សេវាអភិវឌ្ឍន៍អង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់
ក្រុមហ៊ុន Alpha Lifetech Inc.អាចផ្តល់នូវការព្យាករណ៍អេពីតូប ការសំយោគប៉ិបទីត ការបញ្ចេញប្រូតេអ៊ីន ការផលិតអង្គបដិប្រាណពហុក្លូណាល់ ឬម៉ូណូក្លូណាល់ ក៏ដូចជាការបន្សុទ្ធអង្គបដិប្រាណពីការដាំដុះកោសិកា សារធាតុរាវក្នុងទឹកក្នុងពោះ ឬសេរ៉ូមទាំងមូល។
ក្រុមហ៊ុន Alpha Lifetech Inc.មានបទពិសោធន៍ក្នុងការផ្តល់ជូនអតិថិជននូវសេវាកម្មខ្សែកោសិកាដែលមានស្ថេរភាពជាច្រើនប្រភេទ រួមទាំងកោសិកា hybridoma ខ្សែកោសិកាកែសម្រួលហ្សែន ខ្សែកោសិកា knockdown និងខ្សែកោសិកា overexpression។ យើងព្យាយាមផ្តល់ជូនសេវាកម្មខ្សែកោសិកាផ្ទាល់ខ្លួនកម្រិតខ្ពស់ដល់អតិថិជនគ្រប់រូប ហើយសេវាកម្មរបស់យើងត្រូវបានបង្ហាញឱ្យឃើញ និងគួរឱ្យទុកចិត្ត។
យុទ្ធសាស្ត្រអភិវឌ្ឍន៍អង្គបដិប្រាណ

១. ការរចនា និងការរៀបចំអង់ទីហ្សែន
អង់ទីហ្សែនទាំងនេះអាចជាប្រូតេអ៊ីន ប៉ិបទីត ឬម៉ូលេគុលផ្សេងៗទៀត។ ការរចនាសារធាតុបង្កើនភាពស៊ាំតម្រូវឱ្យមានវិធីសាស្រ្តដ៏ទូលំទូលាយមួយដែលរួមបញ្ចូលចំណេះដឹងអំពីរចនាសម្ព័ន្ធអង់ទីហ្សែន ភាពស៊ាំវិទ្យា និងប្រព័ន្ធចែកចាយ។ Alpha Lifetech មានបច្ចេកវិទ្យារចនាអង់ទីហ្សែនដែលអាចរចនាសារធាតុបង្កើនភាពស៊ាំសម្រាប់អតិថិជនដែលត្រូវការ។
Alpha Lifetech ផ្តល់ជូននូវផលិតផលប្រូតេអ៊ីនផ្សំឡើងវិញសម្រាប់អតិថិជនជ្រើសរើស។ យើងមានប្រព័ន្ធបញ្ចេញប្រូតេអ៊ីនជាច្រើនប្រភេទ ដូចជាប្រព័ន្ធបញ្ចេញ E. coli ប្រព័ន្ធបញ្ចេញផ្សិត ប្រព័ន្ធបញ្ចេញសត្វល្អិត-បាគូឡូវីរុស ប្រព័ន្ធបញ្ចេញថនិកសត្វជាដើម ដើម្បីផលិតប្រូតេអ៊ីនផ្សំឡើងវិញដែលអ្នកត្រូវការសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវ។
២. ការចាក់ថ្នាំបង្ការសម្រាប់សត្វ
Alpha Lifetech អាចផ្តល់សារធាតុបង្កើនភាពស៊ាំដល់អតិថិជន ហើយសត្វដែលមានភាពស៊ាំដូចជា កណ្ដុរ ទន្សាយ ចៀម អាល់ប៉ាកា ជ្រូកហ្គីណេ ហាំស្ទ័រ ជាដើម អាចរកបានសម្រាប់អ្នកជ្រើសរើស។
៣. វិធីសាស្រ្តផលិតអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់
●ការផលិត Mabs ដោយបច្ចេកវិទ្យា Hybridoma
