តើ​អ្វី​ទៅ​ជា​វិស្វកម្ម​អង់ទីករ?

ដោយមានជំនួយពីវិស្វកម្មអង្គបដិបក្ខ វាអាចកែប្រែទំហំម៉ូលេគុល ឱសថការី ភាពស៊ាំ ភាពស្អិតរមួត ភាពជាក់លាក់ និងមុខងារឥទ្ធិពលនៃអង្គបដិប្រាណ។ បន្ទាប់ពីការសំយោគអង្គបដិប្រាណ ការចងជាក់លាក់នៃអង្គបដិបក្ខធ្វើឱ្យពួកវាមានតម្លៃខ្ពស់ក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ និងការព្យាបាល។ តាមរយៈវិស្វកម្មអង្គបដិបក្ខ ពួកគេអាចបំពេញតម្រូវការឱសថ និងការវិវឌ្ឍន៍ដំបូងនៃការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ។

គោលបំណងនៃវិស្វកម្មអង្គបដិប្រាណគឺដើម្បីរចនា និងផលិតមុខងារជាក់លាក់ខ្ពស់ និងស្ថេរភាពដែលអង្គបដិប្រាណធម្មជាតិមិនអាចសម្រេចបាន ដោយដាក់មូលដ្ឋានគ្រឹះសម្រាប់ការផលិតអង្គបដិប្រាណព្យាបាល។

Alpha Lifetech ជាមួយនឹងបទពិសោធន៍គម្រោងយ៉ាងទូលំទូលាយរបស់ខ្លួនក្នុងវិស្វកម្មអង្គបដិបក្ខ អាចផ្តល់សេវាអង្គបដិប្រាណ monoclonal និង polyclonal ផ្ទាល់ខ្លួនសម្រាប់ប្រភេទសត្វជាច្រើន ក៏ដូចជាសេវាកម្មសាងសង់បណ្ណាល័យ និងការពិនិត្យអង្គបដិប្រាណ phage ។ Alpha Lifetech អាចផ្តល់ឱ្យអតិថិជននូវអង្គបដិប្រាណជីវស្រដៀងគ្នា និងផលិតផលប្រូតេអ៊ីនដែលផ្សំឡើងវិញ ក៏ដូចជាសេវាកម្មដែលត្រូវគ្នា ដើម្បីបង្កើតអង្គបដិប្រាណដែលមានប្រសិទ្ធភាព ជាក់លាក់ខ្ពស់ និងមានស្ថេរភាព។ តាមរយៈការប្រើប្រាស់អង់ទីករដ៏ទូលំទូលាយ វេទិកាប្រូតេអ៊ីន និងប្រព័ន្ធបង្ហាញ phage យើងផ្តល់សេវាកម្មដែលគ្របដណ្តប់លើចរន្តទឹក និងខាងក្រោមនៃការផលិតអង្គបដិប្រាណ រួមទាំងសេវាកម្មបច្ចេកទេសដូចជា ការធ្វើមនុស្សអង្គបដិប្រាណ ការបន្សុតអង្គបដិប្រាណ លំដាប់អង្គបដិប្រាណ និងសុពលភាពអង្គបដិប្រាណ។

ដំណាក់កាលត្រួសត្រាយនៃវិស្វកម្មអង្គបដិបក្ខគឺទាក់ទងទៅនឹងបច្ចេកវិទ្យាពីរ៖

- បច្ចេកវិទ្យា DNA រួមបញ្ចូលគ្នា

- បច្ចេកវិទ្យា Hybridoma

ការអភិវឌ្ឍន៍យ៉ាងឆាប់រហ័សនៃវិស្វកម្មអង្គបដិបក្ខគឺទាក់ទងទៅនឹងបច្ចេកវិទ្យាសំខាន់ៗចំនួនបី៖

បច្ចេកវិទ្យាក្លូនហ្សែន និងប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ polymerase

--Protein expression: ប្រូតេអ៊ីនដែលផ្សំឡើងវិញត្រូវបានផលិតដោយប្រព័ន្ធបញ្ចេញមតិដូចជាផ្សិត មេរោគរាងជាដំបង និងរុក្ខជាតិ។

