Teknolojiya nîşandana fajê ew e ku gena hedef a biyanî têxe nav pozîsyona taybetî ya proteîna kapsîd a fajê, û gena biyanî li ser rûyê fajê bêyî ku bandorê li fonksiyona normal a fajê bike, îfade bike. Piştî çend dewreyên pişkinînê, di dawiyê de proteîna hedef bi taybetmendiyek xurt û çalakiya biyolojîkî ya bilind hat bidestxistin.

Pirtûkxaneyên antîkorên bi kapasîteya bilind dikarin bi karanîna vê teknolojiyê werin çêkirin. Çerxa pişkinînê kurt e, pêvajoya xebitandinê rasterast e, û rêza serîlêdanan berfireh e, ku rê dide destnîşankirina rêzikên çêtirîn ji bo peptîd an proteînên hedefgirtî. Di serîlêdanên têkildarî vîrusê de, lêkolîner dikarin bi pişkinîna pirtûkxaneyên antîkorên mezin antîkorên ku bi epîtopên vîrusî yên krîtîk ve girêdidin kifş bikin. Ev pêvajo dikare rê li ber ketin, dubarekirin, an mekanîzmayên dûrketina ji pergala parastinê ya vîrusan bigire, bi vî rengî bingehek ji bo dermankirina nexweşiyê ava bike.

Teknolojiya nîşandana fajê ji teknolojiya hîbrîdomê, ku bi hilberîna mîqdarek piçûk a antîkoran li dijî îmûnojenên taybetî ve sînordar e, berfirehtir tê bikar anîn. Berevajî vê, teknolojiya nîşandana fajê dikare pirtûkxaneyek tevahî ya antîkoran pêşkêş bike ku ji cureyên cûrbecûr ên parastinê hatine wergirtin.

Teknolojiya nîşandana fajê xwedî gelek sepanên cûrbecûr e, di nav de ceribandina wergirên mîkroorganîzmayên nexweşî, lêkolîna têkiliyên proteînan, şopandina veguhestina sînyalê di navbera şaneyan de, teşhîskirina nexweşiyên heywanan, û pêşxistina vakslêdanan, û warên din.

Teknolojiya nîşandana fajê gelek avantaj pêşkêş dike û dikare di warên cûrbecûr de were sepandin. Lêbelê, dijwarîya sereke di pêşxistina antîkorên rekombinant de bi karanîna rêbaza nîşandana fajê tevlihevî û lêçûna têkildarî pêvajoyê ye. Ev rêbaz yekkirina teknîkên biyolojiya molekulî, di nav de mutasyon, klonkirin û îfadekirin, digel analîzên îmmunolojîk, biyokîmyayî û biyofîzîkî ji bo destnîşankirin û taybetmendiya antîkorên xwestî hewce dike.

Pêşkêşkirina antîjenê girêdanek pir girîng e. Rêbazên pêşkêşkirina antîjenê bi giranî pêşkêşkirina antîjena rasterast a pêçayî, pêşkêşkirina antîjena nerasterast a pêçayî, pêşkêşkirina antîjenê bi rêya ceribandina tevahiya şaneyê, pêşkêşkirina antîjenê bi rêya lîpozom, dîskên nano-fosfolîpîd û VLP-yan vedihewîne.

Rêbaza pêçandina rasterast nisbeten hêsan e, lê şeklê antîjenê bi hêsanî tê guhertin, û operasyona pêçandina nerasterast tevlihev e, lê ew dikare şeklê antîjenê biparêze û karîgeriya pêşkêşkirinê baştir bike. Lêkolîna hucreyê dikare dîmena rastîn di vivo de simul bike, lê pirsgirêkek girêdana ne-taybet heye. Dîska nano-fosfolîpîdê xwedan mezinahiyek piçûk, karîgeriya radestkirinê ya bilind û aramiyek baş e; VLP bi antîjenê re tê hev kirin an jî bi antîjenê ve tê pêçandin, ku xwedan îmmunogenîte û ewlehiya baş e, û dikare bersivek îmmûn a bihêz bide destpêkirin.

