Моноклоналдык антителолорду иштеп чыгуу кызматы

Alpha Lifetech Inc.эпитопторду алдын ала айтууну, пептид синтезин, белок экспрессиясын, поликлоналдык же моноклоналдык антителолорду өндүрүүнү, ошондой эле клетка культурасынан, асцит суюктугунан же бүтүндөй сывороткадан антителолорду тазалоону камсыздай алат.

Alpha Lifetech Inc.кардарларга гибридома клеткалары, геномду түзөтүүчү клетка линиялары, нокдаун клетка линиялары жана ашыкча экспрессияланган клетка линиялары сыяктуу ар кандай туруктуу клетка линиялары кызматтарын көрсөтүүдө тажрыйбалуу. Биз ар бир кардарга өркүндөтүлгөн жекелештирилген клетка линиялары кызматтарын сунуштоого аракет кылабыз жана биздин кызматтарыбыз далилденген жана ишенимдүү.

Антителолорду өнүктүрүү стратегиясы

1. Антигенди долбоорлоо жана даярдоо
Бул антигендер белоктор, пептиддер же башка молекулалар болушу мүмкүн. Иммуногендерди иштеп чыгуу антигендин түзүлүшү, иммунология жана жеткирүү системалары жөнүндөгү билимди бириктирген комплекстүү мамилени талап кылат. Alpha Lifetech компаниясы муктаж болгон кардарлар үчүн иммуногендерди иштеп чыга турган антигенди иштеп чыгуу технологиясына ээ.
Alpha Lifetech кардарлар үчүн тандоо үчүн рекомбинанттык белок продуктуларын сунуштайт. Изилдөө үчүн керектүү рекомбинанттык белокторду өндүрүү үчүн бизде E. coli экспрессия системасы, ачыткы экспрессия системасы, бакуловирус-курт-кумурска экспрессия системасы, сүт эмүүчүлөрдүн экспрессия системасы ж.б. сыяктуу ар кандай белок экспрессия системалары бар.

2. Жаныбарларды эмдөө
Alpha Lifetech кардарларга иммуногендерди бере алат, ал эми чычкандар, коёндор, койлор, альпакалар, деңиз чочколору, хомяктар ж.б. сыяктуу иммундук жаныбарлар сиз тандай аласыз.

3. Моноклоналдык антителолорду өндүрүү ыкмалары

●Hybridoma технологиясы боюнча Mabs өндүрүшү
Гибридома – бул эки түрдөгү клеткалардын, атап айтканда, чычкан миеломасынын клетка линиясынын жана плазма клеткаларынын (лимфоцит В) биригишинен пайда болгон гибриддик клетка, мында гетерозиготалуу клетка in vitro кызыктырган антигенге каршы үзгүлтүксүз антителолорду өндүрө алат. Гибридома клетка линиясын өндүрүү үч бөлүктөн турат: антигендин дизайны (гаптендер, кичинекей молекулалар жана пептиддер), жаныбарларды иммундаштыруу, клеткалардын биригиши жана позитивдүү клон скрининги. Иммунизациянын уникалдуу методологияларын колдонуу менен биз өзгөчө жогорку клеткалардын биригүүсүнүн натыйжалуулугуна (миң В клеткасына 1-10 гибридома) жана жогорку антитело титрлерине ээ болобуз, бул биохимиялык скринингди, in-vitro клеткага негизделген анализдерди жана жаныбарларды изилдөөнү камтыган кийинки аналитикалык тесттердеги ийгилик көрсөткүчүбүздү максималдуу түрдө жогорулатат.

●Фаг дисплей технологиясы менен Mabs өндүрүшү
Фаг дисплейи моноклоналдык антителолорду алуунун дагы бир ыкмасын сунуштайт. В-лимфоциттер жаныбарлардын канынан бөлүнүп алынат жана алардын мРНКсы алынат. ПЦР аркылуу бул мРНК кДНКга айландырылат, ал бардык VH жана VL сегменттерин күчөтөт. Андан кийин бул сегменттер бактериофагдын PIII протеини менен бирге векторго, адатта, бир чынжырлуу өзгөрмө фрагменттерге (scFv) айландырылат. Андан кийин, бул конструкция E. coli инфекциясын жуктуруу үчүн колдонулат, натыйжада жардамчы фаг менен эмдөө аркылуу болжол менен 10^10 клетканы камтыган китепкана түзүлөт. Андан кийин E. coli кабыгынын бир бөлүгү катары VH жана VL сегменттерин камтыган бактериофагды бөлүп чыгара алат. Андан кийин, кызыктырган антигенге багытталган белгилүү бир VH жана VL сегменттерин тандап алып, E. coli бактериясын бактериофаг менен кайра инокуляциялоо үчүн колдонсо болот. Андан кийин плазмиданы камтыган клеткалар бөлүнүп алынат жана секвенирленет.

4. Бириктирүү скрининги

●Клеткалардын биригиши жана тандалышы
Андан кийин чогултулган В клеткалары миелома клеткалары менен биригет, алар культурада чексиз көбөйө турган рак клеткалары. Биригүү, адатта, полиэтиленгликоль (PEG) бирикмеси сыяктуу ыкманы колдонуу менен ишке ашырылат.
Бириккенден кийин, гибридома клеткалары гибридомалардын гана аман калышына мүмкүндүк берген тандалма чөйрөдө өстүрүлөт. Адатта, чөйрөдө аминоптерин болот, ал биригип кетпеген миелома клеткаларынын өсүшүнө жол бербейт.

●Скрининг жана клонг
Алынган гибридома клеткалары максаттуу антигенге мүнөздүү антителолорду өндүрүү үчүн текшерилет. Бул, адатта, фермент менен байланышкан иммуносорбенттик анализ (ELISA), вестерн-блот, иммунопреципитация жана агым цитометриясы сыяктуу ыкмаларды колдонуу менен жасалат.

Антитело өндүргөн гибридома клеткалары аныкталгандан кийин, алар бирдей клеткалардын популяциясын түзүү үчүн клондолот. Бул ар бир гибридома клеткасы тарабынан өндүрүлгөн антителонун бирдей болушун камсыздайт.

5. Антителолордун функционалдык текшерүүсү
Alpha Lifetech моноклоналдык антителолорду мүнөздөө жана антителолордун спецификасын, аффиндүүлүгүн жана функционалдуулугун ырастоо үчүн вестерн-блоттинг, иммуногистохимия же функционалдык анализдер сыяктуу антителолордун функционалдык валидациясын камсыз кылат.

6. Антителолорду оптималдаштыруу
А протеини же G протеининин аффиндик хроматографиясы сыяктуу ыкмаларды колдонуу менен культуранын үстүнкү катмарынан антителолорду тазалоо жана Alpha Lifetech антителолордун аффиндүүлүгүн жакшыртуу үчүн антителолорду модификациялоо ыкмаларын сунуштай алат.

7. Антитело өндүрүшү
Alpha Lifetech жогорку өндүрүмдүүлүктөгү скринингдик колдонмолор жана ири масштабдуу өндүрүш үчүн талапкер антителолорду баалай алат.