- កុំព្យូទ័រជួយរចនារចនាសម្ព័ន្ធ

ជំនាន់ទី 1 នៃអង្គបដិបក្ខត្រូវបានគេធ្វើជាមនុស្សសម្រាប់ការផលិតអង្គបដិប្រាណ chimeric ដែលតំបន់អថេរនៃអង្គបដិប្រាណ monoclonal របស់កណ្តុរត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងតំបន់ថេរនៃម៉ូលេគុល IgG របស់មនុស្ស។ តំបន់ភ្ជាប់អង់ទីហ្សែន (CDR) នៃអង្គបដិប្រាណ monoclonal របស់កណ្តុរជំនាន់ទី 2 ត្រូវបានប្តូរទៅជា IgG របស់មនុស្ស។ លើកលែងតែតំបន់ CDR អង្គបដិប្រាណផ្សេងទៀតទាំងអស់គឺស្ទើរតែជាអង្គបដិបក្ខរបស់មនុស្ស ហើយការខិតខំប្រឹងប្រែងត្រូវបានធ្វើឡើងដើម្បីជៀសវាងការជំរុញឱ្យមានការឆ្លើយតបប្រឆាំងនឹងកណ្តុររបស់មនុស្ស (HAMA) នៅពេលប្រើអង្គបដិប្រាណក្លូនកណ្តុរសម្រាប់ការព្យាបាលមនុស្ស។

 

ដើម្បីបង្កើតបណ្ណាល័យបង្ហាញ phage ជំហានដំបូងគឺត្រូវទទួលបានអង្គបដិប្រាណដែលអ៊ិនកូដហ្សែន ដែលអាចញែកចេញពីកោសិកា B នៃសត្វដែលមានភាពស៊ាំ (ការសាងសង់បណ្ណាល័យភាពស៊ាំ) ដកស្រង់ដោយផ្ទាល់ពីសត្វដែលមិនមានភាពស៊ាំ (សំណង់បណ្ណាល័យធម្មជាតិ) ឬសូម្បីតែប្រមូលផ្តុំនៅក្នុង vitro ជាមួយនឹងបំណែកហ្សែនអង្គបដិប្រាណ (ការសាងសង់បណ្ណាល័យសំយោគ)។ បន្ទាប់មក ហ្សែនត្រូវបានពង្រីកដោយ PCR បញ្ចូលទៅក្នុង plasmids និងបង្ហាញនៅក្នុងប្រព័ន្ធម៉ាស៊ីនសមរម្យ (កន្សោមផ្សិត (ជាធម្មតា Pichia pastoris) កន្សោម prokaryotic (ជាធម្មតា E. coli) កន្សោមកោសិកាថនិកសត្វ កន្សោមកោសិការុក្ខជាតិ និងកន្សោមកោសិកាសត្វល្អិតដែលឆ្លងមេរោគដែលមានរាងដូចដំបង)។ ទូទៅបំផុតគឺប្រព័ន្ធបញ្ចេញមតិ E. coli ដែលរួមបញ្ចូលលំដាប់អង់ទីគ័រអ៊ិនកូដជាក់លាក់មួយទៅ phage និងអ៊ិនកូដមួយនៃប្រូតេអ៊ីនសែល phage (pIII ឬ pVIII) ។ ការលាយហ្សែននៃ, និងបង្ហាញនៅលើផ្ទៃនៃ bacteriophages ។ ស្នូលនៃបច្ចេកវិទ្យានេះគឺដើម្បីបង្កើតបណ្ណាល័យបង្ហាញ phage ដែលមានគុណសម្បត្តិជាងបណ្ណាល័យធម្មជាតិដែលវាអាចមានការចងជាក់លាក់។ ក្រោយមក អង្គបដិប្រាណដែលមានភាពជាក់លាក់នៃអង់ទីហ្សែនត្រូវបានពិនិត្យតាមរយៈដំណើរការជ្រើសរើសជីវសាស្រ្ត អង់ទីហ្សែនគោលដៅត្រូវបានជួសជុល ហ្វហ្សេដែលមិនមានព្រំដែនត្រូវបានទឹកនាំទៅឆ្ងាយម្តងហើយម្តងទៀត ហើយហ្វាហ្សេដែលត្រូវបានចងត្រូវបានទឹកនាំទៅសម្រាប់ការពង្រឹងបន្ថែមទៀត។ បន្ទាប់ពីបីដង ឬច្រើនដងនៃពាក្យដដែលៗ ភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ និងអង្គបដិប្រាណដែលមានទំនាក់ទំនងខ្ពស់ត្រូវបានញែកដាច់ពីគេ។

