតិមិនអាចសម្រេចបាន ដោយដាក់មូលដ្ឋានគ្រឹះសម្រាប់ការផលិតអង្គបដិប្រាណព្យាបាល។

ក្រុមហ៊ុន Alpha Lifetech ដែលមានបទពិសោធន៍គម្រោងយ៉ាងទូលំទូលាយរបស់ខ្លួនក្នុងវិស្វកម្មអង្គបដិប្រាណ អាចផ្តល់សេវាកម្មអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់ និងប៉ូលីក្លូណាល់តាមតម្រូវការសម្រាប់ប្រភេទសត្វច្រើនប្រភេទ ក៏ដូចជាសេវាកម្មសាងសង់បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណបង្ហាញ និងត្រួតពិនិត្យហ្វាច។ ក្រុមហ៊ុន Alpha Lifetech អាចផ្តល់ជូនអតិថិជននូវអង្គបដិប្រាណជីវស្រដៀងគ្នាដែលមានគុណភាព និងផលិតផលប្រូតេអ៊ីនផ្សំឡើងវិញ ក៏ដូចជាសេវាកម្មដែលត្រូវគ្នា ដើម្បីផលិតអង្គបដិប្រាណដែលមានប្រសិទ្ធភាព ជាក់លាក់ខ្ពស់ និងមានស្ថេរភាព។ តាមរយៈការប្រើប្រាស់អង្គបដិប្រាណដ៏ទូលំទូលាយ វេទិកាប្រូតេអ៊ីន និងប្រព័ន្ធបង្ហាញហ្វាច យើងផ្តល់សេវាកម្មដែលគ្របដណ្តប់លើការផលិតអង្គបដិប្រាណទាំងផ្នែកខាងលើ និងខាងក្រោម រួមទាំងសេវាកម្មបច្ចេកទេសដូចជាការធ្វើមនុស្សធម៌អង្គបដិប្រាណ ការបន្សុទ្ធអង្គបដិប្រាណ ការធ្វើលំដាប់អង្គបដិប្រាណ និងការផ្ទៀងផ្ទាត់អង្គបដិប្រាណ។

ដំណាក់កាល​ឈានមុខ​គេ​នៃ​វិស្វកម្ម​អង្គបដិប្រាណ​ទាក់ទង​នឹង​បច្ចេកវិទ្យា​ពីរ៖

--បច្ចេកវិទ្យា DNA បញ្ចូលគ្នាឡើងវិញ

--បច្ចេកវិទ្យា Hybridoma

ការអភិវឌ្ឍយ៉ាងឆាប់រហ័សនៃវិស្វកម្មអង្គបដិប្រាណគឺទាក់ទងនឹងបច្ចេកវិទ្យាសំខាន់ៗចំនួនបី៖

--បច្ចេកវិទ្យាក្លូនហ្សែន និងប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ប៉ូលីមែររ៉េស

--ការបញ្ចេញមតិប្រូតេអ៊ីន៖ ប្រូតេអ៊ីនផ្សំឡើងវិញត្រូវបានផលិតដោយប្រព័ន្ធបញ្ចេញមតិដូចជាផ្សិត វីរុសរាងដំបង និងរុក្ខជាតិ។

--ការរចនារចនាសម្ព័ន្ធជំនួយដោយកុំព្យូទ័រ

អង្គបដិប្រាណជំនាន់ទីមួយត្រូវបានធ្វើជាមនុស្សសម្រាប់ការផលិតអង្គបដិប្រាណចម្រុះ ដែលតំបន់ប្រែប្រួលនៃអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់កណ្ដុរត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងតំបន់ថេរនៃម៉ូលេគុល IgG របស់មនុស្ស។ តំបន់ចងអង់ទីហ្សែន (CDR) នៃអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់កណ្ដុរជំនាន់ទីពីរត្រូវបានប្តូរទៅជា IgG របស់មនុស្ស។ លើកលែងតែតំបន់ CDR អង្គបដិប្រាណផ្សេងទៀតទាំងអស់ស្ទើរតែជាអង្គបដិប្រាណរបស់មនុស្ស ហើយកិច្ចខិតខំប្រឹងប្រែងត្រូវបានធ្វើឡើងដើម្បីជៀសវាងការបង្កើតប្រតិកម្មអង្គបដិប្រាណប្រឆាំងកណ្ដុររបស់មនុស្ស (HAMA) នៅពេលប្រើអង្គបដិប្រាណក្លូនកណ្ដុរសម្រាប់ការព្យាបាលរបស់មនុស្ស។

 

