Синтезделген антитело китепканаларына киришүү

Синтезделген антитело китепканасы, ошондой эле De novo китепканасы деп да аталат, бул наивдик антитело китепканаларына таянбастан, толук антитело өзгөрмөлүү аймактарын, анын ичинде алкактык аймактарды жана CDRлерди долбоорлоо жана синтездөө үчүн ДНК синтези же фаг дисплейи сыяктуу ыкмаларды колдонгон синтетикалык ыкма.

Жарым синтетикалык антитело китепканасы табигый жол менен пайда болгон антитело китепканаларын синтетикалык ар түрдүүлүк менен айкалыштыруу аркылуу түзүлөт. Ал, адатта, ДНК олигонуклеотиддерин синтездеп, ар кандай комплементардуу аныктоочу аймактардын (CDR) жыйындысын өндүрүүнү камтыйт, алар андан кийин адамдын же жаныбарлардын В клеткалары сыяктуу табигый булактардан алынган туруктуу антитело алкагы менен бириктирилет. Синтезделген CDR китепканага ар түрдүүлүктү киргизет, натыйжада эпитоптордун кеңири чөйрөсүн бутага алган антителолор пайда болот. Жарым синтетикалык антитело китепканасы иммундук системанын табигый ар түрдүүлүгү менен синтетикалык ыкмалар аркылуу жетишилген башкарылуучу ар түрдүүлүктүн ортосундагы компромиссти камсыз кылат.

Наивдүү жана синтетикалык антитело китепканаларынын ортосундагы айырма иммуноглобулин гендеринин булагына жараша болот. Ошол эле учурда, жарым синтезделген жана синтезделген антитело китепканасынын ортосундагы айырмачылык, биринчиси жеңил чынжыр же оор чынжыр сыяктуу наивдүү антитело сегменттеринин бир бөлүгүнөн турат жана алардын бири гана in vitro синтезделет; ал эми синтезделгени толугу менен in vitro ПЦР ​​аркылуу жасалма синтезден алынат.

Alpha Lifetech камсыздай алат

Alpha Lifetech Inc.биздин кесипкөй антителолорду табуу платформабыздын негизинде жаныбарлардан жана адамдардан жарым синтезделген/синтезделген антитело китепканасын сунуштай алат. Генетикалык модификация жана китепкана куруу жаатындагы көп жылдык тажрыйба менен, табигый антителолордун мүмкүнчүлүгүнөн тышкары аффиндүүлүк жана спецификалуулук менен синтетикалык антителолорду өндүрө алган синтезделген китепканаларды курууга болот.Alpha Lifetech компаниясынынАдистер 10^8 – 10^10 көз карандысыз клондорду камтыган антитело китепканасын курууда жогорку ийгилик көрсөткүчүнө кепилдик бере аларыбызды сыймыктануу менен жарыялашат.

Alpha Lifetech Inc.дүйнөлүк изилдөөчүлөрдүн ар түрдүү муктаждыктарын, анын ичинде scFv, Fab, VHH антителолорун жана ылайыкташтырылган китепканаларды канааттандыруу үчүн комплекстүү антитело китепканасын куруу кызматтарын сунуштоо менен сыймыктанат. Биздин максатыбыз - ар кандай кардарлардын талаптарын түшүнүү жана канааттандыруу, ошондой эле изилдөө ишиндеги келечектеги жана пайда болгон көйгөйлөргө жардам берүү.

Синтезделген антитело китепканаларын куруу кызматы процесси

Дизайн
Дизайн этабы антителолордун алкактарын жана комплементардуулукту аныктоочу аймактарды (CDR) учурдагы антитело ырааттуулугуна же структуралык маалыматтарга негизделген тандоону камтыйт. Синтетикалык CDR антителолору белгилүү бир функцияларды киргизүү же байланыштыруу касиеттерин күчөтүү үчүн да иштелип чыгышы мүмкүн.

Синтез
Дизайндалган антитело ырааттуулугун, анын ичинде алкактык аймактарды жана CDRлерди коддогон синтетикалык ДНК химиялык же ферменттик ыкмаларды колдонуу менен синтезделет.

Жыйын
Синтезделген ДНК фрагменттери ПТР, лигация же Гибсон чогултуусу сыяктуу ыкмаларды колдонуу менен антитело экспрессиясынын векторлоруна чогултулат. Андан кийин бул векторлорду антитело өндүрүү үчүн бактериялык, ачыткы же сүт эмүүчүлөрдүн клеткалары сыяктуу экспрессия системаларына киргизүүгө болот.

Скрининг жана тандоо
Курулган антитело китепканалары жогорку өндүрүмдүүлүктөгү скрининг ыкмаларын колдонуу менен каалаган касиеттерге ээ антителолор үчүн текшерилет жана тандалып алынат. Бул китепкананын форматына жана колдонулушуна жараша фаг дисплейи, ачыткы дисплейи же рибосома дисплейи сыяктуу ыкмаларды камтышы мүмкүн.

Синтезделген антитело китепканаларын куруу кызматы

Alpha Lifetech Inc.кардарларга 6,5 × 10^10 клондон турган фагда көрсөтүлгөн Fabs репертуарын түзүү үчүн Cre-lox сайтына мүнөздүү рекомбинация системасын колдонуп, оор жана жеңил чынжырлуу V-ген репертуарларын фаг векторуна бириктирүү менен антитело китепканаларынын бирдиктүү дизайнын жана синтезделген кызматын сунуштайт. Китепкана көптөгөн антигендерге каршы Abs берди, алардын айрымдары наномолярдык окшоштуктарга ээ. Адамдын антитело китепканасын түзүү M13 фаг дисплей технологиясына негизделген (төмөндөгү сүрөттө көрсөтүлгөн).