អ៊ីប្រ៊ីដូម៉ា គឺជាកោសិកាកូនកាត់ដែលបង្កើតឡើងដោយការបញ្ចូលគ្នានៃកោសិកាពីរប្រភេទ គឺកោសិកាកណ្តុរ myeloma និងកោសិកាប្លាស្មា (lymphocyte B) ដែលកោសិកា heterozygous អាចផលិតអង្គបដិប្រាណជាបន្តបន្ទាប់ប្រឆាំងនឹងអង់ទីហ្សែនដែលចាប់អារម្មណ៍នៅក្នុង vitro។ ការផលិតកោសិកាកូនកាត់មានបីផ្នែក៖ ការរចនាអង់ទីហ្សែន (haptens ម៉ូលេគុលតូចៗ និង peptides) ការចាក់វ៉ាក់សាំងសត្វ ការបញ្ចូលគ្នាកោសិកា និងការត្រួតពិនិត្យក្លូនវិជ្ជមាន។ ដោយប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្តចាក់វ៉ាក់សាំងពិសេស យើងទទួលបានប្រសិទ្ធភាពនៃការបញ្ចូលគ្នាកោសិកាខ្ពស់ (អ៊ីប្រ៊ីដូម៉ា 1-10 ក្នុងមួយកោសិកា B មួយពាន់) និងកម្រិតអង្គបដិប្រាណខ្ពស់ ដែលបង្កើនអត្រាជោគជ័យរបស់យើងក្នុងការធ្វើតេស្តវិភាគជាបន្តបន្ទាប់ ដែលរួមមានការត្រួតពិនិត្យជីវគីមី ការវិភាគផ្អែកលើកោសិកាក្នុង vitro និងការសិក្សាលើសត្វ។
●ការផលិត Mabs ដោយបច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញ phage
ការបង្ហាញហ្វាចផ្តល់នូវវិធីសាស្រ្តមួយផ្សេងទៀតសម្រាប់បង្កើតអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់។ កោសិកា B-lymphocytes ត្រូវបានញែកចេញពីឈាមសត្វ ហើយ mRNA របស់វាត្រូវបានស្រង់ចេញ។ តាមរយៈ PCR mRNA នេះត្រូវបានបំប្លែងទៅជា cDNA ដែលពង្រីកផ្នែក VH និង VL ទាំងអស់។ ផ្នែកទាំងនេះត្រូវបានក្លូនទៅជាវ៉ិចទ័រ ជាធម្មតាជាបំណែកអថេរខ្សែសង្វាក់តែមួយ (scFv) រួមជាមួយប្រូតេអ៊ីន PIII នៃបាក់តេរីហ្វាច។ បន្ទាប់មក រចនាសម្ព័ន្ធនេះត្រូវបានប្រើដើម្បីឆ្លងមេរោគ E. coli ដែលបណ្តាលឱ្យមានការបង្កើតបណ្ណាល័យដែលមានកោសិកាប្រហែល 10^10 តាមរយៈការចាក់បញ្ចូលជាមួយបាក់តេរីហ្វាចជំនួយ។ បន្ទាប់មក E. coli អាចបញ្ចេញបាក់តេរីហ្វាចដែលមានផ្នែក VH និង VL ជាផ្នែកមួយនៃថ្នាំកូតរបស់វា។ បន្ទាប់ពីនេះ ផ្នែក VH និង VL ជាក់លាក់ដែលកំណត់គោលដៅអង់ទីហ្សែនដែលចាប់អារម្មណ៍អាចត្រូវបានជ្រើសរើស និងប្រើដើម្បីចាក់បញ្ចូល E. coli ឡើងវិញជាមួយបាក់តេរីហ្វាច។ បន្ទាប់មកកោសិកាដែលមានប្លាស្មីតត្រូវបានញែកដាច់ពីគ្នា និងរៀបចំលំដាប់។
៤. ការត្រួតពិនិត្យការលាយបញ្ចូលគ្នា
●ការផ្សំកោសិកា និងការជ្រើសរើស
