Service fir d'Entwécklung vu monoklonalen Antikörper

Alpha Lifetech Inc.kann Epitopprognose, Peptidsynthese, Proteinexpression, polyklonal oder monoklonal Antikörperproduktioun souwéi Antikörperreinigung aus Zellkultur, Aszitesflëssegkeet oder Ganzserum ubidden.

Alpha Lifetech Inc.huet Erfahrung am Bereitstellen vu verschiddene stabile Zelllinn-Servicer fir Clienten, dorënner Hybridomzellen, Genom-Editing-Zelllinnen, Knockdown-Zelllinnen an Iwwerexpressiounszellinnen. Mir probéieren all Client fortgeschratt personaliséiert Zelllinn-Servicer unzebidden an eis Servicer si bewisen a vertrauenswierdeg.

Strategie fir d'Entwécklung vun Antikörper

1. Antigen-Design a Virbereedung
Dës Antigenen kënne Proteinen, Peptiden oder aner Moleküle sinn. Den Design vun Immunogenen erfuerdert eng ëmfaassend Approche, déi Wëssen iwwer Antigenstruktur, Immunologie a Liwwersystemer integréiert. Alpha Lifetech huet Antigen-Designtechnologie, déi Immunogenen fir Clienten an Nout entwéckele kann.
Alpha Lifetech bitt rekombinant Proteinprodukter fir Clienten zur Auswiel. Mir hunn eng Vielfalt vu Proteinexpressiounssystemer, wéi E. coli Expressiounssystem, Hefexpressiounssystem, Baculovirus-Insekt Expressiounssystem, Mamendéier Expressiounssystem, etc., fir déi rekombinant Proteinen ze produzéieren, déi Dir fir d'Fuerschung braucht.

2. Déierenimmuniséierung
Alpha Lifetech kann Clienten Immunogenen ubidden, an immun Déieren wéi Mais, Kanéngercher, Schof, Alpakaen, Meerschwäincher, Hamsteren, etc. stinn zur Auswiel.

3. Methoden fir d'Produktioun vu monoklonalen Antikörper

●Mabs-Produktioun mat Hybridoma-Technologie
En Hybridom ass eng Hybridzell, déi duerch d'Fusioun vun zwou Zorte vun Zellen entsteet, nämlech d'Maus-Myelomzell-Linn a Plasmazellen (Lymphozyt B), an deenen déi heterozygot Zell kontinuéierlech Antikörper géint den Antigen vun Interesse in vitro produzéiere kann. D'Produktioun vun enger Hybridomzell-Linn besteet aus dräi Deeler: Antigen-Design (Haptenen, kleng Molekülen a Peptiden), Déierimmuniséierung, Zellfusioun a positivt Klon-Screening. Mat eenzegaartegen Immuniséierungsmethodologien erreeche mir aussergewéinlech héich Zellfusiounseffizienzen (1-10 Hybridome pro dausend B-Zellen) an héich Antikörper-Titer, wouduerch mir eis Erfollegsquote a spéideren analyteschen Tester maximéieren, déi biochemesch Screening, in-vitro Zell-baséiert Tester an Déierstudien enthalen.

●Mabs-Produktioun duerch Phage-Display-Technologie
Phage-Display bitt eng aner Method fir monoklonal Antikörper ze generéieren. B-Lymphozyten ginn aus Déiereblutt isoléiert an hir mRNA gëtt extrahéiert. Duerch PCR gëtt dës mRNA an cDNA ëmgewandelt, déi all VH- a VL-Segmenter amplifiéiert. Dës Segmenter ginn dann an e Vektor geklont, typescherweis als Single-Chain Variable Fragmenter (scFv), zesumme mam PIII-Protein vun engem Bakteriophag. Duerno gëtt dëse Konstrukt benotzt fir E. coli z'infizéieren, wat zu der Schafung vun enger Bibliothéik féiert, déi ongeféier 10^10 Zellen enthält, duerch Inokulatioun mat engem Hëllefsphag. E. coli ass dann fäeg, de Bakteriophag ze sekretéieren, deen d'VH- a VL-Segmenter als Deel vu sengem Mantel enthält. Duerno kënnen spezifesch VH- a VL-Segmenter, déi op den Antigen vun Interesse abzielen, ausgewielt a benotzt ginn, fir E. coli mam Bakteriophag nei z'inokuléieren. Zellen, déi de Plasmid enthalen, ginn dann isoléiert a sequenzéiert.

4. Fusiounsscreening

●Zellfusioun a Selektioun
Déi geerntet B-Zellen ginn dann mat Myelomzellen fusionéiert, dat sinn Kriibszellen, déi sech an enger Kultur onendlech proliferéiere kënnen. D'Fusioun gëtt typescherweis mat enger Technik wéi Polyethylenglykol (PEG)-Fusioun erreecht.
No der Fusioun ginn d'Hybridomzellen an engem selektive Medium kultivéiert, dat nëmmen d'Hybridome iwwerliewe léisst. D'Medium enthält normalerweis Aminopterin, wat de Wuesstum vun net-verschmutzte Myelomzellen verhënnert.

●Screening a Clonging
Déi resultéierend Hybridomzellen ginn op d'Produktioun vun Antikörper getest, déi spezifesch fir den Zilantigen sinn. Dëst gëtt typescherweis mat Technike wéi Enzym-gekoppelten Immunosorbent-Assay (ELISA), Western Blot, Immunoprezipitatioun a Flowcytometrie gemaach.

Soubal Hybridomzellen, déi den Antikörper produzéieren, identifizéiert sinn, gi se klonéiert fir eng Populatioun vun identeschen Zellen ze generéieren. Dëst garantéiert, datt den Antikörper, deen vun all Hybridomzell produzéiert gëtt, identesch ass.

5. Funktional Verifizéierung vun Antikörper
Alpha Lifetech bitt funktionell Validéierung vun Antikörper, wéi Western Blotting, Immunhistochemie oder funktionell Tester, fir monoklonal Antikörper ze charakteriséieren an d'Spezifikitéit, d'Affinitéit an d'Funktionalitéit vun den Antikörper ze bestätegen.

6. Antikörperoptimiséierung
D'Reinigung vun Antikörper aus Kultursupernatant mat Hëllef vun Techniken ewéi Protein-A- oder Protein-G-Affinitéitschromatographie, an Alpha Lifetech kann och Antikörpermodifikatiounsmethoden ubidden, fir d'Antikörperaffinitéit ze verbesseren.

7. Antikörperproduktioun
Alpha Lifetech kann Kandidatenantikörper fir Screening-Uwendungen mat héijem Duerchsatz a groussskalesch Produktioun evaluéieren.