Hybridoma Technologieplattform

Alpha Lifetech huet vill Erfahrung am Beräich vun der Antikörperentwécklung. Iwwer d'Jore huet Alpha Lifetech eng ëmfaassend Plattform fir d'Entwécklung vun Antikörper opgebaut (inklusiv d'Entwécklung vu monoklonalen Antikörper, d'Entwécklung vu polyklonalen Antikörper, d'Entwécklung vu rekombinanten monoklonalen Antikörper, an aner Servicer fir d'Virbereedung an d'Entwécklung vun Antikörper).

Alpha Lifetech bitt Clienten qualitéitsgeséchert Antikörper- a rekombinant Antikörperprodukter a Servicer, an déi preparéiert Antikörper hunn eng staark Spezifizitéit a gutt Stabilitéit. Verschidde Antikörperreinigungsinstrumenter an Ausrüstung kënne benotzt ginn, fir Antikörperreinigungsservicer aus verschiddene Quellen, wéi z. B. Kanéngchen, Schof, Poulet, Mausmonoklonal Antikörper, souwéi Protein A/G Affinitéitsreinigungsservicer an Antikörpertrennungsservicer, ze bidden.

Baséierend op verschiddenen Antikörpervirbereedungstechniken, wéi z. B. Hybridomzelltechnologie, kann Alpha Lifetech personaliséiert Servicer fir monoklonal a polyklonal Antikörper vu verschiddene Spezies ubidden. Zousätzlech kann eng Rei vu Servicer ugebuede ginn, vun High-Throughput-Sequenzéierung, Antikörpervirbereedung, Antikörperreinigung bis Antikörpervalidéierung. Mir wielen d'Reinigungsmethod op Basis vum spezifeschen Zweck vum Client. Baséierend op ëmfangräiche Plattformsystemer wéi Antikörperentwécklungsplattform a Proteinplattform, deckt Alpha Lifetech Upstream- a Downstream-Servicer vun der Antikörperproduktioun of, andeems se Antikörperreinigung, Antikörper-High-Throughput-Sequenzéierung, Antikörpervalidéierung an aner technesch Servicer ubitt.

Hybridom Technologie

D'Hybridomtechnologie kann benotzt ginn fir monoklonal Antikörper ze preparéieren. Duerch d'Fusioun vu Miltzellen aus immuniséierte Mais mat Myelomzellen vu Mënschen oder Mais ginn Hybridomzellen geformt, déi spezifesch Antikörper sekretéieren. Déi generéiert Maus-ofgeleet monoklonal Antikörper kënnen an der wëssenschaftlecher Fuerschung wéi enzymgekoppelten Immunosorbent-Assay, Radioimmunoassay, Immunhistochemie, Flowcytometrie, Proteinreinigung, etc. benotzt ginn. Monoklonal Antikörper-Prouwen enthalen Aszites, Hybridom-Iwwerstand, etc. D'Prouf, déi duerch d'Injektioun vun Hybridomzellen an d'Bauchhöhl vun Déieren an d'Benotzung vum physiologeschen Ëmfeld vun der Bauchhöhl vum Déier fir d'Produktioun vun Antikörper kritt gëtt, gëtt Aszites-Prouf genannt. Hybridomzellen, déi an d'Bauchhöhl vun Déieren injizéiert ginn, kënne sech proliferéieren a monoklonal Antikörper sekretéieren, déi sech an Aszites sammelen kënnen. Wéinst der Méiglechkeet vun Ongereinheeten (Déiereproteinen, Hormonen, etc.) an dësen Antikörper ass eng Reinigung noutwendeg. Baséierend op der Sekretiounsfunktioun vu B-Lymphozyten, ginn monoklonal Antikörper dacks an d'Kulturmedium sekretéiert wann Hybridomzellen kultivéiert ginn. D'Flëssegkeet, déi monoklonal Antikörper am Kulturmedium enthält, gëtt Hybridom-Iwwerstand genannt. D'Reinheet vun de monoklonalen Antikörper am Iwwerstand ass relativ héich, awer eng weider Reinigung ass fir eng grouss Virbereedung erfuerderlech, well se duerch In-vitro-Kultur gewonnen ginn.