បន្ទាប់មកកោសិកា B ដែលប្រមូលផលបានត្រូវបានផ្សំជាមួយកោសិកា myeloma ដែលជាកោសិកាមហារីកដែលអាចរីកសាយភាយដោយគ្មានកំណត់ក្នុងការដាំដុះ។ ការផ្សំជាធម្មតាត្រូវបានសម្រេចដោយប្រើបច្ចេកទេសដូចជាការផ្សំ polyethylene glycol (PEG)។
បន្ទាប់ពីការបញ្ចូលគ្នា កោសិកា hybridoma ត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុងឧបករណ៍ផ្សព្វផ្សាយជ្រើសរើស ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានតែ hybridomas ប៉ុណ្ណោះដែលអាចរស់បាន។ ឧបករណ៍ផ្សព្វផ្សាយជាធម្មតាមានផ្ទុក aminopterin ដែលការពារការលូតលាស់របស់កោសិកា myeloma ដែលមិនទាន់បញ្ចូលគ្នា។
●ការត្រួតពិនិត្យ និងការស្ទះ
កោសិកាហ៊ីប្រ៊ីដូម៉ាលទ្ធផលត្រូវបានពិនិត្យរកការផលិតអង្គបដិប្រាណជាក់លាក់ទៅនឹងអង់ទីហ្សែនគោលដៅ។ ជាទូទៅ ការធ្វើបែបនេះត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើបច្ចេកទេសដូចជាការវិភាគអង់ស៊ីមដែលភ្ជាប់នឹងអ៊ីមម៉ូណូស័រ (ELISA), វេស្ទើនប្លូត, អ៊ីមម៉ូណូប្រេស៊ីតេសិន និងលំហូរស៊ីតូមេទ្រី។
នៅពេលដែលកោសិកា hybridoma ដែលផលិតអង្គបដិប្រាណត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ ពួកវាត្រូវបានក្លូនដើម្បីបង្កើតចំនួនកោសិកាដូចគ្នា។ នេះធានាថាអង្គបដិប្រាណដែលផលិតដោយកោសិកា hybridoma នីមួយៗគឺដូចគ្នា។
៥. ការផ្ទៀងផ្ទាត់មុខងារអង្គបដិប្រាណ
Alpha Lifetech ផ្តល់នូវការផ្ទៀងផ្ទាត់មុខងារអង្គបដិប្រាណ ដូចជា Western blotting, immunohistochemistry ឬ functional assays ដើម្បីកំណត់លក្ខណៈអង្គបដិប្រាណ monoclonal និងបញ្ជាក់ពីភាពជាក់លាក់ ភាពស្និទ្ធស្នាល និងមុខងាររបស់អង្គបដិប្រាណ។
៦. ការបង្កើនប្រសិទ្ធភាពអង្គបដិប្រាណ
ការបន្សុទ្ធអង្គបដិប្រាណពីស្រទាប់ខាងលើនៃទឹកសាបដោយប្រើបច្ចេកទេសដូចជា ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីប្រូតេអ៊ីន A ឬប្រូតេអ៊ីន G affinity chromatography និង Alpha Lifetech ក៏អាចផ្តល់វិធីសាស្ត្រកែប្រែអង្គបដិប្រាណដើម្បីបង្កើនភាពស្និទ្ធស្នាលនៃអង្គបដិប្រាណផងដែរ។
៧. ការផលិតអង្គបដិប្រាណ
Alpha Lifetech អាចវាយតម្លៃអង្គបដិប្រាណសម្រាប់កម្មវិធីត្រួតពិនិត្យដែលមានទិន្នផលខ្ពស់ និងផលិតកម្មទ្រង់ទ្រាយធំ។
- ១
តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីជ្រើសរើស fusion hybridoma ដែលត្រឹមត្រូវ?
