1960-жылы биспецификалык антителолор концепциясы сунушталган. Биспецификалык антителолор, ошондой эле биспецификалык моноклоналдык антителолор деп да аталат, генетикалык инженерия технологиясын колдонуу менен жасалма жол менен синтезделген антителолор. Инженердик жасалма антитело катары, биспецификалык антителолор адатта IgG субклассына кирет жана CD3 суббирдигине багытталган антигенди байланыштыруучу фрагментти камтыйт. Биспецификалык антителолордо бир эле учурда эки башка антигенди же антигендин эки башка эпитопун байланыштырып жана тааный турган эки спецификалык антигенди байланыштыруучу жер бар. Моноклоналдык антителолорго салыштырмалуу, биспецификалык антителолор кошумча спецификалык антигенди байланыштыруучу жерге ээ, ошондуктан күчтүү спецификалык жана бутага алуу жөндөмүнө ээ, бул шишик клеткаларын так бутага алып, максаттан тышкаркы уулуулукту азайта алат. Биспецификалык антителолор бир эле учурда бир нече биологиялык функцияларды аткара алат, мисалы, иммундук клеткаларды тартуу, сигнал берүү жолдорун бөгөттөө жана шишик клеткаларын түздөн-түз өлтүрүү. Алгачкы биспецификалык антителолор негизинен химиялык конъюгация же клеткалардын биригиши аркылуу даярдалган, бирок бул ыкма кокустук айкалыштан жана максаттуу айкалышты бөлүп алуудагы кыйынчылыктардан улам жай өнүккөн болушу мүмкүн. Гендик инженерия технологиясынын тынымсыз өнүгүшү менен көптөгөн жаңы технологиялык платформалар, мисалы, тешиктердеги түйүндөр (KIH), CrossMab, DVD Ig ж.б. иштелип чыкты. Бул платформалар оор жана жеңил чынжырлардын дал келбестиги сыяктуу көйгөйлөрдү натыйжалуу чечип, биспецификалык антителолордун бирдейлигин жана өндүрүмдүүлүгүн жакшыртат.

Биспецификалык антителолорду өндүрүүнүн негизги ыкмаларына химиялык байланыш, төрт булактуу гибридома жана генетикалык инженерия антителолорун даярдоо кирет. Алардын арасында химиялык байланыш ыкмасы эки бүтүн IgG же эки F (ab') 2 антитело фрагменттерин фталимид жана дитиоацилбензой кислотасы сыяктуу химиялык байланыш агенттерин колдонуп, биспецификалык антителолорго бириктирет. Бул ыкма жөнөкөй жана колдонууга оңой, бирок ал антиген байланышуучу жерге зыян келтириши, антитело активдүүлүгүн төмөндөтүшү мүмкүн жана байланыш агентинин өзү да белгилүү бир деңгээлде канцерогендик касиетке ээ. Төрт булактуу гибридома ыкмасы тиешелүү чычкан IgG экспрессиялоо үчүн эки башка гибридома клетка линияларынан соматикалык клеткалардын биригишине негизделген. Гендик инженерия технологиясы аркылуу антителолорду биспецификалык антителолорду түзүү үчүн генетикалык жактан модификациялоого болот. Эки башка моноклоналдык антитело курулуп, эки антителонун Fab фрагменттери же оор чынжырлуу жана жеңил чынжырлуу өзгөрмөлүү аймактары өзүнчө бөлүнгөн. Кайчылаш байланыш реакциясы же чынжырлуу рекомбинация технологиясы аркылуу эки фрагмент биспецификалык антитело түзүү үчүн бириктирилген. Гендик инженерия технологиясынын татаалдыгы салыштырмалуу жогору болгону менен, ал учурда антителолордун түзүлүшүн жана функциясын тууралоо үчүн биспецификалык антителолорду өндүрүүнүн эң көп колдонулган ыкмасы болуп саналат. Биспецификалык антителолорду долбоорлоодо антителолордун кайчылаш реактивдүүлүгү принциби колдонулушу мүмкүн, бирок антителолордун кайчылаш реактивдүүлүгү спецификалык эмес реакцияларды жаратышы мүмкүн, андыктан биспецификалык антителолорду долбоорлоону практикалык колдонууда, мисалы, биспецификалык антитело терапиясында кылдаттык менен каралат.

Биспецификалык антителолорду тазалоо - бул жогорку тазалыктагы максаттуу антителолорду бөлүп алуу жана тазалоо процесси. Айрым эрүүчү кошулмаларды жок кылуу үчүн эки ыкма, центрифугалоо жана терең чыпкалоо колдонулат. Максаттуу биспецификалык антитело алгач аффиндик хроматография менен кармалат. IgG сыяктуу биспецификалык антителолор үчүн белок А аффиндик хроматографиясы колдонулат, ал эми IgG сыяктуу эмес биспецификалык антителолор үчүн жарык чынжырына негизделген аффиндик хроматография колдонулушу мүмкүн. Андан кийин, антитело белгилүү бир убакытка чейин төмөнкү рН шарттарында инкубацияланат, бул вирус кабыгынын бетиндеги белоктун түзүлүшүн бузат, ошону менен клеткаларды жуктуруу мүмкүнчүлүгүн жоготот. Орточо терең чыпкалоо кожоюн клетка белоктору (HCP) сыяктуу кошулмаларды андан ары жок кылуу үчүн жүргүзүлөт. Антителолордун тазалыгы ион алмашуу хроматографиясы сыяктуу ыкмалар аркылуу жакшыртылып, калган вирустар нанофильтрация же ультрафильтрация ыкмалары аркылуу жок кылынат. Акырында, үлгү концентрацияланып, ылайыктуу формула буфери менен алмаштырылат.