D'Antikörperreinigung kann Antikörper mat héijer Rengheet aus Komplexer isoléieren. Aktuell sinn d'Antikörperaffinitéitsreinigung an d'Antikörpertrennung a -reinigung allgemeng benotzt Antikörperreinigungsmethoden, haaptsächlech Protein A/G-Reinigung, Ionenaustauschchromatographie, Gelfiltratioun, Nidderschlags- a hydrophob Interaktiounschromatographie. Dorënner ass de Protein A/G-Affinitéitsreinigungsservice a verschiddenen Antikörperreinigungsapplikatiounen wäit verbreet. De Prozess vun der Virbereedung vun monoklonalen Antikörper op Basis vun der Hybridomtechnologie vun Alpha Lifetech gëtt an der Figur 1 gewisen.

Fig. 1 Prozessdiagramm fir d'Virbereedung vun monoklonalen Antikörper op Basis vun der Hybridomtechnologie.

Antikörper-Drogenkonjugat- a Hybridomtechnologie

Antikörper-Medikamentenkonjugat (ADC) ass en neit biologescht Agens, dat Antikörper chemesch mat zytotoxesche Medikamenter koppelt. Antikörper-Medikamentenkonjugat kombinéiert déi spezifesch Erkennungsfäegkeet vun Antikörper mat dem staarken Tötungseffekt vu zytotoxesche Medikamenter a liwwert zytotoxesch Medikamenter präzis duerch Antikörper an d'Tumorzellen, wouduerch eng präzis Behandlung erreecht gëtt. Den Antikörperdeel an ADC-Medikamenter gëtt dacks duerch Hybridomtechnologie oder aner Antikörperproduktiounstechniken, wéi z. B. Gentechnik-Antikörpertechnologie, hiergestallt. D'Hybridomtechnologie liwwert héichqualitativ Antikörper-Rohmaterialien fir ADC-Medikamenter. ADC-Medikamenter a monoklonal Antikörper, déi duerch Hybridomtechnologie hiergestallt ginn, spille wichteg Rollen a Beräicher wéi der Kriibsbehandlung. Si kënnen eleng oder a Kombinatioun benotzt ginn, fir d'therapeutesch Effizienz ze verbesseren.

Monoklonal Antikörper, déi mat der Hybridomtechnologie hiergestallt ginn, hunn eng héich Spezifizitéit, kënne spezifesch Antigenen präzis bannen an erkennen, a kënnen a grousser Skala produzéiert ginn. Duerch d'Hybridomsequenzéierungstechnologie kënnen Antikörpergenen an Hybridomzellen extrahéiert a sequenzéiert ginn, fir entspriechend Sequenzen ze kréien, wat fir déi spéider Antikörperexpressioun virdeelhaft ass. Monoklonal Antikörper, déi mat der Hybridomtechnologie hiergestallt ginn, kënne benotzt ginn, fir spezifesch Krankheetsmarker, wéi Tumormarker, viral Antigenen, etc., z'entdecken, wat eng staark Ënnerstëtzung fir eng fréi Diagnos vu Krankheeten bitt. Zousätzlech kënne se och an Experimenter wéi Immunoblotting an Immunhistochemie benotzt ginn, fir d'Proteinexpressioun, d'Lokalisatioun, d'Struktur an d'Funktioun ze studéieren.

