Аптамердин мүнөздөмөсүн талдоо кызматы

Alpha Lifetech көп жылдардан бери адаптерлерге байланыштуу кызматтарды көрсөтүп, адаптерлерди иштеп чыгуу жана талдоо боюнча комплекстүү кызматтарды сунуштайт.

БИЗ МЕНЕН БАЙЛАНЫШЫҢЫЗ

Аптамердин мүнөздөмөсүн талдоо кызматы

Alpha Lifetech көп жылдардан бери аптамерге байланыштуу кызматтарды көрсөтүп келет жана учурда аптамер синтези, SELEX скрининги, жогорку өндүрүмдүүлүктөгү секвенирлөө жана аптамерди оптималдаштыруу жана мүнөздөө сыяктуу комплекстүү аптамер иштеп чыгуу схемаларын камсыздай алат. Аптамерлерди скринингдөө үчүн SELEX ыкмасынын артыкчылыктарына таянып, Alpha Lifetech аптамерлерди скринингдөө үчүн көбүрөөк ыкмаларды кеңейтти.

Аптамердин мүнөздөмөсүн талдоо менен тааныштыруу

Туугандыкты текшерүү

Аптамердин оптималдаштырылган жакындыгы аптамер байланыштыруу анализинин тиешелүү ыкмалары менен текшерилген. Мисал катары изотермикалык титрлөө калориметриясы (ITC), агым цитометриясы (FCM) жана беттик плазмон резонансы (SPR), микрофлюидикалар ж.б. кирет. Аптамердин жакындыгы адатта диссоциация константасы (KD) менен көрсөтүлөт, бул физикалык чоңдук кайтарымдуу реакцияда молекулярдык диссоциациянын даражасын сандык жактан аныктоо үчүн колдонулат. KD мааниси канчалык кичине болсо, комплекс ошончолук туруктуу, башкача айтканда, жакындык ошончолук күчтүү болот; тескерисинче, KD мааниси канчалык чоң болсо, комплекс ошончолук туруксуз жана жакындык алсыз болот. Бул кадам аптамердин иштешин аныктоонун ачкычы болуп саналат, аптамердин жакындыгынын жетилүүсүн камсыздайт жана практикалык колдонмолордо максаттуу молекулага жогорку жакындык жана селективдүүлүк менен байланыша алат.

1-сүрөт. Аптамердин аффиндүүлүгүнүн жетилүү процесси. Шилтеме булагы:Кингхорн AB, Фрейзер, LA, 2017.

Функцияны текшерүү

Аффиндүүлүктү текшерүүдөн тышкары, аптамердин функциясын текшерүү керек. Буга аптамердин туруктуулугун, өзгөчөлүгүн жана белгилүү бир чөйрөдөгү башка молекулалар менен өз ара аракеттенүүсүн текшерүү кирет. Функционалдык текшерүүнүн жыйынтыктары илимий изилдөөлөрдө жана өнөр жайлык колдонмолордо аптамерлердин баалуулугуна түздөн-түз таасир этет.

Атайын текшерүү

Атаандаштык эксперимент: Аптамердин белгилүү бир бутага байланышуу жөндөмү башка ушул сыяктуу буталардын катышуусунда бааланат. Эгерде аптамер башка молекулалардын кийлигишүүсүз бута молекуласына атайын байланыша алса, бул анын жогорку спецификалуулугун көрсөтөт.

Кайчылаш реакция эксперименти: Аптамер белгилүү бир бутага гана байланып жатканын текшерүү үчүн бир катар байланыштуу же байланышпаган буталарга байланат, ошентип анын өзгөчөлүгүн текшерет.

Туруктуулукту текшерүү

Нуклеазанын деградациясы боюнча эксперимент: Аптамерлерге ар кандай концентрациядагы нуклеазалар таасир этип, алардын деградациясы байкалган. Ар кандай убакыт чекиттериндеги деградация даражасын салыштыруу менен, аптамердин антинуклеаза деградация жөндөмүн баалоого болот.

Температура жана убакыттын туруктуулугу боюнча эксперимент: Аптамердин структуралык жана функционалдык туруктуулугун байкоо үчүн ал ар кандай температура жана убакыт шарттарында жайгаштырылган. Бул аптамерлерди сактоо жана колдонуунун оптималдуу шарттарын аныктоого жардам берет.

Биологиялык активдүүлүктү аныктоо

Тийиштүү ыкма, адатта, нуклеин кислотасынын аптамеринин колдонуу максатына ылайык тандалат.

(1) Молекулярдык деңгээлдеги тестирлөө: Аптамер максаттуу молекула менен айкалышкандан кийин пайда болгон комплекстерди аныктоо же аптамерден улам максаттуу молекуланын экспрессия деңгээлиндеги өзгөрүүлөрдү аныктоо үчүн гель электрофорези, вестерн-блот ж.б. сыяктуу молекулярдык биология ыкмаларын колдонуу.

(2) Клетка деңгээлин текшерүү: Клетка өстүрүү технологиясын колдонуу менен, аптамерлер клетка морфологиясы, көбөйүшү жана апоптоз сыяктуу биологиялык өзгөрүүлөрдү байкоо жана аптамерлердин биологиялык активдүүлүгүн баалоо үчүн максаттуу клеткалар менен инкубацияланат.

(3) Жаныбарлардын моделин сыноо: Тиешелүү жаныбарлардын моделдеринде нуклеин кислотасынын аптамерлери инъекция же дары-дармек берүү жолу менен берилет, ал эми жаныбарлардын физиологиялык көрсөткүчтөрү жана патологиялык өзгөрүүлөрү аптамерлердин биологиялык активдүүлүгүн жана коопсуздугун in vivo баалоо үчүн байкалат.