ក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការលាយបញ្ចូលគ្នា បន្ទះមីក្រូទីទ័រ ៩៦ រន្ធចំនួន ១០-១៥ ត្រូវបានដាំជាមួយនឹងល្បាយចម្រុះលាយបញ្ចូលគ្នា។ បន្ទះនីមួយៗត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងឧបករណ៍ជ្រើសរើស HAT-IMDM ហើយត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងម៉ាស៊ីនភ្ញាស់កាបូនឌីអុកស៊ីតនៅសីតុណ្ហភាព ៣៧ អង្សាសេ។ ៩-១៤ ថ្ងៃបន្ទាប់ពីការលាយបញ្ចូលគ្នា សារធាតុរាវខាងលើលាយបញ្ចូលគ្នាត្រូវបានធ្វើតេស្តសម្រាប់វត្តមាននៃអង្គបដិប្រាណជាក់លាក់ដែលចាប់អារម្មណ៍។
- ២
តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃការជ្រើសរើស?
ការបញ្ចូលគ្នានៃកោសិកាប្លាស្មាជាមួយនឹងកោសិកាមេអ៊ីឡូម៉ាមិនមានប្រសិទ្ធភាព 100% ទេ។ សូម្បីតែស្ថិតនៅក្រោមលក្ខខណ្ឌល្អបំផុត និងការរំញោចដ៏មានប្រសិទ្ធភាពបំផុតក៏ដោយ ការបញ្ចូលគ្នានៃកោសិកានៅតែបង្កើតល្បាយនៃកោសិកាមិនជាប់គ្នា និងកោសិកាជាប់គ្នាដែលត្រូវការបំបែក។ ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃដំណើរការជ្រើសរើស កោសិកាមេអ៊ីឡូម៉ាដែលប្រើសម្រាប់ការបញ្ចូលគ្នាខ្វះ HGPRT ដែលជាអង់ស៊ីមសំខាន់នៅក្នុងផ្លូវសង្គ្រោះនុយក្លេអូទីត។ បន្ទាប់មកល្បាយនេះត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុងឧបករណ៍ផ្សព្វផ្សាយ HAT ដែលមានតែកោសិកាដែលមានអង់ស៊ីម HGPRT ដែលជាកូនកាត់ដែលទទួលមរតក HGPRT ពីកោសិកាប្លាស្មាប៉ុណ្ណោះដែលអាចរស់បាន។
- ៣
តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីពិនិត្យមើលខ្សែកោសិកា hybridoma សម្រាប់សកម្មភាពអង្គបដិប្រាណ?
ការវាយតម្លៃពូជកូនកាត់គឺជាជំហានដ៏សំខាន់មួយ។ ជាធម្មតា ការត្រួតពិនិត្យសារធាតុរាវខាងលើនៃដុំសាច់កូនកាត់ ក្លូន និងរងក្លូន ត្រូវបានផ្តល់ជូនតាមរយៈការវិភាគអង់ស៊ីមដែលភ្ជាប់ទៅនឹងភាពស៊ាំ (ELISA) ការវិភាគ Western blot និងការតម្រៀបកោសិកាដែលបានធ្វើឱ្យសកម្មដោយពន្លឺ (FACS)។ យើងនឹងជ្រើសរើសធ្វើការត្រួតពិនិត្យទាំងអស់នៃសារធាតុរាវខាងលើនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ផ្ទាល់ខ្លួនរបស់យើង។
- ៤
ផ្តល់ការណែនាំលម្អិតអំពីរបៀបធ្វើការពិនិត្យសកម្មភាពអង្គបដិប្រាណ?
