Servitium Scrutationis Bibliothecae Anticorporum Syntheticorum Fab

Introductio Servitii Scrutationis Bibliothecae Anticorporum Syntheticorum FabFabulosus

Bibliotheca anticorporum synthetica ad sequentias regionis variabilis anticorporum artificialiter designatas et synthesizatas secundum structuram et functionem refertur. Contra, sequentiae regionis sceletalis fixe designatae et synthesizatae sunt secundum informationem in bibliotheca anticorporum humanorum.

Commoda bibliothecae anticorporum syntheticorum haec sunt: (1) Fortuitas bibliothecae augetur et capacitas bibliothecae magna est; (2) Quaedam anticorpora difficilia sine immunizatione animalium examinari possunt; (3) Comparata cum bibliotheca anticorporum simplicium, consilium bibliothecae anticorporum syntheticorum varium est.

Incommoda bibliothecae anticorporum syntheticorum: diversitas sequentiarum artificialiter designata, nulla evolutio in vivo, proclivitas ad modificationem proteinorum abnormalem vel greges aminoacidorum, humilis gradus expressionis, et facilis degradatio, ergo anticorpora examinata necessariam optimizationem anticorporum subire debent ut medicamentis aptiores sint.

Alpha Lifetech Praebere Potest

Alpha Lifetech per multos annos in technologia ostensionis bacteriophagocyticae anticorporum penitus versata est. Fundamentum technologiae ostensionis bacteriophagocyticae perfectum et stabile construxit, quod tempus investigationibus scientificis vel investigationibus proiectis conservat et productionem subsequentem facilitat. Alpha Lifetech etiam clientibus selectionem ostensionis bacteriophagocyticae praebere potest, sive ostensionem bacteriophagocyticam nanobody, sive ostensionem bacteriophagocyticam scFv, sive ostensionem bacteriophagocyticam Fab.

Alpha Lifetech amplam suggestum ostensionis phagorum M13/T7 habet ad constructionem et productionem bibliothecarum anticorporum curandam. Etiam officia personalia, qualia sunt ostensio phagorum scFv, productio anticorporum Fab, et purificatio anticorporum Fab, praebere possumus ad necessitates tuas implendas.

Alpha Lifetech unum locum interretialem pro necessitatibus tuis investigationis praebere potest, a selectione phagorum ad sequentiationem NGS. Praeterea, Alpha Lifetech officia purificationis anticorporum Fab praebet.

Processus Servitii Examinationis Bibliothecae Anticorporum Syntheticorum Fab

Examen Phase Solidae

Postquam bibliotheca Fab phagica constructa est, examinatio affinitatis peracta est, methodo examinationis phasis solidae utens.

Una est antigenum superficiei obiecti figere, et antigenum in superficie activata per varias interactiones non-covalentes adsorberi potest. Antigenum cum detergente liquore diluitur, quod adsorptionem impedientem non habet et pH > 9, ut onus netum moleculae proteinicae augeatur et interactio hydrophilica cum superficie promoveatur, deinde laminae guttatoriae additur ad incubationem cum bibliotheca anticorporum phagi Fab. Fab cum antigeno phase solidae ligatur, ita ligatio Fab stabilis est. Deinde phagus non ligatus vel non ligatus abluitur, et linea phagi cum eluente specifico removetur. Haec gradus pluries repetere. Post 3 ~ 4 circuitus examinationis, phagus Fab ligans paratus est, anticorpus Fab ligans examinatum identificatum est, et cloni positivi obtenti solubiles erant. Specificitas anticorporis Fab per Western Blot et immunohistochemiam aestimata est. Affinitas anticorporis Fab per BLI aestimata est. Post obtentionem cloni destinati, eventus per technologiam NGS sequentiationis ad purificationem anticorporis Fab verificati sunt.

Attamen haec methodus limitationes habet: (1) Antigena ponderis molecularis humilis, ut haptena vel peptida, in sola superficie adsorbi non possunt et cum proteinis vectoribus coniungi debent; Structura antigeni mutabitur, et anticorpus antigenum liberum in solutione non agnoscet.

Alia methodus est antigenum destinatum biotino ligare, streptavidino fixo adhibito ad antigenum superficiale capiendum. Proteina per reactiones chemicas catenae lateralis biotinizari possunt, et haptena et peptida brevia biotinizata synthesizari possunt. Ante additionem antigenorum biotinylatorum, bibliotheca praetractanda et praeincubanda est cum microsphaeris streptavidino obductis ad ligandum coniugatum streptavidini. Bibliotheca cum solutione antigeni biotinizati incubata est et sphaerae magneticae additae sunt. Quamquam biotinum proprietates physicas et chemicas antigenorum afficere potest, haec methodus antigena cum mutationibus conformationis adsorbere potest.

Fig. 1. Examen biologicum bibliothecae anticorporum phage display.(Fons referentiae:) Exhibitio Phagi Anticorporum - PubMed (nih.gov)

Examen Phaserum Totius Cellulae

Cellulae integrae antigena superficialia exprimentes ut antigena ad examinationem biologicam adhiberi possunt. Hac methodo anticorpora quae ad antigenum destinatum ligant in ambitu prospero obtineri possunt. Quia cellulae amplam varietatem molecularum superficialium exprimunt, tantum parva pars ad moleculam destinatam ligabit, itaque haec methodus difficilis est. Praecuratio requiritur ante initium experimenti ut coniugatum superexpressum/non destinatum antigeni destinati consumatur.

Examen Superficiei Cellularum

	Examen Receptorum Superficiei Cellularum Notorum	Examen Receptorum Superficiei Cellularum Ignotorum
Principium	In patina culturae, cellulae vacuae quae receptorem scopum in bibliotheca anticorporum non continent ab anticorpore scopo removentur (id est, examinatio negativa), deinde bacteriophagus non adsorptus cum cellula scopo combinatur ut anticorpus quod cellulae scopo ligat obtineatur (id est, examinatio positiva), et post aliquot circuitus "examinationis negativae - examinationis positivae - amplificationis", anticorpus specificum locupletari potest.	Examinatio receptorum ignotorum in superficie cellulae saepe anticorpora efficit quae magnum numerum receptorum molecularium in superficie cellulae petunt, ergo reactiones transversales inter anticorpora et textum normale vitandae sunt. Necesse est cellulas negativas idoneas eligere ad imagines secundarias examinandas et rationem signi ad strepitum emendandam.
Vitium	In processu selectionis negativae, phagi non specifici efficaciter protegi non possunt. In processu selectionis positivae, nonnulli cloni positivi cum numero exemplarium parvo facile amittuntur. Plerique cloni anticorporum locupletati non specifici sunt, et numerus ac diversitas multo minores sunt quam antigenorum purorum.	In ambitu antigeni complexo, cum proprietatibus antigeni receptoris incertis et expressione receptoris functionali parva, examinatio saepe cum praejudicio et diversitate receptoris impeditur, quod efficit ut efficacia examinationis humilis et fons examinationis altus sit. Praeterea, ars difficilis est ad operandum, bacteriophagus recuperatus parvus est, affinitas anticorporis humilis est, et valor evolutionis non magnus est.