Eger konsantrasyon pir kêm be, îhtîmala girêdana bi fajê re dê kêm bibe, û di encamê de karîgeriya lêkolînê dê kêm bibe. Berevajî vê, konsantrasyonek pir zêde dikare îhtîmala girêdana ne-taybetî zêde bike, sînyala paşxaneyê bilind bike, û nasîna klonên erênî asteng bike.

Ji bo dûrketina ji germahiya bilind, asîd û alkaliyên bihêz, rêbaza sabîtkirina nerm dikare were bikar anîn. Ji bo kêmkirina zirara li avahiya antîjenê, rêbaza pêçandina nerasterast û pergala biyotîn-streptavidîn hatin bikar anîn. Ger antîjen proteînek parzûnê be, ew dikare li ser rûyê şaneyên saxlem were nîşandan an jî ji bo simulasyona jîngeha parzûnê, wekî nano-dîskê, were bikar anîn da ku şêwaza proteîna parzûnê ya xwezayî biparêze.

Ji bilî ceribandinên rûtîn ên wekî ELISA, Western Blotting (WB), û Immunofluorescence (IF), teknîkên tespîtkirinê yên Surface Plazmon Resonance (SPR) û Bio-Layer Interferometry (BLI) dikarin werin bikar anîn da ku pêvajoyên girêdan û veqetandina antîkor û antîjenan di wextê rast de werin şopandin, ku rê dide destnîşankirina parametreyên afînîteyê û kînetîk.

Nîşandana fajê dikare ji bo çêkirina antîkorên monoklonal ên afînîteya bilind ji bo rêzek fireh ji cureyên hilberînerên antîkoran were bikar anîn, di nav de mirov, mişk, mişk, kêvroşk, mirîşk, deve, alpaka, ga, kûçik, pez, meymûn û masiyên sor.

Teknolojiya avakirina pirtûkxaneyên antîkorên mişk baş-damezrandî, bi arzanî, û xwedî demek ceribandinê ya kurt e, ku ew ji bo ceribandina pêşîn a antîkor û lêkolîna bingehîn guncan dike. Antîkorên kergoşkan girêdan û taybetmendiyek xurt nîşan didin, bi rêzek naskirina epîtopê ya berfirehtir li gorî antîkorên mişk. Antîkorên mirovan dikarin rasterast ji pirtûkxaneyên antîkorên mirovan werin wergirtin, bi vî rengî reaksiyonên potansiyel ên parastinê yên ku dibe ku dema antîkorên heterolog ji laşê mirovan re têne dayîn çêbibin, ji holê radibin. Ev rêbaz di lêkolîn û pêşkeftina dermanan de, nemaze di afirandina antîkorên dermankirinê de, xwedî nirxek girîng e.

Îmûnojenên ajalan bi gelemperî wekî antîjena proteîn, antîjena polîpeptîd, antîjena asîda nukleîk û antîjena girêdayî patojenan têne dabeş kirin, ku di nav wan de antîjena girêdayî patojenan antîjena vîrusê (perçika vîrusê ya temam, proteîna vîrusê, proteîna ne-avahî ya vîrusê, hwd.), antîjena bakterî (ekstrakta bakterî ya temam, pêkhateya dîwarê şaneyê, proteîna veşartî, toksîn, hwd.) û antîjena parazît hene.

Bi guhertina antîjenên îmûnî bi proteînên rekombinant û guhertina perçeyên vîrusê yên agirkuj bi proteînên avahîsaziyê yên vîrusan, îmûnojenan sererast bikin. Sêwirana ceribandinê sererast bikin û doza îmûnî biguherînin.

Îmûnojenîkîtî dikare bi girêdana antîjenan bi proteînên hilgir re, wek albûmîna seruma ga, were zêdekirin. Wekî din, adjuvantên îmûnî, di nav de adjuvanta Freund û adjuvanta aluminiumê, dikarin werin bikar anîn da ku dema rûniştinê di vivo de dirêj bikin û çalakkirin û zêdebûna şaneyên îmûnî teşwîq bikin, bi vî rengî îmûnojenîkîtî baştir bikin.

