단일클론 항체(mAb)는 항체 약물의 선구자로서, 100종 이상의 단일클론 항체가 암, 감염성 질환, 자체 개발 약물 시장에서 승인을 받았으며, 독보적인 치료적 가치를 보여주고 있습니다. 차세대 항체 개발 기술인 단일 B 세포 항체 기술은 단일 B 세포로부터 항체를 효율적이고 신속하게 분리할 수 있으며, 이는 하이브리도마 및 파지 디스플레이 이후 항체 생산 기술의 획기적인 발전입니다. 단일 B 세포 분류 기술은 토끼, 생쥐, 낙타, 양, 닭 등 다양한 종에 대한 항체 생성에 사용될 수 있습니다. 단일 B 세포 기술은 높은 특이성, 높은 활성, 높은 친화도와 같은 뛰어난 장점을 가지고 있습니다. 알파 라이프텍은 단일 B 세포 분류 플랫폼을 기반으로 스크리닝 시간 단축 및 고품질 항체 확보에 있어 탁월한 이점을 제공합니다. 항원 설계, 합성 및 변형, 동물 면역, 단일 B 세포 농축 스크리닝, 단일 세포 시퀀싱, 고처리량 스크리닝, 발현 및 정제를 제공하며, 고객의 다양한 요구를 충족하기 위해 기능 검증과 같은 원스톱 기술 서비스를 제공합니다.

실험 동물(쥐, 토끼 등)의 면역 자극을 위해 적절한 항원을 선택하여 해당 항원에 대한 특정 항체를 생산할 수 있도록 합니다.

동물 면역은 항체 생성의 초기 단계입니다. 동물 면역은 생물체 자체의 체액성 면역 반응 기전을 이용하는 것으로, 항원의 지속적인 자극을 통해 동물이 강력한 면역 반응을 일으키고, 이후 특정 항원에 대한 특정 항체를 분비합니다.

B세포는 면역 동물의 말초혈액, 비장 또는 림프절에서 분리되었습니다. 이 B세포는 면역학적으로 자극되어 특정 항원에 대한 항체를 생성합니다.

물리적 또는 화학적 방법(밀도 구배 원심분리, 자기 비드 분리 등)을 통해 B 세포를 풍부하게 하고, 불순물 세포를 제거하여 B 세포의 순도를 높이고 후속 분리의 효율성을 높입니다.

형광 활성화 세포 분류(FACS), 자기 세포 분리(MACS), 미세유체 세포 분류기(MCS) 또는 기타 고처리량 스크리닝 기술을 항원 특이적 표지와 결합하여 농축된 B 세포에서 개별 B 세포를 스크리닝하여 표적 항체를 생성할 수 있습니다.

혼합된 B 세포 집단에서 단일 B 세포를 분리할 경우, 단일 세포 시퀀싱 기술을 이용하여 항체 유전자를 시퀀싱하고 분석하여 중쇄 가변 영역(VH)과 경쇄 가변 영역(VL)의 DNA 서열 정보를 얻어야 합니다. 단일 세포 시퀀싱 기술은 주로 단일 세포 분리, 세포 내 핵산 증폭, 그리고 시퀀싱 분석의 세 단계로 구성됩니다. 단일 세포 시퀀싱의 원리는 분리된 단일 세포의 미량 전체 유전체 DNA 또는 RNA를 증폭하여 고처리량 시퀀싱을 위한 높은 커버리지를 가진 완전한 유전체 또는 전사체를 얻는 것입니다.

고처리량 스크리닝을 통해 수천 개의 B세포 항체 유전자 서열을 한 번에 확보하여 항체 발견 속도를 크게 높일 수 있습니다. 이러한 서열 정보는 항체 라이브러리 구축 및 스크리닝에 활용될 수 있습니다.

그림 2. 단일 B 세포 포획, 라이브러리 구축, 고처리량 스크리닝 및 시퀀싱의 개략도.(참고 출처: 대규모 병렬 단일 세포 B 세포 수용체 시퀀싱을 통해 다양한 항원 반응성 항체의 신속한 발견이 가능해졌습니다..）

(1)재조합 단백질: ≥2.5mg, 단백질 순도 >85%, 단백질 분자량 10 kDa 초과, 가용성 단백질 농도 0.5~5mg/mL. 항원 친화도 정제가 필요한 경우, 재조합 단백질 10mg을 추가로 첨가해야 합니다.

(2)폴리펩타이드 및 소분자: 순수 펩타이드 ≥10 mg, 펩타이드 순도 >90%, AA 최소 10개, KLH/BSA/OVA 또는 기타 운반체 단백질 결합; 소분자는 사전에 구조 평가가 필요합니다.