Синтезделген антитело китепканаларына киришүү

Синтезделген антитело китепканасы, ошондой эле De novo китепканасы катары белгилүү, бул антителолордун толук өзгөрмө аймактарын, анын ичинде алкактык аймактарды жана CDRлерди, жөнөкөй антитело китепканаларына таянбастан долбоорлоо жана синтездөө үчүн ДНК синтези же фаг дисплейи сыяктуу ыкмаларды колдонгон синтетикалык ыкма.

Жарым синтетикалык антитело китепканасы табигый түрдө пайда болгон антитело китепканаларын синтетикалык ар түрдүүлүк менен айкалыштыруу аркылуу түзүлөт. Ал, адатта, ар кандай толуктоочу аныктоочу аймактардын (CDRs) топтомун өндүрүү үчүн ДНК олигонуклеотиддерин синтездөөнү камтыйт, алар андан кийин адам же жаныбарлардын В клеткалары сыяктуу табигый булактардан алынган туруктуу антитело алкактары менен айкалышат. Синтезделген CDR китепканага ар түрдүүлүктү киргизет, натыйжада антителолор эпитоптордун кеңири спектрин бутага алат. Жарым синтетикалык антитело китепканасы иммундук системанын табигый көп түрдүүлүгү менен синтетикалык ыкмалар аркылуу жетишилген башкарылуучу ар түрдүүлүктүн ортосундагы компромиссти камсыз кылат.

Наив жана синтетикалык антитело китепканаларынын ортосундагы айырма иммуноглобулин гендердин булагынан көз каранды. Ошол эле учурда, жарым синтезделген жана синтезделген антитело китепканасынын ортосундагы айырма, биринчиси жеңил чынжыр же оор чынжыр сыяктуу жөнөкөй антитело сегменттеринин бир бөлүгүнөн турат жана алардын бирөө гана in vitro синтезделет; ал эми синтезделгени толугу менен in vitro PCR аркылуу жасалма синтезден алынган.

Alpha Lifetech камсыз кыла алат

Alpha Lifetech Inc.биздин профессионалдуу антителолорду ачуу платформабыздын негизинде жаныбарлардан жана адамдардан жарым синтезделген/синтезделген антитело китепканасын сунуштай алат. Генетикалык модификациялоо жана китепкана куруу боюнча көп жылдык тажрыйба менен синтезделген китепканаларды курууга болот, алар синтетикалык антителолорду табигый антителолордун мүмкүнчүлүктөрүнөн тышкары жакындыгы жана спецификасы менен чыгара алат.Alpha Lifetech компаниясыэксперттер биз 10^8 – 10^10 көз карандысыз клондорду камтыган антитело китепканасын курууда жогорку ийгиликке кепилдик бере аларыбызды сыймыктануу менен жарыя кылышат.

Alpha Lifetech Inc.глобалдык изилдөөчүлөрдүн, анын ичинде scFv, Fab, VHH антителолорунун жана жекелештирилген китепканалардын ар түрдүү муктаждыктарын канааттандыруу үчүн комплекстүү антитело китепканасын куруу кызматтарын сунуш кылганы менен сыймыктанат. Биздин максатыбыз түшүнүү жана ар кандай кардарлардын суроо-талаптарын канааттандыруу жана илимий-изилдөө иштеринде алдыдагы жана пайда болгон көйгөйлөр менен жардам берүү болуп саналат.

Синтезделген антитело китепканаларын куруу кызматынын процесси

Дизайн
Дизайн фазасы антителолордун алкактарын жана учурдагы антитело ырааттуулугуна же структуралык маалыматтардын негизинде толуктоолорду аныктоочу аймактарды (CDRs) тандоону камтыйт. Синтетикалык CDR антителолор, ошондой эле белгилүү бир иш-милдеттерди киргизүү же милдеттүү касиеттерин жогорулатуу үчүн иштелип чыккан болушу мүмкүн.

Синтез
Дизайнланган антитело ырааттуулугун коддоочу синтетикалык ДНК, анын ичинде алкактык аймактар ​​жана CDRs химиялык же ферменттик ыкмалар менен синтезделет.

Ассамблея
Синтезделген ДНК фрагменттери ПТР, лигация же Гибсон монтажы сыяктуу ыкмаларды колдонуу менен антитело экспрессиясынын векторлоруна чогултулат. Бул векторлор антитело өндүрүү үчүн бактериялык, ачыткы же сүт эмүүчүлөрдүн клеткалары сыяктуу экспрессия системаларына киргизилиши мүмкүн.

Скрининг жана тандоо
Түзүлгөн антитело китепканалары скринингден өткөрүлөт жана жогорку өтүмдүү скрининг ыкмаларын колдонуу менен каалаган касиеттери бар антителолорго тандалат. Бул китепкана форматына жана колдонууга жараша фаг дисплей, ачыткы дисплей же рибосома дисплей сыяктуу ыкмаларды камтышы мүмкүн.

Синтезделген антитело китепканаларын куруу кызматы

Alpha Lifetech Inc.кардарларга 6,5 × 10 ^ 10 клондон турган фагта көрсөтүлгөн Fabs репертуарын түзүү үчүн Cre-lox сайттын рекомбинациялоо тутумун колдонуу менен оор жана жеңил чынжыр V-ген репертуарларын фаг векторуна байлап, антитело китепканаларынын бирдиктүү дизайнын жана синтезделген кызматын сунуштайт. Китепкана абсты көптөгөн антигендерге каршы көрсөттү, алардын айрымдары наномолярдык жакындыкка ээ. Адамдын антитело китепканасынын мууну M13 фаг дисплей технологиясына негизделген (төмөндөгү сүрөттө көрсөтүлгөн).