Servitium Evolutionis Anticorporum Monoclonalium
Alpha Lifetech Inc.praedictionem epitopi, synthesis peptidorum, expressionem proteinorum, productionem anticorporum polyclonalium vel monoclonalium, necnon purificationem anticorporum ex cultura cellularum, liquido ascitico, vel sero toto praebere potest.
Alpha Lifetech Inc.Perita est in variis officiis stabilibus stirpium cellularum clientibus praebendis, inter quas sunt cellulae hybridomatum, stirpes cellularum genomae emendandae, stirpes cellularum imminutae, et stirpes cellularum superexpressionis. Conamur officia provecta et singularia stirpium cellularum singulis clientibus offerre, et officia nostra probata et fida sunt.
Strategia Elaborationis Anticorporum

1. Designatio et praeparatio antigeni
Haec antigena possunt esse proteina, peptida, vel aliae moleculae. Immunogena designanda requiritur accessus comprehensivus qui scientiam structurae antigenorum, immunologiae, et systematum traditionis integrat. Alpha Lifetech technologiam designandi antigena habet quae immunogena pro clientibus egentibus designare potest.
Alpha Lifetech praebet producta proteinica recombinantia ex quibus clientes eligere possunt. Varia systemata expressionis proteinorum habemus, ut systema expressionis E. coli, systema expressionis fermenti, systema expressionis baculovirus-insectum, systema expressionis mammalium, et cetera, ad producenda proteina recombinantia quae tibi necessaria sunt ad investigationem.
2. Immunizatio animalium
Alpha Lifetech immunogena clientibus praebere potest, et animalia immunia, ut mures, cuniculi, oves, alpacae, porcelli caviae, criceti, et cetera, tibi praesto sunt e quibus eligas.
3. Methodi productionis anticorporum monoclonalium
●Productio Mabs per technologiam hybridomatum
Hybridoma est cellula hybrida producta ex fusione duorum generum cellularum, scilicet lineae cellularum myelomatum murinum et cellularum plasmaticarum (lymphocyti B), in qua cellula heterozygota anticorpora continua contra antigenum desideratum in vitro producere potest. Productio lineae cellularum hybridomatum tribus partibus constat: designatione antigeni (haptena, moleculae parvae, et peptida), immunizatione animalium, fusione cellularum, et examine clonorum positivorum. Methodologiae immunizationis singulares utentes, efficientias fusionis cellularum exceptionaliter altas (1-10 hybridomata per mille cellulas B) et titulos anticorporum altos obtinemus, rationem successus nostri in probationibus analyticis subsequentibus, quae examinationem biochemicam, probationes in vitro cellularum fundatas, et studia animalium includunt, maximizantes.
●Productio Mabs per technologiam phage display
Exhibitio phagi aliam methodum ad anticorpora monoclonalia generanda offert. Lymphocyti B ex sanguine animali separantur et eorum mRNA extrahitur. Per PCR, hoc mRNA in cDNA convertitur, quod omnia segmenta VH et VL amplificat. Haec segmenta deinde in vectorem clonantur, typice ut fragmenta variabilia catenae singularis (scFv), una cum proteino PIII bacteriophagi. Deinde, haec constructio ad inficiendum E. coli adhibetur, quod efficit ut bibliotheca circiter 10^10 cellularum per inoculationem cum phago adiuvante creetur. E. coli deinde bacteriophagum segmenta VH et VL ut partem tunicae suae continens secernere potest. Post hoc, segmenta VH et VL specifica antigenum desideratum petentia eligi et ad reinoculandum E. coli cum bacteriophago adhiberi possunt. Cellulae plasmidum continentes deinde separantur et sequentiantur.
4. Examen fusionis
●Fusio et Selectio Cellularum
Cellulae B collectae deinde cum cellulis myelomatis, quae sunt cellulae carcinomatosae quae in cultura indefinite proliferare possunt, coniunguntur. Fusio typice perficitur utens technica qualis est fusio polyethylene glycol (PEG).
Post fusionem, cellulae hybridomata in medio selectivo coluntur, quod sola hybridomata superesse sinit. Medium plerumque aminopterinum continet, quod incrementum cellularum myelomatum non fusarum impedit.
●Examinatio et Adhaesio
Cellulae hybridomatum inde ortae examinantur ad productionem anticorporum specificorum ad antigenum destinatum. Hoc typice fit utens technicis ut ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), Western blot, immunopraecipitation, et cytometria fluxus.
