안정적인 세포주 구축 서비스
알파 라이프텍은 오랜 기간 동안 안정적인 세포주 구축 공정 개발 분야에 전념해 왔습니다. 300종 이상의 종양 세포 및 원발성 세포를 포함하는 완벽한 안정 세포주 구축 공정 플랫폼을 구축하여 과학 연구 또는 프로젝트 연구에 소요되는 시간을 절약하고 후속 생산을 용이하게 하는 안정적인 세포주를 제공합니다. 또한 알파 라이프텍은 균주 공정 개발, 균주 선별, 균주 구축, 재조합 단백질 및 항체 생산과 같은 서비스를 제공하여 신약 개발을 위한 연구 기반을 마련해 드립니다.
알파 라이프텍은 렌티바이러스 감염 세포 플랫폼을 보유하고 있으며, 이를 통해 다양한 유형의 세포 안정형 유전자변환 균주에 대한 실험 과정을 맞춤화할 수 있습니다. 당사는 유전자 녹아웃 기술을 이용하여 CRISPR/Cas9 녹아웃 세포주를 구축했습니다. 유전자 과발현 및 유전자 침묵 기술을 사용하여 유전자변환 균주를 안정화했습니다. 유전자 부위 특이적 삽입을 통해 정점 삽입 세포주 구축 서비스를 완성합니다.
안정적인 세포주 구축 소개
안정 세포주란 외래 유전자를 숙주 세포 게놈에 통합하여 외래 유전자가 숙주 세포에서 장기간 안정적으로 발현될 수 있도록 만든 세포주를 말합니다. 원리는 외래 유전자를 특정 저항성을 가진 벡터로 축소하고, 숙주 세포에 형질전환시켜 외래 유전자를 숙주 염색체에 통합한 후, 벡터에 포함된 저항성 유전자를 선별하여 실험 요구 사항에 맞는 표적 단백질의 고발현 또는 표적 유전자의 안정적인 억제를 나타내는 안정 세포주를 얻는 것입니다.
알파 라이프텍은 독립적인 보관 시설과 완벽한 세포 냉동 및 보관 관리 시스템을 갖추고 있으며, 300가지가 넘는 종양 세포 및 원시 세포를 제공하여 고객의 과학 연구에 전념하고 있습니다.
안정적인 세포주 구축 과정