សំណាក Hybridoma supernates ដែលត្រូវធ្វើតេស្តអាចមានចាប់ពី 500 ទៅ 1,440 សំណាក ហើយនឹងរួចរាល់សម្រាប់ធ្វើតេស្តនៅថ្ងៃទី 9-14។ យើងអាចលេចឡើងក្នុងរយៈពេលពីបីទៅប្រាំថ្ងៃ ឬអាចរួចរាល់ទាំងអស់នៅថ្ងៃតែមួយ ដូច្នេះវាជារឿងសំខាន់សម្រាប់មន្ទីរពិសោធន៍អតិថិជនក្នុងការរៀបចំជាមុនជាច្រើនសប្តាហ៍ជាមួយនឹងការវិភាគពិនិត្យបន្ទាប់បន្សំជាក់លាក់ដែលបានជ្រើសរើស។
- ៥
ហេតុអ្វីបានជាកូនកាត់វិជ្ជមានត្រូវការក្លូនរង?
បន្ទាប់ពីរកឃើញ Wells វិជ្ជមានក្នុងអំឡុងពេលនីតិវិធីត្រួតពិនិត្យ ELISA ដំបូង hybridomas ត្រូវបានផ្ទេរទៅបរិមាណធំជាង ពោលគឺចាន 24-well ដើម្បីរៀបចំសម្រាប់នីតិវិធី subcloning។ Subcloning នៃ hybridomas ជាធម្មតាត្រូវបានអនុវត្តដោយវិធីសាស្ត្រពនលាយមានកំណត់ ដើម្បីធានាបាននូវការញែក monoclones ដែលមានស្ថេរភាព។ បច្ចេកទេសនេះពាក់ព័ន្ធនឹងការពនលាយវប្បធម៌ hybridoma និងការបំបែកវាទៅជាចាន 96-well ដើម្បីសម្រេចបាន monoclonality (កោសិកាមួយក្នុងមួយ well)។ យ៉ាងហោចណាស់ការពនលាយមានកំណត់ពីរគួរតែត្រូវបានអនុវត្ត ដើម្បីកាត់បន្ថយហានិភ័យនៃការវិវត្តទៅជាចំនួនប្រជាជន hybridoma ចម្រុះ។
- ៦
តើអត្ថប្រយោជន៍នៃការប្រើប្រាស់បច្ចេកវិទ្យាហ៊ីប្រ៊ីដូម៉ាសម្រាប់ការរកឃើញអង្គបដិប្រាណមានអ្វីខ្លះ?
ខ្សែកោសិកាកូនកាត់ត្រូវបានសរសើរចំពោះសមត្ថភាពរបស់ពួកវាក្នុងការផលិតអង្គបដិប្រាណដែលមានភាពស្និទ្ធស្នាលខ្ពស់ ស្ថេរភាព និងភាពជាក់លាក់ក្នុងលក្ខណៈសន្សំសំចៃបំផុត។

សេវាកម្មផលិតអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់កណ្ដុរ
Alpha Lifetech អាចផ្តល់សេវាកម្មទាំងមូលនៃជំងឺមហារីកកូនកាត់សត្វកណ្ដុរដល់អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រទូទាំងពិភពលោក។ សេវាកម្មទាំងនេះរួមមាន ការរចនា/សំយោគអង់ទីហ្សែន ការចាក់វ៉ាក់សាំងសត្វកណ្ដុរ ការលាយកោសិកា និងការជ្រើសរើស/លក្ខណៈកូនកាត់សត្វកណ្ដុរ ដែលយើងអាចជំនាញក្នុងគម្រោងនីមួយៗ។
អានបន្ថែម
សេវាកម្មផលិតអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាលទន្សាយ
Alpha Lifetech មានបទពិសោធន៍ច្រើនឆ្នាំក្នុងវិស័យអង្គបដិប្រាណ ហើយបានបង្កើតវេទិកាអភិវឌ្ឍន៍អង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាលទន្សាយដ៏ទូលំទូលាយមួយ។
អានបន្ថែម


ថ្ងៃទី ១៦ ខែកក្កដា ឆ្នាំ ២០១៨ 