Postquam cellulae hybridomatum anticorpus producentes identificatae sunt, clonantur ut populatio cellularum identicarum generetur. Hoc efficit ut anticorpus ab unaquaque cellula hybridomatum productum idem sit.
5. Verificatio Functionis Anticorporum
Alpha Lifetech validationem functionalem anticorporum, qualis est Western blotting, immunohistochemia, vel probationes functionales, praebet ad anticorpora monoclonalia describenda et specificitatem, affinitatem, et functionem anticorporum confirmandam.
6. Optimizatio anticorporum
Purificatio anticorporum ex supernatante culturae utens technicis sicut chromatographia affinitatis proteini A vel proteini G, et Alpha Lifetech etiam methodos modificationis anticorporum praebere potest ad affinitatem anticorporum emendandam.
7. Productio anticorporum
Alpha Lifetech anticorpora candidata ad applicationes examinationis magnae capacitatis et productionem magnae scalae aestimare potest.
- 1
Quomodo hybridoma fusionis rectum eligendum est?
Dum fusionem perficiunt, decem ad quindecim laminae microtitulares 96 puteorum mixtura hybrida fusionis seminant. Quaeque lamina medio selectionis HAT-IMDM nutritur et in incubatore dioxidi carbonis ad triginta septem gradus Celsii conservatur. Post novem ad quattuordecim dies post fusionem, supernatantia hybrida ad praesentiam anticorporis specifici probantur.
- Duo
Quomodo efficaciam selectionis augere?
Fusio cellularum plasmaticarum cum suis myelomatibus comparabilibus non est centum pro cento efficax. Etiam sub condicionibus optimis et stimulatione efficacissima, fusio cellularum adhuc mixturam cellularum non fluentium et confluentium producit, quae separandae sunt. Ad efficientiam processus selectionis augendam, cellulae myelomatibus ad fusionem adhibitae carent HGPRT, enzymo clavi in via recuperationis nucleotidorum. Mixtura deinde in medio HAT culta est, ubi solae cellulae cum enzymo HGPRT, hybridomata quae HGPRT a cellulis plasmaticis hereditaverunt, viabiles erant.
- Tres
Quomodo stirpes cellularum hybridomatum ad activitatem anticorporum examinare?
Aestimatio varietatum hybridarum est gradus maximi momenti. Solet fieri ut examinatio supernatantium hybridomatum, clonorum, et subclonorum per ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), Western blot assay, et fluorescence activated cell sorted (FACS). Omnem examinationem supernatantium in nostro laboratorio peragere eligemus.
- quattuor
Instructiones accuratas de modo peragendi examen activitatis anticorporum praebere?
Supernata hybridomatum examinanda a 500 ad 1440 exempla variari possunt et ad examinandum diebus 9-14 parata erunt. Intra trium ad quinque dierum spatium experiri possumus, vel omnia eodem die parata esse possunt, ergo interest laboratorium clientis hebdomades antea cum specificis probationibus secundariis examinatoriis electionis praeparatum esse.
- quinque
Cur hybridomata positiva subclonari debent?
Postquam putei positivi per primam ELISA examinationem identificati sunt, hybridomata in volumen maius, id est, in laminas 24 puteorum, translata sunt, ad subclonationem praeparandam. Subclonatio hybridomatum plerumque per dilutionem limitatam fit ad isolationem monoclonorum stabilium confirmandam. Haec ars culturas hybridomatum diluere et in laminas 96 puteorum dispergere implicat, ut monoclonalitas (una cellula per puteum) obtineatur. Saltem duae dilutiones limitatae peragendae sunt ad periculum creandi populationes hybridomatum mixtas reducendum.
- sex
Quae sunt commoda technologiae hybridomatum ad inveniendum anticorpora utendi?
Lineae cellularum hybridae laudatae sunt propter facultatem producendi anticorpora cum alta affinitate, stabilitate, et specificitate modo quam maxime sumptuum efficaci.

Officium Productionis Anticorporum Monoclonalium Murinorum
Alpha Lifetech totum ministerium hybridomatum murium scientificis toto orbe terrarum praebere potest. Haec ministeria includunt designationem/synthesis antigenorum, immunizationem murium, fusionem cellularum, et selectionem/proprietates hybridomatum, quibus in unoquoque proiecto specializari possumus.
PLURA LEGE
Servitium Productionis Anticorporum Monoclonalium Leporinorum
Alpha Lifetech per multos annos in agro anticorporum experientiam habet et amplam suggestum progressionis anticorporum monoclonalium leporinorum construxit.
PLURA LEGE


XVI Iulii MMXVIII 

