Phage Display антитело өнүктүрүү платформасы

Антитело платформасынын комплекстүү платформа тутумунун курулушунун негизинде, Alpha Lifetech антителолорду даярдоодон, антителолорду тазалоодон, антителолорду секвенирлөөдөн ж.б. чейин техникалык кызматтарды көрсөтө алат.

БИЗГЕ БАЙЛАНЫШ

Phage Display антитело өнүктүрүү платформасы

Alpha Lifetech антителолорду табуу боюнча өзүнүн кеңири долбоор тажрыйбасы менен бир нече түрлөр үчүн ылайыкташтырылган моноклоналдык жана поликлоналдык антитело кызматтарын, ошондой эле антитело китепканасын куруу жана скрининг кызматтарын көрсөтө алат. Alpha Lifetech кардарларга сапаттуу антитело жана рекомбинантты антитело продуктуларын, ошондой эле эффективдүү, жогорку спецификалык жана туруктуу антителолорду даярдоо үчүн тиешелүү кызматтарды көрсөтө алат. Комплекстүү антитело платформаларын жана антитело инженериясын колдонуу менен биз антитело өндүрүшүнүн өйдө жана ылдый агымын камтыган кызматтарды, анын ичинде антителолорду даярдоо, тазалоо, антителолорду секвенирлөө жана валидациялоо сыяктуу техникалык кызматтарды көрсөтөбүз.

Alpha Lifetechтин жетилген антителолорду табуу платформасы бар, ал кардарларга жаныбарлардын иммунитети, фаг дисплейи антитело китепканасын куруу жана скрининг, антитело секвенциясы, антитело экспрессиясы, антителолорду тазалоо, антитело валидациясы жана гибридома технологиясына негизделген антителолорду белгилөө, бир В клеткасынын технологиясы, фаг дисплей технологиясы жана башкалар менен камсыз кылат. Alpha Lifetech стандарттык өндүрүш линиясына ээ жана антителолорду даярдоо кызматтарынан тышкары, антителолорду гуманизациялоо, антителолордун жакындыгын жетилтүү, ADC препаратын долбоорлоо жана иштеп чыгуу, жана CAR-T кийинки ырааттуулугун долбоорлоо сыяктуу көмөкчү кызматтар да көрсөтүлүшү мүмкүн. Ошол эле учурда, Alpha Lifetech M13, T4 жана T7 фаг дисплей технологиялык платформаларынын негизинде антитело китепканасын курду, анын сактоо сыйымдуулугу 10^8-10^9 чейин. Китепкананын оң көрсөткүчү, киргизүү курсу жана ар түрдүүлүгү 90% дан ашат.

Фагды көрсөтүү технологиясы

Моноклоналдык антителолорду өндүрүү алгач чычкан гибридомасын моноклоналдык антитело өндүрүү үчүн гибридома моноклоналдык антитело технологиясын колдонуу менен даярдалган. Тактап айтканда, иммунизацияланган чычкандардын көк боор клеткаларын адамдардын же чычкандардын миелома клеткалары менен бириктирүү аркылуу гибридома клеткалары пайда болот, алар спецификалык гибридома моноклоналдык антитело антителолорун бөлүп чыгарышат. Чычкандардын моноклоналдык антителолорунун гумандаштырылган модификациясы жана антителолордун гендик инженердик модификациясы аркылуу аларга туруктуу адамдын иммуноглобулиндик аймагын берүү, алардын иммуногендүүлүгүн азайтууга болот. Моноклоналдык антитело инженериясы биомедициналык жана клиникалык колдонмолордо кеңири колдонулат.

Alpha Lifetech клиникага чейинки изилдөө протоколун долбоорлоодон баштап антитело дары конъюгаттарын (ADCs) ачууга жана жаныбарларды текшерүүгө чейин бирдиктүү антитело инженердик кызматтарды көрсөтө алат. Антитело дары коньюгаттары (ADCs) рак клеткаларына химиотерапия препараттарын жеткире алат. Рак клеткаларында айтылган конкреттүү максаттарга байлангандан кийин, ADC рак клеткаларына цитотоксик препараттарды чыгарат. Alpha Lifetech ошондой эле кардарларга антитело жакындык жетилүү боюнча комплекстүү кызматтарды көрсөтө алат. Өркүндөтүлгөн мутацияларды оптималдаштыруу жана жогорку өтүмдүү фаг дисплейин скрининг технологиясы менен алгач белгилүү жакындыкка ээ антителолор текшерилет, андан кийин ар кандай варианттарды түзүү үчүн аминокислота мутациялары киргизилет. Кийинчерээк, жогорку жакындык антителолор бааланган жана скрининг ыкмаларын колдонуу менен текшерилген. Оптималдаштыруунун жана структуралык анализдин бир нече раунддарынан кийин, акырында жогорку жакындыгы жана күчтүүрөөк өзгөчөлүгү бар антителолор алынды.

Alpha Lifetech ар кандай типтеги антителолордун фаг дисплей китепканаларын, анын ичинде иммундук китепканаларды, жергиликтүү китепканаларды, жарым синтетикалык китепканаларды жана синтетикалык китепканаларды кура алат. Антитело китепканаларынын жогорку сыйымдуулугунун негизинде жогорку спецификалык антителолорду алууга болот. pMECS, pComb3X жана pCANTAB 5E сыяктуу бир нече фагемиддик векторлор, ошондой эле TG1 E. coli, XL1 Blue жана ER2738 сыяктуу штаммдар берилиши мүмкүн. 10^9 китепкана сыйымдуулугунан тышкары, китепкананын максаттуу фрагментин киргизүү ылдамдыгы да жогору, бул кардарларды канааттандырган антителолорду текшерүү үчүн жетиштүү шарттарды түзөт. Альфа Lifetech компаниясынын фагтарды көрсөтүү технологиясына негизделген антителолорду даярдоо кызматынын схемасы 1-сүрөттө көрсөтүлгөн.

