압타머 특성 분석 서비스

알파 라이프텍은 오랜 기간 동안 압타머 관련 서비스를 제공해 왔으며, 현재 압타머 합성, SELEX 스크리닝, 고처리량 시퀀싱, 압타머 최적화 및 특성 분석 등 포괄적인 압타머 개발 솔루션을 제공할 수 있습니다. 알파 라이프텍은 SELEX 방법의 장점을 기반으로 다양한 압타머 스크리닝 방법을 개발해 왔습니다.

압타머 특성 분석 소개

친화도 검증

최적화된 압타머의 친화도는 압타머 결합 분석과 같은 관련 기술을 통해 검증되었습니다. 예를 들어 등온 적정 열량계(ITC), 유세포 분석기(FCM), 표면 플라즈몬 공명(SPR), 미세유체학 등이 있습니다. 압타머 친화도는 일반적으로 가역 반응에서 분자 해리 정도를 정량화하는 물리량인 해리 상수(KD)로 표현됩니다. KD 값이 작을수록 복합체가 안정적이며 친화도가 강합니다. 반대로 KD 값이 클수록 복합체가 불안정하고 친화도가 약합니다. 이 단계는 압타머의 성능을 파악하고, 압타머 친화도의 성숙도를 확보하여 실제 응용 분야에서 높은 친화도와 선택성으로 표적 분자에 결합할 수 있도록 하는 데 핵심적인 단계입니다.

그림 1. 압타머 친화도 성숙 과정. 참고 자료:킹혼 AB, 프레이저 LA, 2017.

기능 검증

친화도 검증 외에도 압타머의 기능 검증이 필수적입니다. 여기에는 압타머의 안정성, 특이성, 그리고 특정 환경에서 다른 분자와의 상호작용 검증이 포함됩니다. 기능 검증 결과는 과학 연구 및 산업 응용 분야에서 압타머의 가치에 직접적인 영향을 미칩니다.

특정 검증

경쟁 실험: 다른 유사한 표적들이 존재하는 환경에서 특정 표적에 대한 압타머의 결합 능력을 평가합니다. 압타머가 다른 분자들의 간섭 없이 특정 표적 분자에 특이적으로 결합할 수 있다면, 높은 특이성을 가지고 있음을 나타냅니다.

교차 반응 실험: 압타머가 특정 표적에만 결합하는지 확인하기 위해, 관련성이 있거나 없는 여러 표적에 압타머를 결합시켜 특이성을 검증합니다.

안정성 검증

뉴클레아제 분해 실험: 압타머를 다양한 농도의 뉴클레아제에 노출시키고 분해 정도를 관찰했습니다. 시간 경과에 따른 분해 정도를 비교함으로써 압타머의 항뉴클레아제 분해 능력을 평가할 수 있습니다.

온도 및 시간 안정성 실험: 압타머의 구조적 및 기능적 안정성을 관찰하기 위해 다양한 온도 및 시간 조건에 노출시켰습니다. 이는 압타머의 최적 보관 및 사용 조건을 결정하는 데 도움이 됩니다.

생물학적 활성 식별

일반적으로 적절한 방법은 핵산 압타머의 특정 응용 목표에 따라 선택됩니다.

(1) 분자 수준 테스트: 겔 전기영동, 웨스턴 블롯 등과 같은 분자생물학 기술을 사용하여 압타머가 표적 분자와 결합한 후 형성된 복합체를 검출하거나 압타머에 의해 표적 분자의 발현 수준의 변화를 검출합니다.

(2) 세포 수준 테스트: 세포 배양 기술을 사용하여 압타머를 표적 세포와 함께 배양하여 세포 형태, 증식 및 세포 사멸과 같은 생물학적 변화를 관찰하고 압타머의 생물학적 활성을 평가합니다.

(3) 동물 모델 시험: 적절한 동물 모델에서 핵산 앱타머를 주사 또는 약물 투여로 투여하고 동물의 생리적 지표 및 병리학적 변화를 관찰하여 앱타머의 생체 내 생물학적 활성 및 안전성을 평가합니다.

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