រូបភាពទី 3៖ ការសាងសង់បណ្ណាល័យអង្គបដិបក្ខ និងការបញ្ចាំង

បច្ចេកវិទ្យា DNA ផ្សំឡើងវិញអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើតបំណែកអង្គបដិប្រាណ។ អង្គបដិបក្ខ Fab អាចត្រូវបានបំប្លែងដោយជាតិអាស៊ីតក្រពះដំបូងតែប៉ុណ្ណោះ ដើម្បីផលិត (Fab ') 2 បំណែក ដែលបន្ទាប់មកត្រូវបានរំលាយដោយ papain ដើម្បីបង្កើតបំណែក Fab នីមួយៗ។ បំណែក Fv មាន VH និង VL ដែលមានស្ថេរភាពខ្សោយដោយសារតែអវត្តមាននៃចំណង disulfide ។ ដូច្នេះ VH និង VL ត្រូវបានភ្ជាប់ជាមួយគ្នាតាមរយៈ peptide ខ្លីនៃអាស៊ីតអាមីណូ 15-20 ដើម្បីបង្កើតជាបំណែកអថេរខ្សែសង្វាក់តែមួយ (scFv) អង្គបដិប្រាណដែលមានទម្ងន់ម៉ូលេគុលប្រហែល 25KDa ។

ការសិក្សាអំពីរចនាសម្ព័ន្ធអង្គបដិប្រាណនៅក្នុង Camelidae (Camel, LIama, និង Alpaca) បានបង្ហាញឱ្យឃើញថាអង្គបដិប្រាណមានខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ និងមិនមានខ្សែសង្វាក់ពន្លឺ ដូច្នេះពួកវាត្រូវបានគេហៅថាអង់ទីករខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ (hcAb) ។ ដែនអថេរនៃអង្គបដិប្រាណខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ត្រូវបានគេហៅថា អង្គបដិប្រាណដែនតែមួយ ឬ nanobodies ឬ VHH ដែលមានទំហំ 12-15 kDa ។ ក្នុងនាមជា monomers ពួកវាមិនមានចំណង disulfide និងមានស្ថេរភាពខ្លាំង ជាមួយនឹងទំនាក់ទំនងខ្ពស់សម្រាប់ antigens ។

រូបភាពទី 5៖ អង់ទីករខ្សែសង្វាក់ធ្ងន់ និង VHH/ Nanobody

ការបញ្ចេញមតិគ្មានកោសិកាប្រើប្រាស់ការបញ្ចេញមតិនៃ DNA ធម្មជាតិ ឬសំយោគដើម្បីសម្រេចបាននូវការសំយោគប្រូតេអ៊ីននៅក្នុង vitro ជាធម្មតាដោយប្រើប្រព័ន្ធបញ្ចេញមតិ E. coli ។ វាផលិតប្រូតេអ៊ីនបានយ៉ាងឆាប់រហ័ស និងជៀសវាងបន្ទុកមេតាបូលីស និង cytotoxic លើកោសិកានៅពេលផលិតបរិមាណដ៏ច្រើននៃប្រូតេអ៊ីន recombinant នៅក្នុង vivo ។ វាក៏អាចផលិតប្រូតេអ៊ីនដែលពិបាកក្នុងការសំយោគ ដូចជាវាពិបាកក្នុងការកែប្រែបន្ទាប់ពីការបកប្រែ ឬសំយោគប្រូតេអ៊ីនភ្នាស។