Aptamer Entwécklungsplattform

Aptamere si einfachsträngeg Oligonukleotid (DNA, RNA oder XNA) mat der Eegeschaft vun héijer Affinitéit an héijer Spezifizitéit, déi spezifesch un Zilmoleküle wéi Antikörper binden, a si gi extensiv fir d'Entwécklung vu Biosensoren, Diagnos a Therapeutik benotzt.

D'Aptamer-Plattform, déi vun Alpha Lifetech ugebuede gëtt, ëmfaasst zwou Kategorien: eng Aptamer-Syntheseplattform, déi haaptsächlech de SELEX-Aptamer-Bibliothéikssyntheseservice an den Aptamer- (DNA, RNA oder XNA)-Entwécklungsservice ëmfaasst, an eng Aptamer-Screeningplattform, déi Screening-Servicer baséiert op der SELEX-Technologie fir Proteinen, Peptiden, Zellen, kleng Molekülen, Metallionen an aner Zilmolekülen enthält, souwéi Downstream-Aptamer-Optimiséierungs- an Identifikatiounsanalyse-Servicer.

Aptamer Synthese Plattform

SELEX Aptamer Bibliothéik Synthese Service

De SELEX Aptamer-Bibliothéikssyntheseservice besteet haaptsächlech aus dem Opbau vun enger Bibliothéik, déi eng grouss Zuel vun zoufällegen eenzelstrangegen Oligonukleotidsequenzen duerch In-vitro-chemesch Synthese no den Zilmoleküle enthält. De Bibliothéikskonstruktioun ass den Ausgangspunkt vun der SELEX-Technologie, déi duerch de Bau vu risege zoufällege Bibliothéiken eng grouss Zuel vu Kandidatesequenzen fir de spéidere Screeningprozess liwwert an d'Méiglechkeet fir Aptameren mat héijer Affinitéit ze screenen erhéicht.

D'Bibliothéikssynthese ass haaptsächlech an déi folgend Schrëtt opgedeelt:

Schrëtt	Technologie Detailer
Zilmoleküle identifizéieren	Identifizéiert d'Zilmoleküle, déi op Aptamere gescreent musse ginn, wat Proteinen, Nukleinsäuren, kleng Molekül, Metallionen, asw. kënne sinn.
Zoufälleg Sequenzdesign	D'Längt vun der zoufälleger Sequenz, d'Basenzesummesetzung an aner Parameter goufen no de Charakteristike vun den Zilmolekülen an de Screening-Ufuerderunge konzipéiert. Typesch sinn zoufälleg Sequenzen tëscht Zénger an Honnerte vu Basen laang.
Synthese vu fixe Sequenzen	Oligonukleotidfragmenter mat fixe Sequenzen (wéi PCR-Primersequenzen) op béide Enden ginn entwéckelt a synthetiséiert, déi am spéideren Amplifikatiouns- a Screeningprozess benotzt ginn.

Déi synthetiséiert Bibliothéik muss nach weider fir d'Qualitéitskontroll veraarbecht ginn. D'Konzentratioun vun der Bibliothéik gouf bestëmmt fir hir Uwendung am spéidere Screeningprozess ze garantéieren. D'Diversitéit an d'Genauegkeet vun den zoufällege Sequenzen an der Bibliothéik goufen duerch Sequenzéierung an aner Methoden verifizéiert fir sécherzestellen, datt d'Qualitéit vun der Bibliothéik den Screeningufuerderunge entsprécht.

Duerch déi uewe genannte Schrëtt kann eng héichqualitativ a ganz divers SELEX-Aptamerbibliothéik synthetiséiert ginn, déi vill Kandidatesequenze fir de spéidere Screeningprozess liwwere kann.

Aptamer-Entwécklungsservicer (DNA, RNA oder XNA)

Aptamere bezéie sech normalerweis op Nukleinsäure-Aptameren. Nukleinsäure-Aptameren enthalen DNA-Aptameren, RNA-Aptameren an XNA-Aptameren, dat sinn chemesch modifizéiert Nukleinsäure-Aptameren. D'SELEX-Technik gëtt wäit verbreet fir d'Entwécklung vun Aptameren agesat. De Basis-Workflow vun den Aptamer-Entwécklungsdéngschter ëmfaasst d'Bibliothéikskonstruktioun, d'Zilbindung, d'Isolatioun an d'Reinigung, d'Amplifikatioun, verschidde Screening-Ronnen an d'Sequenzidentifikatioun. Mir konzentréiere eis zënter ville Joren op de Bibliothéikskonstruktioun a mir hunn eng räich Erfahrung an der Aptamer-Entwécklung. Mir engagéieren eis fir de Clienten besser Servicer ze bidden.

SELEX Technologieprozess

De SELEX-Prozess besteet aus verschiddene Ronnen, déi all aus de folgende Schlësselschrëtt bestinn:

Bibliothéik a Zilbindung

Déi konstruéiert Nukleinsäurebibliothéik gëtt mat spezifeschen Zilmoleküle (wéi Proteinen, Klengmolekülverbindungen, asw.) gemëscht, sou datt d'Nukleinsäuresequenzen an der Bibliothéik d'Méiglechkeet hunn, sech un d'Zilmoleküle ze bannen.