Fig.1 Фаг дисплей технологиясынын негизинде моноклоналдык антителолорду даярдоо процессинин диаграммасы.

Фаг дисплейи антитело өндүрүшүнүн процесси

Кадамдар	Кызматтын мазмуну	Убакыт тилкеси
1-кадам: Жаныбарларга эмдөө	(1) Жаныбарларга 4 жолу эмдөө, күчөтүүчү иммунизация 1 доза, жалпысынан 5 доза эмдөө. (2) Иммунизациялоодон мурун терс сыворотка чогултулган жана сары суунун титерин аныктоо үчүн төртүнчү дозада ELISA жүргүзүлгөн. (3) Эгерде төртүнчү дозанын кан сары суусунун антитело титери талаптарга жооп берсе, иммунизациянын бир кошумча дозасы кан алуудан 7 күн мурун жүргүзүлөт. Ал талаптарга жооп бербесе, пландуу эмдөө улантылат. (4) квалификациялуу потенциалдуулук, кан чогултуу жана моноциттерди бөлүү	10 жума
2-кадам: cDNA даярдоо	(1) PBMC Жалпы РНК экстракциясы (РНК экстракциясынын топтому) (2) cDNA жогорку тактык RT-PCR даярдоо (кайтарым транскрипция комплект)	1 күн
3-кадам: Антитело китепканасын куруу	(1) Калып катары cDNA колдонуп, гендер ПТРдин эки туру менен күчөтүлгөн. (2) Фагдын курулушу жана трансформациясы: генди бириктирүүчү фагемиддик вектор, TG1 хост бактерияларынын электропорациялык трансформациясы, антитело китепканасынын курулушу. (3) Идентификация: Кокусунан 24 клонду тандоо, ПТР идентификациясынын оң ылдамдыгы + киргизүү ылдамдыгы. (4) Көмөкчү фаг даярдоо: M13 фагды күчөтүү+тазалоо. (5) Фаг дисплей китепканасын куткаруу	3-4 жума
4-кадам: Антитело китепканасын текшерүү (3 раунд)	(1) Демейки 3 раунддуу скрининг (катуу фазалуу скрининг): спецификалык эмес антителолорду максималдуу деңгээлде жок кылуу үчүн басымдын скрининги. (2) Бир клонду күчөтүү бактериофаг тандалган+IPTG индукцияланган экспрессия+позитивдүү клондордун ELISA аныктоосу. (3) Бардык оң клондор ген секвенциясы үчүн тандалган.	4-5 жума

Фагды көрсөтүү технологиясынын артыкчылыгы

Alpha Lifetech антителолорду иштеп чыгуу жаатында бай тажрыйбага ээ. Көп жылдар бою Alpha Lifetech комплекстүү антителолорду өнүктүрүү платформасын түздү.

Колдоо кызматтары

Биз кардардын муктаждыктарына ылайык ар кандай жаныбарларга негизделген иммундук китепкана куруу кызматтарын жана табигый антитело китепкана скрининг кызматтарын көрсөтө алабыз

Көп максаттуу

Бир нече максаттуу антителолорду табуу кызматтары бар: белоктор, пептиддер, кичинекей молекулалар, вирустар, мембраналык белоктор, мРНК ж.

Көптөгөн векторлор

Жекелештирилген китепкана куруу кызматы, биз ар кандай бактериофаг векторлорун, анын ичинде PMECS, pComb3X жана pCANTAB 5E менен камсыз кылып, кардарлардын муктаждыктарына жараша өзгөртө алабыз.

Жетилген платформа

Сактоо сыйымдуулугу 10 ^ 8-10 ^ 9 жетиши мүмкүн, киргизүү ылдамдыгы 90% дан жогору жана скрининг аркылуу алынган антителолордун жакындыгы жалпысынан nM pM деңгээлинде.

Тиешелүү SERVICE

Көптөгөн антителолорду өнүктүрүү стратегиялары

Моноклоналдык антителолорду өнүктүрүү кызматы

Гибридома технологиялык платформасы

Жалгыз B клетка сорттоо платформасы

Phage Display антитело өнүктүрүү платформасы

моноклоналдык антителолорду иштеп чыгуу - Alpha Lifetech

Моноклоналдык антителолорду өнүктүрүү кызматы

Биз чычкандын моноклоналдык антителолорун жана коёндун моноклоналдык антителолорун өндүрүүнү камтыган жогорку сапаттагы, жогорку тазалыктагы жана жогорку спецификалык моноклоналдык антителолорду иштеп чыгуу кызматтарын көрсөтө алабыз.

Гибридома технологиялык платформасы

Анын ичинде иммунизациялоо программасы, антителолорду даярдоо кызматтары, антителолорду тазалоо, антителолордун жогорку өтүмдүүлүк секвенциясы, антителолорду валидациялоо ж.

Жалгыз B клетка сорттоо платформасы

Alpha Lifetech скрининг убактысында жана жогорку сапаттагы антителолорду алууда артыкчылыктарга ээ. Ал антиген дизайнын, синтезин жана модификациясын, жаныбарлардын иммунитетин, бир В клеткасын байытуу скринингин, бир клетканын секвенирлөөсүн камсыздай алат.