ដើម្បីបង្កើតបណ្ណាល័យបង្ហាញហ្វាច ជំហានដំបូងគឺត្រូវទទួលបានហ្សែនដែលអ៊ិនកូដអង្គបដិប្រាណ ដែលអាចត្រូវបានញែកចេញពីកោសិកា B នៃសត្វដែលមានភាពស៊ាំ (ការសាងសង់បណ្ណាល័យភាពស៊ាំ) ស្រង់ចេញដោយផ្ទាល់ពីសត្វដែលមិនមានភាពស៊ាំ (ការសាងសង់បណ្ណាល័យធម្មជាតិ) ឬសូម្បីតែផ្គុំនៅក្នុងវីត្រូជាមួយនឹងបំណែកហ្សែនអង្គបដិប្រាណ (ការសាងសង់បណ្ណាល័យសំយោគ)។ បន្ទាប់មក ហ្សែនត្រូវបានពង្រីកដោយ PCR បញ្ចូលទៅក្នុងប្លាស្មីត និងបង្ហាញនៅក្នុងប្រព័ន្ធម៉ាស៊ីនសមស្រប (ការបញ្ចេញមេដំបែ (ជាធម្មតា Pichia pastoris) ការបញ្ចេញមេប្រូការីយ៉ូត (ជាធម្មតា E. coli) ការបញ្ចេញមេថនិកសត្វ ការបញ្ចេញមេកោសិការុក្ខជាតិ និងការបញ្ចេញមេកោសិកាសត្វល្អិតដែលឆ្លងមេរោគរាងដំបង)។ ប្រព័ន្ធបញ្ចេញមេ E. coli ដែលរួមបញ្ចូលលំដាប់អង្គបដិប្រាណអ៊ិនកូដជាក់លាក់ទៅលើហ្វាច និងអ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីនសំបកហ្វាចមួយ (pIII ឬ pVIII)។ ការលាយបញ្ចូលគ្នានៃហ្សែន និងបង្ហាញនៅលើផ្ទៃនៃបាក់តេរីហ្វាច។ ស្នូលនៃបច្ចេកវិទ្យានេះគឺដើម្បីបង្កើតបណ្ណាល័យបង្ហាញហ្វាច ដែលមានគុណសម្បត្តិជាងបណ្ណាល័យធម្មជាតិ ដែលវាអាចមានការភ្ជាប់ជាក់លាក់។ បន្ទាប់មក អង្គបដិប្រាណដែលមានភាពជាក់លាក់នៃអង់ទីហ្សែនត្រូវបានត្រួតពិនិត្យតាមរយៈដំណើរការជ្រើសរើសជីវសាស្រ្ត អង់ទីហ្សែនគោលដៅត្រូវបានជួសជុល ហ្វាសដែលមិនចងត្រូវបានលាងសម្អាតចេញម្តងហើយម្តងទៀត ហើយហ្វាសដែលចងត្រូវបានលាងសម្អាតចេញសម្រាប់ការបង្កើនប្រសិទ្ធភាពបន្ថែមទៀត។ បន្ទាប់ពីការធ្វើម្តងទៀតបីជុំ ឬច្រើនជុំ អង្គបដិប្រាណដែលមានភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ និងសមត្ថភាពខ្ពស់ត្រូវបានញែកចេញ។

រូបភាពទី 3: ការសាងសង់ និងការត្រួតពិនិត្យបណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណ

បច្ចេកវិទ្យា DNA ផ្សំឡើងវិញអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើតបំណែកអង្គបដិប្រាណ។ អង្គបដិប្រាណ Fab ដំបូងឡើយអាចត្រូវបាន hydrolyzed ដោយ gastric protease ដើម្បីបង្កើតបំណែក (Fab ') 2 ដែលបន្ទាប់មកត្រូវបានរំលាយដោយ papain ដើម្បីបង្កើតបំណែក Fab នីមួយៗ។ បំណែក Fv មាន VH និង VL ដែលមានស្ថេរភាពមិនល្អដោយសារតែអវត្តមាននៃចំណង disulfide។ ដូច្នេះ VH និង VL ត្រូវបានភ្ជាប់គ្នាតាមរយៈ peptide ខ្លីនៃអាស៊ីតអាមីណូ 15-20 ដើម្បីបង្កើតអង្គបដិប្រាណបំណែកអថេរខ្សែសង្វាក់តែមួយ (scFv) ដែលមានទម្ងន់ម៉ូលេគុលប្រហែល 25KDa។

ការសិក្សាអំពីរចនាសម្ព័ន្ធអង្គបដិប្រាណនៅក្នុងសត្វ Camelidae (Camel, LIama, និង Alpaca) បានបង្ហាញថា អង្គបដិប្រាណមានតែខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ប៉ុណ្ណោះ ហើយគ្មានខ្សែសង្វាក់ស្រាលទេ ដូច្នេះពួកវាត្រូវបានគេហៅថា អង្គបដិប្រាណខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ (hcAb)។ ដែនអថេរនៃអង្គបដិប្រាណខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ត្រូវបានគេហៅថា អង្គបដិប្រាណដែនតែមួយ ឬណាណូបូឌី ឬ VHH ដែលមានទំហំ 12-15 kDa។ ក្នុងនាមជាម៉ូណូម័រ ពួកវាមិនមានចំណងឌីស៊ុលហ្វីតទេ ហើយមានស្ថេរភាពខ្លាំង ជាមួយនឹងភាពស្និទ្ធស្នាលខ្ពស់ចំពោះអង់ទីហ្សែន។

រូបភាពទី 5: អង្គបដិប្រាណខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ និង VHH/ណាណូបូឌី

ការបញ្ចេញមតិដោយសេរីរបស់កោសិកាប្រើប្រាស់ការបញ្ចេញមតិនៃ DNA ធម្មជាតិ ឬសំយោគ ដើម្បីសម្រេចបាននូវការសំយោគប្រូតេអ៊ីនក្នុងវីត្រូ ជាធម្មតាប្រើប្រព័ន្ធបញ្ចេញមតិរបស់ E. coli។ វាផលិតប្រូតេអ៊ីនបានយ៉ាងឆាប់រហ័ស និងជៀសវាងបន្ទុកមេតាបូលីស និងជាតិពុលកោសិកាលើកោសិកា នៅពេលផលិតប្រូតេអ៊ីនបញ្ចូលគ្នាក្នុងបរិមាណច្រើននៅក្នុងខ្លួន។ វាក៏អាចផលិតប្រូតេអ៊ីនដែលពិបាកសំយោគផងដែរ ដូចជាប្រូតេអ៊ីនដែលពិបាកកែប្រែបន្ទាប់ពីការបកប្រែ ឬសំយោគប្រូតេអ៊ីនភ្នាស។