សេវាកម្មសាងសង់បណ្ណាល័យបង្ហាញ Phage

Alpha Lifetech មានវេទិកាបង្ហាញ phage M13/T7 ដ៏ទូលំទូលាយ ដើម្បីធានាបាននូវការសាងសង់ និងការផលិតបណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណ។ យើងក៏អាចផ្តល់សេវាកម្មតាមតម្រូវការផងដែរ ដូចជាការផលិតអង្គបដិប្រាណ scFv ដើម្បីបំពេញតម្រូវការរបស់អ្នក។

ទំនាក់ទំនងមកយើងខ្ញុំ

០១

សេវាកម្មសាងសង់បណ្ណាល័យបង្ហាញ Phage

ក្រុមហ៊ុន Alpha Lifetech បានចូលរួមយ៉ាងសកម្មក្នុងបច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញ Phage អស់រយៈពេលជាច្រើនឆ្នាំ។ ក្រុមហ៊ុននេះបានបង្កើតវេទិកាបច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញ Phage ដែលមានស្ថេរភាពល្អឥតខ្ចោះ ដែលជួយសន្សំសំចៃពេលវេលាសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវវិទ្យាសាស្ត្រ ឬការស្រាវជ្រាវគម្រោង និងជួយសម្រួលដល់ការផលិតជាបន្តបន្ទាប់។ ក្រុមហ៊ុន Alpha Lifetech ក៏អាចផ្តល់ជូនអតិថិជននូវសេវាកម្មដូចជា ការផលិតអង្គបដិប្រាណ vhh ការផលិតអង្គបដិប្រាណ scFv និងការផលិតអង្គបដិប្រាណ Fab។

Alpha Lifetech មានវេទិកាបង្ហាញ phage M13/T7 ដ៏ទូលំទូលាយ ដើម្បីធានាបាននូវការសាងសង់ និងការផលិតបណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណ។ យើងក៏អាចផ្តល់សេវាកម្មតាមតម្រូវការផងដែរ ដូចជាការផលិតអង្គបដិប្រាណ scFv និងការត្រួតពិនិត្យអង្គបដិប្រាណដែលមានទិន្នផលខ្ពស់ ដើម្បីបំពេញតម្រូវការរបស់អ្នក។

សេចក្តីផ្តើមអំពីការបង្ហាញ Phage

បច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញហ្វាជ គឺជាបច្ចេកទេសមួយដែលប្រើហ្វាជ (វីរុសដែលឆ្លងបាក់តេរី) ដើម្បីស្វែងរកម៉ូលេគុលភ្ជាប់មុខងារនៃប្រូតេអ៊ីន ឬប៉ិបទីតជាក់លាក់។ បច្ចេកទេសសាងសង់បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណហ្វាជ រួមមាន ការសាងសង់បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណ Fab ការសាងសង់បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណ scFv ការសាងសង់បណ្ណាល័យណាណូបូឌីជាដើម។ យោងតាមប្រភេទនៃបាក់តេរីអូហ្វាជ ពួកវាអាចបែងចែកជា M13, T7, T4, λ និងប្រព័ន្ធផ្សេងៗទៀត។ យោងតាមប្រភេទបណ្ណាល័យ វាអាចបែងចែកជាបណ្ណាល័យប៉ិបទីតចៃដន្យ បណ្ណាល័យ cDNA បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណ និងបណ្ណាល័យប្រូតេអ៊ីន។ បច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញហ្វាជគឺងាយស្រួលដំណើរការ និងមានតម្លៃថោកក្នុងការប្រើប្រាស់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ បច្ចេកទេសនេះកំណត់ភាពចម្រុះនៃពន្ធុវិទ្យាម៉ូលេគុលនៅក្នុងបណ្ណាល័យ ដែលមិនអាចបង្ហាញលំដាប់វែងពេកបាន។

បច្ចុប្បន្ននេះ បច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញហ្វាជ (phage display) ត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយ។ ក្នុងចំណោមនោះ មានសមិទ្ធផលសំខាន់ៗជាច្រើនក្នុងការស្រាវជ្រាវ និងអភិវឌ្ឍន៍វ៉ាក់សាំងថ្មីៗ (វ៉ាក់សាំងសំយោគដែលមានតម្លៃទាប និងមានប្រសិទ្ធភាព) ការអភិវឌ្ឍថ្នាំប្រឆាំងអង្គបដិប្រាណ (ថ្នាំទប់ស្កាត់អង់ស៊ីមត្រួតពិនិត្យ) ការបញ្ជូនសញ្ញាកោសិកា (ការត្រួតពិនិត្យអេពីតូបក្លែងក្លាយ) និងការស្រាវជ្រាវអេពីតូបអង់ទីហ្សែន (ការរៀបចំអង្គបដិប្រាណម៉ូណូក្លូណាល់)។