Hybridomtechnologie Produktioun Antikörper Service Workflow

Schrëtt	Serviceinhalt	Zäitlinn
Schrëtt 1: Déierenimmuniséierung	(1) Déierimmuniséierung 4 Mol, Boosterimmuniséierung 1 Dosis, am Ganzen 5 Dosen immuniséiert. (2) Negativt Serum virun der Immuniséierung gouf gesammelt, an ELISA gouf op der véierter Dosis duerchgefouert fir den Serumtiter ze bestëmmen. (3) Wann den Antikörpertiter am Serum vun der véierter Dosis d'Ufuerderunge erfëllt, gëtt eng zousätzlech Impfdosis 7 Deeg virun der Bluttentnahme verabreicht. Wann dës d'Ufuerderunge net erfëllt, gëtt d'Routineimpfung weidergefouert. (4) Qualifizéiert Potenz, Milzzellen ginn fir Zellfusioun isoléiert.	10-12 Wochen
Schrëtt 2: Fusioun a Screening	(1) Fusioun: No der Immuniséierung goufen d'Mausmëltzellen gesammelt a mat Myelomzellen fusionéiert. (2) Proliferatioun a Screening: Déi kritt Hybridomzellen goufen enger Proliferatioun an engem ELISA-Screening ënnerworf, fir héich effizient Klonen ze kréien.	6 Wochen
Schrëtt 3: Subklonéieren	Subklonéierung vun 15-25 positive Mammezellen mat der limitéierter Verdënnungsmethod, an schliisslech Bestëmmung vun 10-15 positive Klonen	3-4 Wochen
Schrëtt 4: Aszitesproduktioun a Reinigung vun Antikörper	(1) Aszitesproduktioun: 10-15 Hybridomstämme gi fir d'Aszitesproduktioun bei Mais benotzt (wann eng grouss Zuel vun Hybridomstämme kritt gëtt, ginn se a Zellform geschéckt) (2) Aszites-Identifikatioun: Aszites-ELISA-Detektioun, Potenz (Protein/Virus>10 ^ 5, klengt Molekül/Peptid>10 ^ 4) fir d'Downstream-Reinigung (3) Purifikatioun vu Protein A/G: Purifikatioun vun Aszites	3-4 Wochen
Schrëtt 5: Liwwerung	(1) 3-5 monoklonal Antikörper-Hybridomstämme liwweren. (2) All Hybridomzell liwwert 1 mg gereinegten Antikörper (Aszitesreinigung). (3) Rapport iwwer den experimentellen Prozess	1 Woch

Virdeel vun der Hybridomtechnologie

Alpha Lifetech huet vill Erfahrung am Beräich vun der Antikörperentwécklung. Iwwer d'Jore huet Alpha Lifetech eng ëmfaassend Plattform fir d'Antikörperentwécklung opgebaut.

Verschidde Spezies

Immunitéit kann verschiddenen Déieren zougestane ginn, dorënner awer net limitéiert op Mais, Kanéngercher, Schof, etc.

Méifach Ziler

Baséierend op der Hybridomtechnologie sinn eng Rei vun Zil-Antikörper-Entdeckungsdéngschter verfügbar: Proteinen, Peptiden, kleng Molekülen, Virussen, Membranproteinen, mRNA, etc.

Traçabilitéitsopzeechnungen

Qualitéitskontrollstandarden fir QC (Immunpotenz, PBMC-Qualitéitskontroll, Bibliothéiksqualitéitskontroll a Screeningvalidatiounsqualitéitskontroll), englesch experimentell Rapporten, originell experimentell Opzeechnungen

Personaliséiert Programm

Eenzelpersounsprogramm fir d'Ufuerderunge vun de Fuerschungsprojeten vun ënnerschiddleche Clienten ze erfëllen

Strategien fir d'Entwécklung vu verschiddenen Antikörper

Service fir d'Entwécklung vu monoklonalen Antikörper

Hybridoma Technologieplattform

Eenzel B-Zell Sortéierungsplattform

Plattform fir d'Entwécklung vun Antikörper fir Phagen

Entwécklung vu monoklonalen Antikörper - Alpha Lifetech

Service fir d'Entwécklung vu monoklonalen Antikörper

Mir kënnen héichqualitativ, héichreine a ganz spezifesch Entwécklungsdéngschter fir monoklonal Antikörper ubidden, dorënner d'Produktioun vu monoklonalen Antikörper vu Maus a monoklonalen Antikörper vu Kanéngchen.