Plattform fir d'Entwécklung vun Antikörper fir Phagen

Alpha Lifetech, mat senger extensiver Projeterfahrung an der Entdeckung vun Antikörper, kann personaliséiert monoklonal a polyklonal Antikörper-Servicer fir verschidde Spezies ubidden, souwéi Antikörperbibliothéiken opbauen a Screening-Servicer. Alpha Lifetech kann Clienten qualitéitsgeséchert Antikörper- a rekombinant Antikörperprodukter, souwéi entspriechend Servicer ubidden, fir effizient, héichspezifesch an stabil Antikörper ze preparéieren. Duerch d'Benotzung vun ëmfaassenden Antikörperplattformen an Antikörper-Engineering bidden mir Servicer, déi den Upstream- an Downstream-Programm vun der Antikörperproduktioun ofdecken, dorënner technesch Servicer wéi Antikörpervirbereedung, Purifikatioun, Antikörpersequenzéierung a Validatioun.

Alpha Lifetech huet eng ausgereift Plattform fir d'Entdeckung vun Antikörper, déi hire Clienten eng Rei vu Servicer ubitt, dorënner Déierimmunitéit, Bau a Screening vun Antikörperbibliothéiken fir Phage-Display, Antikörpersequenzéierung, Antikörperexpressioun, Antikörperreinigung, Antikörpervalidéierung an Antikörpermarkéierung baséiert op Hybridomtechnologie, Single-B-Zelltechnologie, Phage-Displaytechnologie a méi. Alpha Lifetech huet eng Standardproduktiounslinn, an zousätzlech zu Antikörpervirbereedungsservicer kënnen och ënnerstëtzend Servicer wéi Antikörperhumaniséierung, Antikörperaffinitéitsreifung, ADC-Medikamentendesign an -entwécklung, an CAR-T-Sequenzdesign nofolgend ugebuede ginn. Gläichzäiteg huet Alpha Lifetech eng Antikörperbibliothéik baséiert op M13-, T4- an T7-Phage-Display-Technologieplattformen gebaut, mat enger Späicherkapazitéit vu bis zu 10^8-10^9. Déi positiv Rate, d'Insertiounsrate an d'Diversitéit vun der Bibliothéik kënnen all iwwer 90% erreechen.

Phage Display Technologie

D'Produktioun vu monoklonalen Antikörper gouf ufanks mat Hëllef vun der Hybridom-Monoklonal-Antikörpertechnologie virbereet, fir monoklonal Hybridom-Antikörper aus Maus ze produzéieren. Duerch d'Fusioun vu Miltzellen aus immuniséierte Mais mat Myelomzellen aus Mënschen oder Mais ginn Hybridomzellen geformt, déi spezifesch monoklonal Hybridom-Antikörper-Antikörper sekretéieren. Duerch d'humaniséiert Modifikatioun vu monoklonalen Antikörper aus Maus an d'gentechnesch Modifikatioun vun den Antikörper, fir hinnen eng konstant mënschlech Immunoglobulinregioun ze ginn, kann hir Immunogenizitéit reduzéiert ginn. D'Monoklonal-Antikörper-Engineering gëtt wäit verbreet a biomedizineschen a klineschen Uwendungen agesat.

Alpha Lifetech kann One-Stop-Antikörper-Engineering-Servicer ubidden, vum Design vu präklinesche Fuerschungsprotokoller bis zur Entdeckung vun Antikörper-Medikamentenkonjugater (ADCs) an der Validatioun bei Déieren. Antikörper-Medikamentenkonjugater (ADCs) kënnen Chemotherapie-Medikamenter a Kriibszellen liwweren. Nodeems se sech un spezifesch Ziler gebonnen hunn, déi op Kriibszellen expriméiert ginn, fräisetzen d'ADC zytotoxesch Medikamenter an d'Kriibszellen. Alpha Lifetech kann de Clienten och ëmfaassend Antikörper-Affinitéitsreifungsservicer ubidden. Mat fortgeschratt Mutatiounsoptimiséierung an High-Throughput-Phage-Display-Screeningtechnologie ginn Antikörper mat enger bestëmmter Affinitéit als éischt gescreent, an duerno ginn Aminosäuremutatiounen agefouert fir verschidde Varianten ze generéieren. Duerno goufen Antikörper mat héijer Affinitéit mat Screeningtechniken evaluéiert a gescreent. No verschiddene Ronnen vun Optimiséierung a Strukturanalyse goufen schlussendlech Antikörper mat méi héijer Affinitéit a méi staarker Spezifizitéit kritt.

Alpha Lifetech kann verschidden Zorte vun Antikörper-Phage-Display-Bibliothéiken opbauen, dorënner Immunbibliothéiken, nativ Bibliothéiken, semi-synthetesch Bibliothéiken a synthetesch Bibliothéiken. Baséierend op der héijer Kapazitéit vun den Antikörperbibliothéiken kënnen héich spezifesch Antikörper kritt ginn. Verschidde Phagemidvektoren wéi pMECS, pComb3X a pCANTAB 5E kënne geliwwert ginn, souwéi Stämm wéi TG1 E. coli, XL1 Blue an ER2738. Zousätzlech zu enger Bibliothéikskapazitéit vu bis zu 10^9 ass d'Insertiounsquote vun den Zilfragmenter vun der Bibliothéik och héich, wat genuch Konditioune fir d'Screening vun Antikörper schaaft, déi d'Clienten zefridden stellen. De Flussdiagramm vum Antikörpervirbereedungsservice vun Alpha Lifetech baséiert op der Phage-Display-Technologie gëtt an der Figur 1 gewisen.

