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항체 인간화 개발 플랫폼

우리는 쥐, 토끼, 낙타(알파카, 낙타) 등 다양한 종의 항체를 인간화할 수 있습니다.

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항체 인간화 개발 플랫폼

인간화 항체는 인체 면역 체계에서 최소한의 반응 또는 반응이 거의 나타나지 않습니다. Cognitive Market Research에 따르면, 전 세계 항체 인간화 시장 규모는 2024년 9,250만 달러이며, 2024년부터 2031년까지 연평균 13.00%의 성장률을 보일 것으로 예상됩니다. Alpha Lifetech는 98% 이상의 높은 인간화 성공률을 자랑하는 성숙한 항체 인간화 플랫폼을 보유하고 있습니다. 당사는 CDR 접합, SDR 접합, 체인 셔플링, 파지 디스플레이 등 다양한 인간화 전략을 제공하며, 고객의 실험 요구에 맞춰 선택할 수 있습니다. 마우스, 토끼, 알파카, 낙타 등 다양한 종의 항체뿐만 아니라 scFv, Fab, 나노 항체 등 다양한 형태의 항체 인간화도 가능합니다. 당사는 마우스 단클론 항체 생산, 키메라 항체 생산, 인간화 항체 발현 및 정제, 인간화 항체 특성 분석 등을 포함한 항체 생산, 정제 및 검증 서비스를 제공할 수 있는 전문 기술 인력을 보유하고 있습니다. 높은 성공률, 고순도, 낮은 면역원성을 보장하는 인간화 항체 생산 서비스를 제공합니다.

항체 인간화 소개

단클론 항체 치료법은 자가면역 질환, 암 및 기타 질병 치료에 사용될 수 있습니다. 단클론 항체는 쥐 또는 다른 동물을 면역화하여 생산됩니다. 단클론 항체 생산 후기 단계에서 질병 치료에 사용될 경우, 비인간 항체의 면역원성을 무시할 수 없습니다. 인간화의 주요 원리는 고변이성 상보성 결정 영역(CDR)과 같은 비인간 골격 잔기를 인간 골격에 통합하여 면역원성을 방지하면서 원래 항체의 특성을 유지하는 서열을 생성하는 것입니다. 쥐 면역화 및 후속 쥐 서열 인간화는 치료용 항체를 개발하는 주요 경로 중 두 가지이며, 주로 쥐 항체 생산, 단클론 항체 키메라화, 키메라 쥐-인간 단클론 항체, 그리고 완전 인간화 단클론 항체 개발 과정의 여러 단계를 거칩니다. 현재 연구는 주로 형질전환 마우스(인간 B 세포 유전자를 마우스에 이식), 효모 또는 파지 디스플레이 기술을 이용한 고처리량 스크리닝, CDR 접합(부모 CDR을 인간 서열에 삽입), 이식 특이적 결정 잔기(SDR), 프레임워크 셔플링 및 기타 방법을 포함합니다.
항체 인간화 - 알파 라이프테크
그림 1: 생쥐 항체(녹색 영역)에서 완전한 인간 항체로의 항체 인간화 과정을 도식적으로 나타낸 그림.

항체 인간화 전략

CDR 접합

CDR 접합은 재조합 DNA 기술을 기반으로 하는 포유류 발현 시스템을 통해 이루어지며, 주요 단계는 다음과 같습니다.
(1) 마우스(또는 비인간 공급원)에서 상응하는 항체를 개발하고 항체를 인코딩하는 DNA를 분리하고 이를 서열 분석을 위한 벡터에 클로닝하거나 단일 세포 서열 분석을 직접 수행합니다.
(2) 항체 CDR에 해당하는 DNA 서열을 결정하고 표적 결합 특이성을 결정합니다.
(3) 인간 프레임워크 영역(FR)을 선택하여 비인간 CDR을 이식하고 새로운 항체 유전자를 구성합니다.
(4) 비인간 CDR과 인간 FR 간의 충돌에 대한 3차원 분석을 수행하여 루프를 안정화하고 최종 인간화 항체의 친화도 또는 구조적 무결성 손실을 방지하기 위한 복구 돌연변이를 생성합니다.
CDR 접목-알파 라이프테크
그림 2: 상보성 결정 영역(CDR) 접합의 개략도.

프레임워크 셔플링

프레임워크 셔플링은 파지 디스플레이 기술과 파지 라이브러리 스크리닝 기술을 활용하여 고친화성 항체를 얻는 방법입니다. 인간 항체 중쇄 프레임워크를 코딩하는 올리고뉴클레오티드를 주형으로 사용하고, CDR 영역을 프라이머로 코딩한 후, PCR 증폭을 통해 얻은 산물을 변성시켜 단일 가닥 DNA를 얻습니다. 스트렙타비딘으로 정제한 VL 및 VH 유전자의 단일 가닥 DNA를 T4 DNA 리가아제와 제한 효소를 이용하여 벡터에 재구성하고, 박테리오파지와 반응시킨 후, 박테리오파지를 이용하여 증폭시켜 파지 디스플레이 라이브러리를 구축합니다. 해당 항원을 사용하여 3회 스크리닝을 수행하고, 최종적으로 ELISA 및 기타 방법을 이용하여 양성 클론을 검증합니다.
항체 인간화
그림 3: 상보성 결정 영역(CDR) 접합 및 프레임워크(FR) 셔플링 인간화 전략의 개략도. (A) CDR 접합의 주요 절차. (B) FR 셔플링의 주요 과정. (참고 자료: Wang Yongmei 외, PD-1 마우스 항체의 인간화에서 "프레임워크 셔플링"과 "CDR 접합"의 비교.)

파지 디스플레이

인간화 항체 생산은 주로 인간 항체 파지 라이브러리를 이용하여 구축된 박테리오파지 표면에 특정 항체를 발현시키는 방법을 기반으로 합니다. 이 라이브러리는 인간 말초혈액에서 분리한 PBMC(말초혈액 단핵세포)를 이용하여 구축하고, 여기서 상응하는 서열을 선별합니다. 선별된 서열은 완전한 인간 항체 서열을 포함하지만, 생산되는 항체는 scFv, Fab, 나노바디와 같은 항체 단편입니다.

항체 인간화 서비스 워크플로우

서비스 절차 QC 표준 타임라인
항체 분리 순도 >95% 1-2주
서열 분석 비인간 서열의 정확한 식별 1주일
CDR 접합 및 프레임워크 접합 성공적인 통합 및 표현 2~3주
표현과 정제 높은 수율과 순도 2~3주
기능 검증 친화도 및 특이성 평가 1주일

항체 인간화 플랫폼의 장점

알파 라이프텍은 98% 이상의 인간화 항체 성공률을 자랑하는 성숙한 항체 인간화 플랫폼을 보유하고 있습니다.

궁금한 점이 있으시면 언제든지 편하게 문의해 주세요.

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