하이브리도마 기술은 단클론 항체를 제조하는 데 사용될 수 있습니다. 면역된 쥐의 비장 세포와 사람 또는 쥐의 골수종 세포를 융합하여 하이브리도마 세포를 형성하고, 이 세포들은 특이 항체를 분비합니다. 이렇게 생성된 쥐 유래 단클론 항체는 효소면역측정법(ELISA), 방사면역측정법(RIA), 면역조직화학, 유세포 분석, 단백질 정제 등과 같은 과학 연구에 활용될 수 있습니다. 단클론 항체 시료에는 복수, 하이브리도마 배양 상층액 등이 있습니다. 하이브리도마 세포를 동물의 복강에 주입하고 동물의 복강 내 생리적 환경을 이용하여 항체를 생산함으로써 얻은 시료를 복수 시료라고 합니다. 동물의 복강에 주입된 하이브리도마 세포는 증식하여 단클론 항체를 분비하고, 이 항체는 복수에 축적될 수 있습니다. 이러한 항체에는 불순물(동물 단백질, 호르몬 등)이 포함될 가능성이 있으므로 정제가 필요합니다. B 림프구의 분비 기능을 기반으로, 하이브리도마 세포를 배양할 때 단클론 항체가 배양액으로 분비되는 경우가 많습니다. 배양액에 단클론 항체가 포함된 액체를 하이브리도마 상층액이라고 합니다. 상층액에 함유된 단클론 항체의 순도는 비교적 높지만, 시험관 내 배양을 통해 얻어지기 때문에 대량 생산을 위해서는 추가적인 정제가 필요합니다.

항체 정제는 복합체로부터 고순도 항체를 분리하는 방법입니다. 현재 항체 정제에는 항체 친화성 정제, 항체 분리 및 정제 등이 널리 사용되며, 주요 방법으로는 단백질 A/G 정제, 이온 교환 크로마토그래피, 겔 여과, 침전, 소수성 상호작용 크로마토그래피 등이 있습니다. 그중에서도 단백질 A/G 친화성 정제는 다양한 항체 정제 응용 분야에서 특히 많이 활용되고 있습니다. 알파 라이프텍(Alpha Lifetech)의 하이브리도마 기술 기반 단클론 항체 제조 공정은 그림 1에 나타나 있습니다.

그림 1. 하이브리도마 기술을 이용한 단클론 항체 제조 공정도.