Quid est Ingeniaria Anticorporum?

Auxilio machinationis anticorporum, magnitudinem molecularum, pharmacocineticam, immunogenicitatem, affinitatem ligationis, specificitatem et functionem effectricem anticorporum modificare potuerunt. Post synthesim anticorporum, ligatio specifica anticorporum ea magni momenti reddit in diagnosi clinica et curatione. Per machinationem anticorporum, necessitatibus evolutionis medicamentorum et diagnosticae incipientis occurrere possunt.

Propositum machinationis anticorporum est functiones valde specificas et stabiles, quas anticorpora naturalia assequi non possunt, designare et producere, fundamentum iaciens productioni anticorporum therapeuticorum.

Alpha Lifetech, cum ampla experientia in arte ingeniaria anticorporum, officia anticorporum monoclonalium et polyclonalium ad necessitates accommodatas multis speciebus praebere potest, necnon officia constructionis et examinationis bibliothecae anticorporum ad ostensionem phageorum. Alpha Lifetech clientibus anticorpora biosimilaria qualitate praestantia et producta proteinorum recombinantium, necnon officia correspondentia, ad producendum anticorpora efficacia, valde specifica et stabilia praebere potest. Utentibus anticorporibus, suggestis proteinorum et systematibus ostensionis phageorum comprehensivis, officia praebemus quae omnia a monte et a valle productionis anticorporum tegunt, inter quae officia technica ut humanizatio anticorporum, purificatio anticorporum, sequentiatio anticorporum, et validatio anticorporum.

Gradus primus in arte fabricandi anticorporum duabus technologiis coniunctus est:

--Technologia ADN recombinantis

--Technologia Hybridomatis

Celer progressus machinationis anticorporum tribus technologiarum magni momenti coniungitur:

--Technologia clonationis genorum et reactio concatenationis polymerasis

Expressio proteinorum: Proteina recombinantia a systematibus expressionis, ut fermento, viris baculiformibus, et plantis, producuntur.

--Designatio structurae computatro adiuvata

Prima generatio anticorporum humanizata est ad productionem anticorporum chimericorum, ubi regio variabilis anticorporum monoclonalium murinorum cum regione constanti molecularum IgG humanarum coniuncta erat. Regio ligante antigenum (CDR) anticorporis monoclonalis murini secundae generationis in IgG humanum transplantata est. Excepta regione CDR, omnia alia anticorpora fere humana sunt, et conatus facti sunt ad vitandam inductionem responsionum anticorporum humanorum anti-murium (HAMA) cum anticorpora clonorum murinorum ad curationem humanam adhiberentur.

 

Ad bibliothecam phage display construendam, primum gradum est obtinere gena anticorpora codificantia, quae ex cellulis B animalium immunizatorum separari possunt (constructio bibliothecae immunis), directe ex animalibus non immunizatis extrahi (constructio bibliothecae naturalis), vel etiam in vitro cum fragmentis genorum anticorporum congregari (constructio bibliothecae syntheticae). Deinde, gena per PCR amplificantur, in plasmida inseriuntur, et in systematibus hospitum idoneis exprimuntur (expressio fermenti (plerumque Pichia pastoris), expressio prokaryotica (plerumque E. coli), expressio cellularum mammalium, expressio cellularum plantarum, et expressio cellularum insectorum virusis bacilloformibus infectarum). Frequentissima est systema expressionis E. coli, quod sequentiam anticorporum codificantem specificam in phagum integrat et unam ex proteinis testae phagi (pIII vel pVIII) codificat. Fusio genorum, A et A in superficie bacteriophagorum exhibentur. Nucleus huius technologiae est bibliothecam phage display construere, quae commodum prae bibliothecis naturalibus habet quod nexum specificum habere potest. Deinde, anticorpora cum specificitate antigeni per processum selectionis biologicae examinantur, antigena destinata fixantur, phagi non ligati iterum atque iterum abluuntur, et phagi ligati abluuntur ad ulteriorem locupletationem. Post tres vel plures vices repetitionis, anticorpora altae specificitatis et altae affinitatis isolantur.

Figura 3: Constructio et Examinatio Bibliothecae Anticorporum

Technologia DNA recombinantis ad fragmenta anticorporum generanda adhiberi potest. Anticorpora Fab initio tantum a proteasi gastrica hydrolyzari possunt ad fragmenta (Fab')2 producenda, quae deinde a papaino digeruntur ad fragmenta Fab singularia generanda. Fragmentum Fv constat ex VH et VL, quae stabilitatem parvam habent propter absentiam vinculorum disulfidicorum. Ergo, VH et VL inter se coniunguntur per breve peptidum 15-20 aminoacidorum ad fragmentum variabile catenae singularis (scFv) anticorpus cum pondere moleculari circiter 25KDa formandum.

Studium structurae anticorporum in Camelidis (Cameli, Liama, et Alpaca) elucidavit anticorpora tantum catenas graves habere, nullas catenas leves, itaque anticorpora catenae gravis (hcAb) appellari. Dominium variabile anticorporum catenae gravis anticorpora dominii singularis vel nanocorpora vel VHH appellatur, magnitudine 12-15 kDa. Ut monomera, nulla vincula disulfidica habent et valde stabilia sunt, cum affinitate maxima pro antigenis.

Figura 5: Anticorpus Catenae Gravis et VHH/Nanocorpus

Expressio libera cellularum expressionem DNA naturalis vel synthetici ad synthesim proteinorum in vitro efficiendam adhibet, typice systemate expressionis E. coli utens. Proteina celeriter producit et onus metabolicum et cytotoxicum in cellulas vitat cum magnas quantitates proteinorum recombinantium in vivo producit. Etiam proteinas difficiles ad synthesizandum producere potest, ut eas quae difficiles sunt post translationem modificare vel proteinas membranae synthesizare.