Pirtûkxaneya antîkorên fajê berhevokeke antîkorên fajê yên cihêreng e ku bi komkirina komeke temam a genên herêma guhêrbar ji antîkoran di nav vektorên fajê de û îfadekirina wan li ser rûyên fajan tê çêkirin. Ev pêvajo dibe sedema avakirina pirtûkxaneyeke antîkorên fajê.

Pêvajoya giştî ya nîşandana fajê çend gavên sereke dihewîne: derxistina şaneyên mononukleer ên xwîna periferîk (PBMC) ji heywanên îmûnîzekirî, veqetandina RNAya tevahî û veguheztina wê bo DNAya temamker (cDNA), zêdekirina gena hedef bi karanîna teknolojiya reaksiyona zincîra polîmerazê (PCR), klona gena hedef bo vektorek fajê, û veguherandina vektor bo şaneyek mêvandar ji bo îfadeyê. Ev pêvajo dibe sedema avakirina pirtûkxaneyek nîşandana fajê, ku dikare bi lez antîkorên bi afînîteya bilind nas bike. Paşê, ev pirtûkxane dikare wekî çavkaniyek hêja ji bo pêşxistina vakslêdanan, dermanên dermankirinê, û reagentên teşhîsê xizmet bike.

Li gorî çavkaniya pirtûkxaneya antîkoran, pirtûkxaneyên antîkorên faj dikarin wekî pirtûkxaneyên antîkorên fajên îmûn û pirtûkxaneyên antîkorên fajên xwemalî werin dabeş kirin. Cûdahiya sereke di navbera van her du celeban de ew e ku gelo heywan hatine vakslêdan kirin an na. Wekî din, pirtûkxaneyên antîkorên xwemalî dikarin bi rêya nîv-sentez an sentezê werin çêkirin.

Ji bo nirxandina kalîteya pirtûkxaneya antîkoran du nîşaneyên sereke hene: kapasîteya hilanînê û cihêrengî. Kapasîteyeke hilanînê ya mezin, digel cihêrengiya bilind, ceribandina bi bandor a antîkoran bi hem girêdan û hem jî taybetmendiyek bilind misoger dike.

Di pêvajoya paqijkirina biyolojîk de, pirtûkxaneya nîşandanê bi hedefên sabît re tê înkubasyonkirin û dûv re bi berfirehî tê şuştin da ku fajên ne-reaktîf werin rakirin. Konjugat bi gelemperî bi karanîna çareseriyek asîdî an jî xwêya bilind têne elutekirin û paşê di hucreyên mêvandar ên guncaw de ji bo dewlemendkirinê têne zêdekirin. Piştî 3 heta 5 dewreyên pişkinînê, antîkorên bi girêdana bilind têne bidestxistin.

Rêbazên pişkinîna fajan bi giranî pankirina qonaxa zexm, pişkinîna qonaxa şil, û pişkinîna li ser bingeha şaneyan vedihewîne. Hilbijartina rêbazek pişkinînê ya guncaw divê taybetmendiyên molekulên hedef, armancên pêvajoya pişkinînê, û jîngeha laboratîfê li ber çavan bigire.

Lêkolîna erênî rêbaza herî bingehîn e ji bo lêkolîna antîkorên fajê yên ku bi proteînên hedef ve girêdidin. Lêkolîna neyînî ji bo jiholêrakirina antîkorên ne-taybetî xizmet dike. Di dema pêvajoya lêkolîna antîkorên fajê de, antîkorên ne-taybetî dikarin ji ber destwerdana ji etîketa antîjena hedef, materyalan, an antîjenên din ên bi dişibiniyên avahîsaziyê yên bi antîjena hedef ve werin nas kirin. Di rewşên weha de, lêkolîna neyînî dikare bandora pêvajoya lêkolînkirinê zêde bike.

Rêbazên ji bo verastkirina antîkoran bi gelemperî ELISA, Western Blotting (WB), flow cytometry, immunoprecipitation (IP), immunofluorescence (IF), immunohistochemistry, û gelek teknîkên din ên ceribandinê vedihewîne. Alpha Lifetech di tespîtkirina antîkoran de xwedî ezmûnek berfireh e û tîmek ceribandinê ya profesyonel heye, ku bandora antîkoran di ceribandinên paşîn de misoger dike.