파지 디스플레이 항체 개발 플랫폼

알파 라이프텍은 항체 발굴 분야에서 풍부한 프로젝트 경험을 바탕으로 다양한 종에 대한 맞춤형 단일클론 및 다중클론 항체 서비스는 물론 항체 라이브러리 구축 및 스크리닝 서비스를 제공합니다. 알파 라이프텍은 고객에게 품질이 보장된 항체 및 재조합 항체 제품과 관련 서비스를 제공하여 효율적이고 특이성이 높으며 안정적인 항체를 생산할 수 있도록 지원합니다. 종합적인 항체 플랫폼과 항체 엔지니어링 기술을 활용하여 항체 준비, 정제, 항체 염기서열 분석 및 검증을 포함한 항체 생산의 전 과정에 걸친 기술 서비스를 제공합니다.

알파 라이프텍은 하이브리도마 기술, 단일 B세포 기술, 파지 디스플레이 기술 등을 기반으로 동물 면역 반응, 파지 디스플레이 항체 라이브러리 구축 및 스크리닝, 항체 시퀀싱, 항체 발현, 항체 정제, 항체 검증, 항체 라벨링 등 다양한 서비스를 제공하는 성숙한 항체 발굴 플랫폼을 보유하고 있습니다. 알파 라이프텍은 표준 생산 라인을 갖추고 있으며, 항체 준비 서비스 외에도 항체 인간화, 항체 친화도 성숙, ADC 약물 설계 및 개발, CAR-T 후속 시퀀싱 설계 등의 지원 서비스도 제공합니다. 또한, 알파 라이프텍은 M13, T4, T7 파지 디스플레이 기술 플랫폼을 기반으로 최대 10^8~10^9개의 항체를 저장할 수 있는 항체 라이브러리를 구축했으며, 양성률, 삽입률, 다양성 모두 90% 이상에 달합니다.

파지 디스플레이 기술

단일클론 항체 생산은 초기에는 하이브리도마 단일클론 항체 기술을 이용하여 마우스 하이브리도마 단일클론 항체를 생산하는 방식으로 이루어졌습니다. 구체적으로, 면역된 마우스의 비장 세포와 인간 또는 마우스의 골수종 세포를 융합하여 특정 하이브리도마 단일클론 항체를 분비하는 하이브리도마 세포를 형성합니다. 마우스 단일클론 항체의 인간화 변형 및 항체에 일정한 인간 면역글로불린 영역을 부여하는 유전자 공학적 변형을 통해 면역원성을 감소시킬 수 있습니다. 단일클론 항체 공학은 생의학 및 임상 분야에서 널리 활용되고 있습니다.

알파 라이프텍은 전임상 연구 프로토콜 설계부터 항체-약물 접합체(ADC) 발굴 및 동물 검증에 이르기까지 원스톱 항체 엔지니어링 서비스를 제공합니다. 항체-약물 접합체(ADC)는 항암제를 암세포에 전달할 수 있습니다. 암세포에 발현되는 특정 표적에 결합한 후, ADC는 세포독성 약물을 암세포 내로 방출합니다. 알파 라이프텍은 또한 고객에게 포괄적인 항체 친화도 성숙 서비스를 제공합니다. 첨단 돌연변이 최적화 및 고처리량 파지 디스플레이 스크리닝 기술을 통해 특정 친화도를 가진 항체를 먼저 선별한 후, 아미노산 돌연변이를 도입하여 다양한 변이체를 생성합니다. 이후, 고친화성 항체를 스크리닝 기법을 사용하여 평가 및 선별합니다. 여러 차례의 최적화 및 구조 분석을 거쳐, 최종적으로 더 높은 친화도와 강력한 특이성을 가진 항체를 얻습니다.

알파 라이프텍은 면역 라이브러리, 천연 라이브러리, 반합성 라이브러리, 합성 라이브러리 등 다양한 유형의 항체 파지 디스플레이 라이브러리를 구축할 수 있습니다. 높은 항체 용량을 기반으로 고특이성 항체를 얻을 수 있습니다. pMECS, pComb3X, pCANTAB 5E 등의 다양한 파지미드 벡터와 TG1 대장균, XL1 Blue, ER2738 등의 균주를 제공합니다. 최대 10^9의 라이브러리 용량과 높은 표적 단편 삽입률을 통해 고객의 요구를 충족하는 항체 스크리닝 조건을 제공합니다. 알파 라이프텍의 파지 디스플레이 기술 기반 항체 준비 서비스 흐름도는 그림 1에 나와 있습니다.

그림 1. 파지 디스플레이 기술을 이용한 단클론 항체 제조 공정도.

파지 디스플레이 항체 생산 워크플로우

단계	서비스 콘텐츠	타임라인
1단계: 동물 면역	(1) 동물 면역 4회, 부스터 면역 1회, 총 5회 면역. (2) 면역 전 음성 혈청을 수집하고 4차 접종에 대해 ELISA를 실시하여 혈청 역가를 검출하였다. (3) 4차 접종의 혈청 항체 역가가 요건을 충족하면 혈액 채취 7일 전에 추가 접종을 실시합니다. 요건을 충족하지 못하면 정기 접종을 계속합니다. (4) 적격성 검사, 혈액 채취 및 단핵구 분리	10주
2단계: cDNA 준비	(1) PBMC 총 RNA 추출(RNA 추출 키트) (2) 고충실도 RT-PCR cDNA 준비(역전사 키트)	1일
3단계: 항체 라이브러리 구축	(1) cDNA를 주형으로 사용하여 2회 PCR을 통해 유전자를 증폭시켰습니다. (2) 파지 구축 및 형질전환: 유전자 접합 파지미드 벡터, TG1 숙주 세균의 전기천공 형질전환, 항체 라이브러리 구축. (3) 식별: 24개의 클론을 무작위로 선택하고 PCR 식별 양성률+삽입률을 계산합니다. (4) 보조 파지 준비: M13 파지 증폭+정제. (5) 파지 디스플레이 라이브러리 복구	3-4주
4단계: 항체 라이브러리 스크리닝 (3회)	(1) 기본 3라운드 스크리닝(고체상 스크리닝): 비특이적 항체를 최대한 제거하기 위한 압력 스크리닝. (2) 단일 클론 증폭 박테리오파지 선택+IPTG 유도 발현+ELISA를 이용한 양성 클론 검출. (3) 모든 양성 클론을 유전자 서열 분석을 위해 선택했습니다.	4-5주