សេចក្តីផ្តើមអំពីបាក់តេរី T7

បាក់តេរីអូហ្វាស T7 គឺជា DNA ដែលមានខ្សែពីរ ប្រវែង DNA គឺ 40kb ហើយត្រូវបានរុំដោយ capsid ដែលមានអង្កត់ផ្ចិត 60 nm។ ឧបករណ៍ភ្ជាប់រវាងក្បាល និងកន្ទុយគឺជារចនាសម្ព័ន្ធរង្វង់ដែលផ្សំឡើងដោយច្បាប់ចម្លងច្រើននៃ gp8។ ក្បាល និងស្នូលនៃបាក់តេរីអូហ្វាស t7 បង្កើតបានជារចនាសម្ព័ន្ធស៊ីឡាំងដែលភ្ជាប់ទៅនឹង gp8 ហើយអាចភ្ជាប់ក្បាល និងកន្ទុយ។

រូបភាពទី 1 ការតំណាងគ្រោងការណ៍នៃបាក់តេរីអូហ្វាស T7។(ឯកសារយោង៖ វឌ្ឍនភាពនៅក្នុងប្រព័ន្ធបង្ហាញ phage T7 (ការពិនិត្យឡើងវិញ))

សេចក្តីផ្តើមអំពីបាក់តេរី M13

បាក់តេរីអូហ្វា M13 ជាកម្មសិទ្ធិរបស់ក្រុមហ្វាសដែលមានសរសៃស្តើង ដែលហៅរួមគ្នាថា ហ្វាស Ff។ វាមានប្រវែង 900 nm និងទទឹង 6.5 nm។ វាមានហ្សែននៃ DNA ខ្សែតែមួយ (ssDNA) ដែលមានប្រវែង 6407 bp ដែលមានហ្សែនចំនួនប្រាំបួនដែលអ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីនផ្សេងៗគ្នាចំនួន 11។ ក្នុងចំណោមនោះ ប្រូតេអ៊ីនទាំងប្រាំគឺជាប្រូតេអ៊ីនថ្នាំកូត ហើយប្រូតេអ៊ីនទាំងប្រាំមួយពាក់ព័ន្ធនឹងការចម្លង និងការផ្គុំហ្វាស។ កំហាប់ខ្ពស់បំផុតនៃប្រូតេអ៊ីនថ្នាំកូតគឺប្រូតេអ៊ីន capsid G8P ដែលបង្កើតឡើងដោយឯកតាប្រូតេអ៊ីនប្រហែល 2,700 និងបង្កើតជាស្រោមជុំវិញក្រូម៉ូសូម។

រូបភាពទី 2 ការតំណាងគ្រោងការណ៍នៃបាក់តេរីអូហ្វា M13 ។(ឯកសារយោង៖ មូលដ្ឋានគ្រឹះនៃបច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញហ្វាចអង្គបដិប្រាណ)

សេចក្តីផ្តើមអំពីបណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណបង្ហាញ Phage

ការរកឃើញអង្គបដិប្រាណបានក្លាយជារឿងសំខាន់កាន់តែខ្លាំងឡើងនៅក្នុងវេជ្ជសាស្ត្រសម័យទំនើប។ វិធីសាស្រ្តស្វែងរកអង្គបដិប្រាណផ្សេងៗគ្នាមាន ប៉ុន្តែបណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណបង្ហាញហ្វាចត្រូវបានប្រើប្រាស់កាន់តែច្រើននៅក្នុងវិទ្យាសាស្ត្រវេជ្ជសាស្ត្រ។