안정적인 세포주 구축 방법
안정적인 세포주 구축 방법에는 렌티바이러스 매개, 트랜스포존 매개, CRISPR/Cas9 매개 및 플라스미드 스크리닝이 포함됩니다.
렌티바이러스 매개 형질전환은 안정적인 세포주를 구축하는 데 가장 일반적으로 사용되는 방법 중 하나입니다. 이 방법은 거의 모든 유형의 세포를 감염시키고 유전 물질을 숙주 세포 게놈에 통합하여 장기간 안정적인 발현을 가능하게 한다는 장점이 있습니다. 그러나 이 시스템에는 몇 가지 한계가 있으며, 렌티바이러스의 패키징 용량이 제한적이어서 전사 영역이 긴 유전자의 전사에는 적합하지 않습니다.
렌티바이러스 매개 방식과 비교했을 때, 트랜스포존 매개 방식은 유전자 크기에 제한이 없으며, 기술의 지속적인 최적화를 통해 트랜스포존 삽입 효율이 여러 배 향상되었습니다. 단점으로는 특정 일차 세포에 대한 제약이 있고, 일부 세포는 형질전환이 어렵다는 점입니다.
CRISPR/Cas9 매개 유전자 편집 기술은 CRISPR 유전자 녹아웃과 CRISPR 유전자 노크인으로 구성됩니다. CRISPR 유전자 녹아웃은 DNA 이중 가닥을 절단하여 표적 유전자의 기능을 상실시키는 것을 의미합니다. CRISPR 유전자 노크인은 외부 DNA 조각을 특정 유전자에 삽입하는 것으로, 결함이 있는 유전자를 복구하거나 새로운 기능성 유전자를 도입하는 데 사용될 수 있습니다.
플라스미드 스크리닝은 가장 원시적인 세포주 구축 방법으로, 목표 플라스미드를 세포에 성공적으로 형질전환시키고 해당 저항성을 이용하여 장기간 스크리닝하는 것만으로 안정적인 세포주를 얻을 수 있습니다.
다양한 안정 세포주를 구축하는 방법
| 중재 방법 | 렌티바이러스 시스템 | 트랜스포존 시스템 | CRISP/Cas9 매개 | 플라스미드 스크리닝 |
|---|---|---|---|---|
| 수송 용량 | 5kb | 10kb | 5kb | 10kb |
| 매개된 효율성 | 높은 | 정상 | 정상 | 낮은 |
| 타임라인 | 1-2주 | 3-4주 | 3-4주 | 4-6주 |
| 이점 | 빠르고 효율적 | 안보와 안정 | 고정점 적분 | 더 낮은 비용 |
| 결점 | 생물안전 위험 | 발현량 정상 | CAS9 유전자 도입은 어렵고 비용이 많이 듭니다. | 낮은 효율성과 불안정성 |
안정적인 세포주 구축의 기술적 어려움
공정 규모 확장에 앞서, 소형 바이오리액터를 사용하여 가스, 배양액 시스템, 세포에 가해지는 최소 유체역학적 스트레스 등과 같은 매개변수를 결정함으로써 규모 간 배양 호환성을 확보합니다. 그러나 해당 공정 매개변수가 결정되었다 하더라도 생산 현장의 대형 바이오리액터 환경은 고르지 않아 실패하기 쉽습니다. 알파 라이프텍은 다년간의 공정 규모 확장 배양 경험을 바탕으로 오류를 일정 수준까지 방지하고 위험을 줄여 성공률을 크게 향상시킬 수 있습니다. 동시에 알파 라이프텍은 사용되는 원료 및 배지 배치의 일관성을 보장하여 세포 배양 공정 규모 확장의 실패율을 낮춥니다.
알파 라이프텍은 생산 과정 중 세포주의 안정성을 보장하는 포괄적인 안정 세포주 공정 개발 플랫폼을 보유하고 있습니다. 또한 고객의 요구에 맞춘 맞춤형 서비스도 제공합니다.
안정적인 세포주 구축 서비스 콘텐츠
| 콘텐츠 | 타임라인 |
| 고객이 제공한 HEK293 세포주를 배양합니다. | 3-5 개월 |
| sgRNA-Cas9 플라스미드 구축 (스크리닝 유전자 G418 포함). | |
| sgRNA-Cas9와 복구 DNA 템플릿을 HEK293 세포주에 함께 도입하였다. | |
| 단일클론 세포주 스크리닝(GFP 유전자) 노크인 양성 클론). | |
| 제공 내용: 벡터, GFP 유전자 삽입 변이주, 염기서열 분석 결과, 모든 원시 데이터, 실험 보고서 |

세포는 추적될 수 있다
해당 세포는 ATCC와 같은 전문 기관에서 구입하며, 귀사의 등록 요건을 충족한다는 증빙 자료를 제공할 수 있습니다.

생산상의 이점
알파 라이프텍은 다양한 개발 요구를 충족할 수 있는 오랜 경험을 보유하고 있습니다. 당사는 다양한 종류의 세포, 독립적인 보관 시설, 완벽한 세포 동결 공정 및 보관 관리 시스템을 갖추고 있습니다.

프로젝트 품질 관리
각 프로젝트는 엄격한 품질 관리 과정을 거쳐 고객에게 높은 기준을 충족하는 세포주를 제공합니다.

기술적 우위
세포 공학 분야에서 풍부한 경험을 가진 엔지니어들 외에도, 당사는 반응기 조건을 개선하고 공정 매개변수를 수정하기 위한 첨단 기술 진화 알고리즘을 보유하고 있습니다.
궁금한 점이 있으시면 언제든지 편하게 문의해 주세요.
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2018년 7월 16일 