Fig. 1 Prozessdiagramm fir d'Virbereedung vun monoklonalen Antikörper baséiert op Phage-Display-Technologie.

Workflow fir d'Produktioun vun Antikörper am Phage-Display

Schrëtt	Serviceinhalt	Zäitlinn
Schrëtt 1: Déierenimmuniséierung	(1) Déierimmuniséierung 4 Mol, Boosterimmuniséierung 1 Dosis, am Ganzen 5 Dosen immuniséiert. (2) Negativt Serum virun der Immuniséierung gouf gesammelt, an ELISA gouf op der véierter Dosis duerchgefouert fir den Serumtiter ze bestëmmen. (3) Wann den Antikörpertiter am Serum vun der véierter Dosis d'Ufuerderunge erfëllt, gëtt eng zousätzlech Impfdosis 7 Deeg virun der Bluttentnahme verabreicht. Wann dës d'Ufuerderunge net erfëllt, gëtt d'Routineimpfung weidergefouert. (4) Qualifizéiert Potenz, Bluttsammlung an Trennung vu Monocyten	10 Wochen
Schrëtt 2: cDNA-Virbereedung	(1) PBMC Total RNA Extraktioun (RNA Extraktiounskit) (2) Héichqualitéits-RT-PCR-Virbereedung vun cDNA (Reverse Transkriptiounskit)	1 Dag
Schrëtt 3: Opbau vun der Antikörperbibliothéik	(1) Mat cDNA als Schabloun goufen d'Genen duerch zwou Ronnen PCR amplifizéiert. (2) Phagekonstruktioun an Transformatioun: Gensplicing-Phagemidvektor, Elektroporatiounstransformatioun vun TG1-Wirtbakterien, Konstruktioun vun der Antikörperbibliothéik. (3) Identifikatioun: Zoufälleg 24 Klonen auswielen, PCR Identifikatiounsquote + Insertiounsquote. (4) Assistéiert Phagevirbereedung: M13 Phage-Amplifikatioun + Purifikatioun. (5) Rettung vun der Phag-Display-Bibliothéik	3-4 Wochen
Schrëtt 4: Screening vun der Antikörperbibliothéik (3 Ronnen)	(1) Standard 3-Ronnen-Screening (Festphasen-Screening): Drockscreening fir net-spezifesch Antikörper sou wäit wéi méiglech ze entfernen. (2) Selektioun vun enger eenzeger Klonamplifikatioun duerch Bakteriophagen + IPTG-induzéiert Expressioun + ELISA-Detektioun vu positive Klonen. (3) All positiv Klonen goufen fir d'Gensequenzéierung ausgewielt.	4-5 Wochen

Virdeel vun der Phage-Display-Technologie

Alpha Lifetech huet vill Erfahrung am Beräich vun der Antikörperentwécklung. Iwwer d'Jore huet Alpha Lifetech eng ëmfaassend Plattform fir d'Antikörperentwécklung opgebaut.

Ënnerstëtzungsdéngschter

Mir kënnen no de Bedierfnesser vum Client verschidden Déiereschutz-Immunbibliothéiken opbauen an natierlech Antikörperbibliothéiken duerch Screening-Servicer ubidden.

Méifach Ziler

Et gi verschidde Servicer fir d'Entdeckung vun Zil-Antikörper verfügbar: Proteinen, Peptiden, kleng Molekülen, Virussen, Membranproteinen, mRNA, asw.

Méifach Vektoren

Personaliséierte Bibliothéikskonstruktiounsservice, mir kënnen verschidde Bakteriophagevektoren ubidden, dorënner PMECS, pComb3X a pCANTAB 5E, a se no de Bedierfnesser vum Client upassen.

Plattform fir reife Leit

D'Späicherkapazitéit kann 10 ^ 8-10 ^ 9 erreechen, d'Insertiounsraten sinn all iwwer 90%, an d'Affinitéit vun den Antikörper, déi duerch Screening kritt ginn, ass allgemeng um nM pM Niveau.

Strategien fir d'Entwécklung vu verschiddenen Antikörper

Service fir d'Entwécklung vu monoklonalen Antikörper

Hybridoma Technologieplattform

Eenzel B-Zell Sortéierungsplattform

Plattform fir d'Entwécklung vun Antikörper fir Phagen

Entwécklung vu monoklonalen Antikörper - Alpha Lifetech

Service fir d'Entwécklung vu monoklonalen Antikörper

Mir kënnen héichqualitativ, héichreine a ganz spezifesch Entwécklungsdéngschter fir monoklonal Antikörper ubidden, dorënner d'Produktioun vu monoklonalen Antikörper vu Maus a monoklonalen Antikörper vu Kanéngchen.

Hybridoma Technologieplattform

Inklusiv Immuniséierungsprogramm, Antikörpervirbereedungsservicer, Antikörperreinigung, Antikörper-High-Throughput-Sequenzéierung, Antikörpervalidéierung, etc.

Eenzel B-Zell Sortéierungsplattform

Alpha Lifetech huet Virdeeler wat d'Screeningzäit an d'Erhale vun héichqualitativen Antikörper ugeet. Et kann Antigendesign, Synthese a Modifikatioun, Déierimmunitéit, Screening vun eenzelne B-Zellen an Eenzelzellsequenzéierung ubidden.