ចាប់តាំងពីឆ្នាំ 1990 មក ទម្រង់អង្គបដិប្រាណផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើតបណ្ណាល័យហ្វាច រួមទាំងអង្គបដិប្រាណ VHs, VHHs, scFvs, diabodies និង Fab។ scFv ដែលផ្សំឡើងពីដែនរចនាសម្ព័ន្ធ VH និង VL គឺជាអង្គបដិប្រាណខ្សែសង្វាក់តែមួយដែលប្រើដើម្បីបង្កើតបណ្ណាល័យ scFv អង្គបដិប្រាណ។ scFv ត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយអាយុកាលពាក់កណ្តាលខ្លី និងភាពស៊ាំទាប។ បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណ Fab មាន VH, VL, CL និង CH1 ដែលអាចត្រងអង្គបដិប្រាណដ៏ល្អជាមួយនឹងភាពស្និទ្ធស្នាលខ្ពស់។ ឯកតាតូចបំផុតដែលអាចភ្ជាប់អង់ទីហ្សែនគោលដៅ-VHH បង្កើតបានជាបណ្ណាល័យណាណូបូឌី បច្ចុប្បន្ន VHH មានគុណសម្បត្តិនៃរចនាសម្ព័ន្ធសាមញ្ញ បរិមាណតូច រលាយខ្ពស់ ស្ថេរភាពល្អ និងការរៀបចំ និងការបញ្ចេញមតិងាយស្រួល។ បណ្ណាល័យណាណូបូឌីសំយោគ (Nb) កំពុងលេចចេញជាជម្រើសដ៏ទាក់ទាញមួយជំនួសឱ្យការចាក់វ៉ាក់សាំងសត្វសម្រាប់ណាណូបូឌីសំយោគដែលមានស្ថេរភាព និងមានទំនាក់ទំនងខ្ពស់។ ជាទូទៅ បំណែកអង្គបដិប្រាណទាំងនេះត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹង G3P នៃហ្វាច M13 ហើយដោយការក្លូនហ្សែនមួយចំនួនធំដែលអ៊ិនកូដបំណែកអង្គបដិប្រាណ បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណបង្ហាញហ្វាចធំៗអាចត្រូវបានបង្កើត ដែលអង្គបដិប្រាណចម្រុះជាច្រើនអាចត្រូវបានជ្រើសរើស។

ដំណើរការសាងសង់បណ្ណាល័យហ្វាជ

ដំណើរការនៃការសាងសង់បណ្ណាល័យហ្វាចមានដូចខាងក្រោម៖ ប្រាយមឺរជាក់លាក់ត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់ការពង្រីក PCR ដែលទទួលបានផលិតផល ដែលត្រូវបានភ្ជាប់ជាមួយអង់ស៊ីមជាមួយវ៉ិចទ័រហ្វាច T7/M13 ហើយប្លាស្មីតហ្វាចដែលបានបង្កើតឡើងវិញត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយជោគជ័យ។ ប្លាស្មីតហ្វាចដែលបានបង្កើតឡើងវិញត្រូវបានបំលែងទៅជាកោសិកាទទួល TG1 បន្ទាប់មកស្រោបលើឧបករណ៍ផ្ទុកដែលមានថ្នាំអង់ទីប៊ីយ៉ូទិកសមស្រប ហើយការដាំដុះដែលបានពង្រីកត្រូវបានអនុវត្តបន្ទាប់ពីការត្រួតពិនិត្យឧបករណ៍បំលែង។ បន្ទាប់ពីការដាំដុះច្រើនជុំ ហ្វាចចម្លងពេលវេលាចម្លងនៅក្នុងបាក់តេរី ហើយបង្ហាញប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ ឬប៉ូលីប៉ិបទីតដោយជោគជ័យ។ បន្ទាប់មកបណ្ណាល័យហ្វាចត្រូវបានបន្សុទ្ធដើម្បីយកភាពមិនបរិសុទ្ធ និងហ្វាចដែលមិនទាន់ចងមួយចំនួនចេញ។

តំបន់អថេរ (VH និង VL) មានទំនាក់ទំនងជាមួយនឹងភាពចម្រុះនៃអង្គបដិប្រាណ ហើយ VH និង VL ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងវ៉ិចទ័រហ្វាស រួមជាមួយនឹងលំដាប់ដែលអ៊ិនកូដប្រូតេអ៊ីនហ្វាស PIII។ បន្ទាប់ពីការផ្គុំ ភាគល្អិតហ្វាសត្រូវបានលាតត្រដាង និងបញ្ចូលគ្នាជាមួយចុង N នៃប្រូតេអ៊ីនថ្នាំកូតតូច III ដើម្បីបង្កើតជាបំណែកអង្គបដិប្រាណដែលមានមុខងារ ដោយទទួលបានបណ្ណាល័យដែលមានលំដាប់ DNA អង្គបដិប្រាណ។

