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항체 인간화 개발 플랫폼

우리는 쥐, 토끼, 낙타(알파카, 낙타) 등 다양한 종의 항체를 인간화할 수 있습니다.

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항체 인간화 개발 플랫폼

인간화 항체는 인간 면역 체계에서 최소한의 반응만 유발하거나 전혀 반응을 유발하지 않습니다.Cognitive Market Research에 따르면, 글로벌 항체 인간화 시장 규모는 2024년에 9,250만 달러이며 2024년부터 2031년까지 연평균 성장률(CAGR) 13.00%로 확대될 것입니다.Alpha Lifetech는 인간화 항체에 대해 98% 이상의 성공률을 보이는 성숙한 항체 인간화 플랫폼을 보유하고 있습니다.CDR 이식, SDR 이식, 사슬 셔플링, 파지 디스플레이 등 다양한 인간화 전략을 보유하고 있으며, 실험적 필요에 따라 선택할 수 있습니다.마우스, 토끼, 알파카, 낙타 등 여러 종의 항체 인간화뿐만 아니라 scFv, Fab, 나노바디 등 다양한 형태의 항체 인간화도 제공할 수 있습니다. 저희는 마우스 단일클론 항체 생산, 키메라 항체 생산, 인간화 항체 발현 및 정제, 그리고 인간화 항체 특성 분석 및 분석을 포함한 항체 생산, 정제 및 검증 서비스를 제공하는 전문 기술 인력을 보유하고 있습니다. 높은 성공률, 고순도, 낮은 면역원성을 바탕으로 인간화 ​​항체 생산을 보장합니다.

항체 인간화 소개

단일클론 항체 치료는 자가면역 질환, 암 및 기타 질병 치료에 사용될 수 있습니다. 단일클론 항체는 마우스 또는 다른 동물을 면역화하여 생산됩니다. 단일클론 항체 생산의 후기 단계에서 질병 치료에 사용될 경우, 비인간 항체의 면역원성을 무시할 수 없습니다. 인간화의 주요 원리는 초가변 상보성 결정 영역(CDR)과 같은 비인간 프레임워크 잔기를 인간 프레임워크에 통합하여 면역원성을 방지하면서 원래 항체의 특성을 유지하는 서열을 생성하는 것입니다. 마우스 면역화와 이후 마우스 서열 인간화는 치료용 항체를 발견하는 두 가지 주요 경로로 남아 있으며, 이는 주로 마우스 항체 생산, 단일클론 항체 키메라화, 키메라 마우스 인간 단일클론 항체, 그리고 완전 인간화 단일클론 항체 개발 과정의 여러 단계를 거칩니다. 현재 연구에는 주로 형질전환 마우스(인간 B 세포 유전자를 마우스에 전달), 효모 또는 파지 디스플레이 기술을 이용한 고처리량 스크리닝, CDR 이식(부모 CDR을 인간 서열에 삽입), 이식 특이적 결정 잔류물(SDR), 프레임워크 셔플링 및 기타 방법이 포함됩니다.
항체 인간화-알파라이프텍
그림 1: 쥐 항체(녹색 도메인)에서 완전 인간 항체로의 항체 인간화에 대한 개략적 개요.

항체 인간화 전략

CDR 이식

CDR 이식은 재조합 DNA 기술을 기반으로 한 포유류 발현 시스템을 통해 이루어지며, 주요 단계는 다음과 같습니다.
(1) 마우스(또는 비인간 소스)에서 해당 항체를 개발하고 항체를 인코딩하는 DNA를 분리하고 이를 시퀀싱을 위한 벡터에 복제합니다(또는 단일 세포 시퀀싱을 직접 수행합니다).
(2) 항체 CDR에 해당하는 DNA 서열을 결정하고 표적 결합 특이성을 결정합니다.
(3) 비인간 CDR을 이식하기 위해 인간 프레임워크 영역(FR)을 선택하여 새로운 항체 유전자를 구축한다.
(4) 최종 인간화 항체의 친화력이나 구조적 무결성 손실을 방지하고 루프를 안정화하기 위한 회복 돌연변이를 생성하기 위해 비인간 CDR과 인간 FR 간의 충돌에 대한 3차원 분석을 수행합니다.
CDR 이식-알파라이프텍
그림 2: 상보성 결정 영역(CDR) 접목의 개략적 개요.

프레임워크 셔플링

프레임워크 셔플링은 파지 디스플레이 기술과 파지 라이브러리 스크리닝 기술을 이용하여 고친화도 항체를 얻는 기술입니다. 인간 항체 중쇄 프레임워크를 암호화하는 올리고뉴클레오티드를 주형으로 사용하고, CDR 영역을 프라이머로 암호화한 후, PCR 증폭을 수행하여 PCR 산물을 변성시켜 단일 가닥 DNA를 얻습니다. 스트렙타비딘으로 정제한 VL 및 VH 유전자의 단일 가닥 DNA를 T4 DNA 리가제와 제한효소를 사용하여 벡터에 재구성하고, 박테리오파지와 함께 배양한 후 박테리오파지에 의해 증폭시켜 파지 디스플레이 라이브러리를 구축합니다. 해당 항원을 사용하여 3회의 스크리닝을 수행하고, 최종적으로 양성 클론을 ELISA 및 기타 방법을 사용하여 검증합니다.
항체 인간화
그림 3: 상보성 결정 영역(CDR) 접목 및 프레임워크(FR) 셔플링 인간화 전략의 개략도. (A) CDR 접목의 주요 과정. (B) FR 셔플링의 주요 과정. (참고 자료: 왕용메이 등, PD-1 마우스 항체의 인간화에서 "프레임워크 셔플링"과 "CDR 이식"의 비교.)

파지 디스플레이

인간화 항체 생산은 박테리오파지 표면에 특정 항체를 발현시키는 방법을 기반으로 하며, 주로 인간 항체 파지 라이브러리를 통해 구축됩니다. 라이브러리는 인간 말초혈액에서 분리한 말초혈액단핵세포(PBMC)를 이용하여 파지 라이브러리를 구축하고, 이 라이브러리에서 해당 서열을 스크리닝합니다. 이 서열은 완전한 인간 서열을 가지고 있지만, 생산된 항체는 scFv, Fab, 나노바디와 같은 항체 단편입니다.

항체 인간화 서비스 워크플로

서비스 단계 품질관리 기준 타임라인
항체 분리 순도 >95% 1-2주
시퀀스 분석 비인간 시퀀스의 정확한 식별 1주일
CDR 접목 및 프레임워크 접목 성공적인 통합 및 표현 2-3주
발현 및 정제 높은 수율과 순도 2-3주
기능 검증 친화성 및 특이성 평가 1주일

항체 인간화 플랫폼의 장점

알파 라이프텍은 인간화 항체에 대한 성공률이 98%가 넘는 성숙한 항체 인간화 플랫폼을 보유하고 있습니다.

궁금한 사항이 있으시면 언제든지 문의해 주시기 바랍니다.

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