항체 의약품의 선구자인 단클론 항체(mAb)는 100개 이상의 항체가 암, 감염성 질환 치료에 승인되어 자체 개발 시장을 형성하며 독보적인 치료 효과를 입증해 왔습니다. 차세대 항체 개발 기술인 단일 B세포 항체 기술은 단일 B세포에서 항체를 효율적이고 신속하게 분리할 수 있어 하이브리도마 및 파지 디스플레이 이후 항체 생산 기술의 획기적인 발전입니다. 단일 B세포 분리 기술은 토끼, 쥐, 낙타, 양, 닭 등 다양한 동물 종에 대한 항체 생산에 활용될 수 있으며, 높은 특이성, 활성, 친화도 등의 뛰어난 장점을 가지고 있습니다. 알파라이프텍은 단일 B세포 분리 플랫폼을 기반으로 선별 시간을 단축하고 고품질 항체를 확보하는 데 강점을 가지고 있습니다. 항원 설계, 합성 및 변형, 동물 면역 분석, 단일 B세포 농축 선별, 단일 세포 시퀀싱, 고처리량 선별, 발현 및 정제, 기능 검증 등 원스톱 기술 서비스를 제공하여 고객의 다양한 요구를 충족합니다.

실험 동물(쥐, 토끼 등)에게 적절한 항원을 선택하여 면역 자극을 실시하면, 동물이 해당 항원에 대한 특이 항체를 생성할 수 있습니다.

동물 면역은 항체 생성의 초기 단계입니다. 동물 면역은 생물체 자체의 체액성 면역 반응 메커니즘을 이용하는 것으로, 항원에 대한 지속적인 자극을 통해 동물은 강력한 면역 반응을 생성하고 특정 항원에 대한 특이 항체를 분비합니다.

면역 반응을 유도한 동물의 말초 혈액, 비장 또는 림프절에서 B 세포를 분리했습니다. 이 B 세포들은 특정 항원에 대한 항체를 생성하도록 면역학적으로 자극되었습니다.

밀도 구배 원심분리, 자성 비드 분리 등과 같은 물리적 또는 화학적 방법을 통해 B세포를 농축하고, 불순물 세포를 제거하여 B세포의 순도와 후속 분리 효율을 향상시킬 수 있다.

형광활성세포분류(FACS), 자기세포분리(MACS), 미세유체세포분류기(MCS) 또는 기타 고처리량 스크리닝 기술을 항원 특이적 표지법과 결합하여 농축된 B세포에서 개별 B세포를 선별하여 표적 항체를 생산할 수 있다.

혼합된 B 세포 집단에서 단일 B 세포를 분리할 때, 해당 세포의 항체 유전자를 단일 세포 시퀀싱 기술을 이용하여 시퀀싱하고 분석하여 중쇄 가변 영역(VH)과 경쇄 가변 영역(VL)의 DNA 서열 정보를 얻어야 합니다. 단일 세포 시퀀싱 기술은 주로 단일 세포 분리, 세포 내 핵산 증폭, 그리고 시퀀싱 분석의 세 단계로 구성됩니다. 단일 세포 시퀀싱의 원리는 분리된 단일 세포의 미량의 전체 게놈 DNA 또는 RNA를 증폭하여 높은 커버리지를 갖는 완전한 게놈 또는 전사체를 얻어 고처리량 시퀀싱을 수행하는 것입니다.

고처리량 스크리닝을 통해 수천 개의 B 세포에서 항체 유전자 서열을 한 번에 얻을 수 있어 항체 발견 속도를 크게 향상시킬 수 있습니다. 이러한 서열 정보는 항체 라이브러리 구축 및 스크리닝에 활용될 수 있습니다.

그림 2. 단일 B 세포 포획, 라이브러리 구축, 고처리량 스크리닝 및 시퀀싱의 개략도.(참고 자료:) 대규모 병렬 단일 세포 B 세포 수용체 시퀀싱을 통해 다양한 항원 반응성 항체를 신속하게 발견할 수 있습니다..)

(1)재조합 단백질: ≥2.5 mg, 단백질 순도 >85%, 단백질 분자량 >10 kDa, 가용성 단백질 농도 0.5~5mg/mL. 항원 친화성 정제가 필요한 경우, 추가로 10 mg의 재조합 단백질이 필요합니다.

(2)폴리펩타이드 및 소분자: 순수 펩타이드 ≥10mg, 펩타이드 순도 >90%, 10개 이상의 아미노산, KLH/BSA/OVA 또는 기타 운반 단백질 결합; 소분자는 사전에 구조적 평가가 필요합니다.