បន្ទាប់ពីការចាក់ថ្នាំបង្ការចប់ កម្រិតទីទ័រត្រូវបានរកឃើញ ហើយឈាមសត្វត្រូវបានយកបន្ទាប់ពីកម្រិតទីទ័រត្រូវបានបញ្ជាក់។ កោសិកាឡាំហ្វូស៊ីតត្រូវបានញែកចេញពីឈាម RNA ត្រូវបានស្រង់ចេញ RT-PCR ពង្រីកបំណែកគោលដៅ ហើយបំណែកហ្សែនតំបន់ V ត្រូវបានទទួល។ ហ្សែន V ត្រូវបានពង្រីកដោយប្រើប្រាយម័រជាក់លាក់មួយ។

បណ្ណាល័យធម្មជាតិដែលបង្កើតឡើងរួមមានអង្គបដិប្រាណដែលបង្កភាពស៊ាំមិនល្អនៅក្នុងសត្វដែលអាចកំណត់គោលដៅគោលដៅណាមួយ។ អង្គបដិប្រាណហ្វាជដែលភ្ជាប់ជាពិសេសទៅនឹងអង់ទីហ្សែនអាចត្រូវបានប្រមូលដោយប្រើបច្ចេកទេសត្រួតពិនិត្យដែលជួសជុល ឬដាក់ស្លាកអង់ទីហ្សែន។

អង់ទីហ្សែនគោលដៅត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងសារធាតុផ្ទុករឹង ដូចជារន្ធមីក្រូផ្លាត ឬភ្ជាប់ទៅនឹងអង្កាំម៉ាញេទិក។ បន្ទាប់មក បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណហ្វាសត្រូវបានបន្ថែមដើម្បីភ្ជាប់វាទៅនឹងអង់ទីហ្សែន។ បន្ទាប់ពីការរលាយច្រើនដង ហ្វាសដែលមានទំនាក់ទំនងទាប ឬមិនជាក់លាក់ត្រូវបានលាងសម្អាតចេញ ហើយហ្វាសដែលបង្ហាញអង្គបដិប្រាណជាក់លាក់ត្រូវបានរក្សាទុក។

ការអនុវត្តការបង្ហាញ Phage

*ការរកឃើញអង្គបដិប្រាណបានក្លាយជារឿងសំខាន់កាន់តែខ្លាំងឡើងនៅក្នុងវេជ្ជសាស្ត្រសម័យទំនើប។ វិធីសាស្រ្តរកឃើញអង្គបដិប្រាណផ្សេងៗគ្នាមាន ប៉ុន្តែបច្ចេកវិទ្យាបង្ហាញហ្វាចត្រូវបានប្រើប្រាស់កាន់តែច្រើននៅក្នុងវិទ្យាសាស្ត្រវេជ្ជសាស្ត្រ។ ចាប់តាំងពីឆ្នាំ 1990 ទម្រង់អង្គបដិប្រាណផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើតបណ្ណាល័យហ្វាច រួមទាំងអង្គបដិប្រាណ VHs, VHHs, scFvs, diabodies និង Fab។
*បណ្ណាល័យ peptide ហ្វាជ អនុញ្ញាតឱ្យមានការកំណត់យ៉ាងឆាប់រហ័សនៃលំដាប់នៃ epitopes ប្រូតេអ៊ីន ហើយបានក្លាយជាឧបករណ៍ដ៏មានឥទ្ធិពលសម្រាប់ការស៊ើបអង្កេតអន្តរកម្មរវាង epitopes និង receptors antigen។
*បំណែកអង្គបដិប្រាណត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹង G3P នៃផាច M13 ហើយដោយការក្លូនហ្សែនមួយចំនួនធំដែលអ៊ិនកូដបំណែកអង្គបដិប្រាណ បណ្ណាល័យអង្គបដិប្រាណបង្ហាញផាចធំៗអាចត្រូវបានបង្កើតឡើង ដែលអង្គបដិប្រាណចម្រុះជាច្រើនអាចត្រូវបានជ្រើសរើស។
*ប្រព័ន្ធបង្ហាញហ្វាស T7 មានគុណសម្បត្តិជាច្រើន រួមទាំងភាពសាមញ្ញ សុវត្ថិភាពខ្ពស់ ស្ថេរភាព ងាយស្រួលផ្ទុក និងដឹកជញ្ជូន ដូច្នេះប្រព័ន្ធនេះត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងវ៉ាក់សាំងបង្ការ និងព្យាបាល។
*ប្រព័ន្ធបង្ហាញហ្វាស T7 អាចរកឃើញអង់ទីហ្សែនផ្សេងៗ ដូចជាអង់ទីហ្សែនលើផ្ទៃនៃអតិសុខុមប្រាណបង្កជំងឺ និងអង់ទីហ្សែនមហារីក។

ហ្វាជ