Isolatioun vun ongebonnenen Molekülen

Nukleinsäuresequenzen, déi net un d'Zilmolekül gebonnen sinn, ginn duerch spezifesch Methoden, wéi Affinitéitschromatographie, Magnéitperlentrennung, etc., aus der Mëschung getrennt.

Amplifikatioun vu Bindungsmolekülen

D'Nukleinsäuresequenz, déi un en Zilmolekül gebonnen ass, gëtt amplifizéiert, normalerweis mat Hëllef vun der Polymerasekettenreaktiounstechnologie (PCR). Fir déi spéider Screeningphase ginn déi amplifizéiert Sequenzen als Ausgangsbibliothéik benotzt.

Fig. 1: SELEX-Screeningprozess

Aptamer Screening Plattform

Aptamer-Screening-Service

Alpha Lifetech bitt eng breet Palette vu spezialiséierten Aptamer-Screening-Servicer un, déi verschidde SELEX-Methodologien fir verschidden Zorte vun Äre Molekülen uwenden:

Ziltypen	Technesch Detailer
Protein-Aptamer-Screening vu SELEX	Den Haaptzweck vum Protein-Aptamer-Screening ass et, Aptameren ze screenen, déi spezifesch un d'Zilproteinmoleküle bannen kënnen. Dës Aptamere si méi einfach ze synthetiséieren, méi stabil a manner ufälleg fir Ëmweltfaktoren.
Peptidaptamer-Screening vu SELEX	Peptidaptamere sinn eng Klass vu kuerze Peptidsequenzen mat héijer Spezifizitéit an Affinitéit, déi spezifesch un Zilsubstanzen binde kënnen a vill Uwendungspotenzial am biomedizinesche Beräich weisen. Duerch e spezifesche Screeningprozess gi Peptidaptamere, déi spezifesch un Zilmoleküle binde kënnen, aus enger grousser Zuel vu zoufällege Peptidsequenzbibliothéike gescreent.
Zellspezifesch Aptamer-Screening (Cell-SELEX)	Zilzellen oder spezifesch Moleküle op der Zelluewerfläch ginn als Ziler virbereet. Ziler kënne ganz Zellen, Rezeptoren op der Zellmembran, Proteinen oder aner kleng Moleküle sinn.
Screening vu klenge Molekülen-Aptamer duerch Capture SELEX	Capture SELEX ass eng In-vitro-Screeningtechnik fir d'Screening vu klenge Molekül-Aptameren, déi eng Variant vu SELEX ass. Capture SELEX ass besonnesch gutt geegent fir den Aptamer-Screening vu klenge Molekül-Ziler, déi typescherweis manner funktionell Gruppen hunn a schwéier direkt op Festphas-Supporten immobiliséiere kënnen.
SELEX-Servicer op Basis vu liewegen Déieren	E Screening-Service op Basis vu liewegen Déieren ass eng experimentell Technik, déi wäit verbreet an de Beräicher Biowëssenschaften, Medizin a Biotechnologie benotzt gëtt, bei där lieweg Déieren als experimentell Modeller benotzt ginn, fir spezifesch Molekülen, Medikamenter, Therapeutika oder biologesch Prozesser ze screenen an ze evaluéieren. D'Servicer sinn entwéckelt fir dat physiologescht Ëmfeld am mënschleche Kierper ze simuléieren, fir d'Effizienz a Sécherheet vun experimentellen Resultater am mënschleche Kierper méi genee virauszesoen an ze evaluéieren.

Aptamer Optimiséierungsservice

D'Hydrophilizitéit, den héije Affinitéitsverloscht während der Produktioun an déi séier Ausscheedung vun Aptameren limitéieren hir Uwendung. De Moment goufen eng Rei vun Optimiséierungsmethoden exploréiert fir d'Leeschtung vun Aptameren ze verbesseren.

Mir hunn och eng Villfalt vu Méiglechkeeten fir Aptamer ze optimiséieren, bestehend aus Ofkierzung, Modifikatiounen, Konjugatioun un déi entspriechend Grupp (Thiol, Carboxy, Amin, Fluorophor, etc.).

Aptamer Charakteriséierungsanalyse Service

Den Aptamer-Charakteriséierungsanalyseservice bezitt sech op de professionelle Service vun der Performanceevaluatioun, der Strukturopléisung an der funktioneller Verifizéierung vum gewonnenen Aptamer, fir sécherzestellen, datt den Aptamer déi spezifesch Ufuerderunge fir Bindungsfäegkeet, Stabilitéit a Spezifizitéit erfëllt. Et ëmfaasst haaptsächlech Affinitéits- a Spezifizitéitsanalyse, Stabilitéitsevaluatioun a biologesch Funktiounsverifizéierung.